杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，据图回答下列问题：

(1)图中的卵母细胞应选择处于                  期的细胞；为了获得更多的卵母细胞，需用                激素对雌性杜泊羊进行超数排卵处理，该方法获得的卵母细胞                   (填“能”或“否”)直接进行体外受精。

(2)用于移植的早期胚胎通常处于                 阶段。为了充分发挥单个胚胎的繁殖潜力，可通过                 技术获得同卵双胎。此双胎羊的性别                   (填“相同”或“不相同”或“不一定相同”)。

(3)杜泊羊的ES细胞可由囊胚的                      分离培养获得。该细胞的结构特点是                         。

【生物——选修3：现代生物科技专题】

   杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点,被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示,

（1）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其      。采集的精子需要经过      ，才具备受精能力。判断卵细胞是否受精的重要标志是      。

（2）在体外培养受精卵时，培养液中通常需加入         等一些天然成分，还需要提供CO₂以维持            。

（3）在胚胎移植前要对接受胚胎的当地普通绵羊进行          处理。代孕母羊对置入子宫的早期胚胎基本上不发生        ，这就为早期胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

（4）采用胚胎分割技术能得到“同卵多胞胎”，对胚胎进行分割时，要特别注意将        均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。

[生物——选修3现代生物技术专题]

   基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：

（1）基因工程的核心步骤是________________________，这一过程需要的酶是___________________________________________。

（2）一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，________，________，标记基因等。通常用________________________技术将目的基因导入动物细胞。

（3）欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取________________，用________________________杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，反之，表明奶牛中未出现抗原蛋白。

（4）胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是_________________________________。

（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用___________________分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将____________________均等分割。

回答有关基因工程和胚胎工程的问题：

I .抗冻蛋白是一类抑制冰晶生长的蛋白质，能降低水溶液的冰点，从而导致水溶液的熔点和冰点出现差值，这个温度差称为热滞值。昆虫抗冻蛋白的热滞值最高，为3～ 6℃，鱼的热滞值为0.7～1.5℃。因此，昆虫抗冻蛋白在实际应用上具有更大的潜力。为了扩展一些植物的生存范围，科学家利用昆虫抗冻蛋白（AFPS）的异源表达，现已成功地提高了烟草的抗冻能力。请分析回答相关问题：

（1）基因工程的核心步骤是__________________，这一过程需要的工具酶是____________________。将AFPS基因导入烟草细胞中，常用____________法，这是因为烟草属于双子叶植物，此操作过程中使用的运载体是___________。

（2）若检测是否产生抗冻蛋白，一般采用_________方法进行分子水平的检测。

II .胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。

（1）有时需要将早期胚胎分割，提高胚胎的利用率。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意                 ，以免影响胚胎的恢复和进一步发育。

在对囊胚阶段的胚胎做DNA分析性别鉴定时，所取的样本是          细胞。

（2）试管牛能在受体子宫中存活的生理基础是                      。

（3）胚胎干细胞培养也是一项重要的胚胎工程技术。胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的，在功能上具有           ，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。在体外培养条件下，为保持胚胎干细胞的未分化状态，通常在培养皿中铺上一层          细胞或培养在添加了抑制因子的培养液中。

日前，英国研究人员利用最新的3D打印技术，“打印”出了活体胚胎干细胞。实验证明，这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力。科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞，在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞。请回答：

（1）自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或                中分离出来的一类细胞。

（2）上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有                          、                        。胚胎干细胞在形态上表现为体积小，细胞核大，          明显，在功能上具有                   。

（3）将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变，在分子水平上需要采用         技术。

（4）若选用囊胚进行胚胎分割，要注意对其               做到均等分割。

（5）胚胎移植是否成功，与供体和受体的生理状况有关。在胚胎移植操作中，应对供体和受体母畜进行

              处理才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致。