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            • 1.
              角膜缘干细胞能更新角膜上皮细胞,角膜上皮细胞对维持角膜的透明性至关重要.回答下列问题:
              (1)将角膜缘组织剪碎,加入 ______ 处理,可获得大量游离分散的细胞.细胞悬液在培养瓶中培养,当贴壁生长的细胞发生 ______ 现象时停止增殖.
              (2)通常角膜缘干细胞的培养控制在10代以内,原因是 ______ .
              (3)离体培养角膜缘干细胞时,一般需要在合成培养基中加入 ______ 等天然成分,培养时所需的气体主要有 ______ .
              (4)研究发现,细胞因子能够调控角膜缘干细胞分化.放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的功能进而抑制细胞因子的调控,由此推断该抑制过程发生在 ______ (选填“复制”、“转录”或“翻译”)水平.
              (5)研究还发现,皮肤干细胞可以诱导分化为角膜缘干细胞,这体现了皮肤干细胞具有 ______ .临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官,从而解决了 ______ 问题.
            • 2.
              啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种,对啤酒的品质、风味有很大影响.请回答:
              (1)若实验室中啤酒酵母菌种被杂菌污染,可采用 ______ 进行纯化培养:接种时,先将接种环在酒精灯火焰上灼烧,待其 ______  后,蘸取带菌培养物放到新的培养基中.倒置培养皿恒温培养直到出现 ______ ,再进行菌种鉴定.
              (2)为实现啤酒发酵连续生产,酵母细胞固定化技术已在啤酒工业中广泛应用.例如,将啤酒酵母和海藻酸钠混合均匀,经CaCl2处理形成凝胶颗粒,而酵母细胞则被固定在其内部.这种固定化方法称为 ______ (A.吸附法   B.包埋法   C.交联法   D.共价偶联法).
              (3)科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中,进而转入 ______ ,发酵生产转基因酵母乙肝疫苗.在构建重组质粒过程中,通过同种限制性核酸内切酶(-G↓AATTC-)切割得到的一个目的基因和一个开环质粒,共有 ______ (A.1 个    B.2 个    C.3个D.4 个)粘性末端.将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后,需要对所有受体细胞进行筛选,这是因为 ______ .该转基因技术实践应用的成功标志是 ______ .
              (4)转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用.人们将经过基因改造的胚胎干细胞与 ______ 融合,得到 ______ ,并促使其在体外分裂发育成 ______ ,再通过胚胎移植获得后代.目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法,其原因是 ______ .
              (5)胚胎干细胞具有重要的生产和临床医学价值.在培养胚胎干细胞时,首先要在培养皿底部制备一层细胞,称为 ______ ,其作用是 ______ .
            • 3. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中所选的卵母细胞应处于 ______ 期.
              (2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其 ______ 分离出ES细胞,ES细胞在形态上表现为 ______ 的特点.
              (3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的 ______ .可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成 ______ ,利用 ______ 技术扩增Rag2基因片段.用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
            • 4. “今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一,其本质是利用腺病毒和人P53基因(抑癌基因)拼装得到的重组病毒.人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复,使其恢复正常,或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡,阻止细胞癌变.“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒,其致病力很弱,其基因不整合到宿主细胞的基因组中,无遗传毒性;载体经基因工程改造后,只对细胞实施一次感染,不能复制,不能污染.请回答下列问题:
              (1)在“今又生”的生产中,为了获得更高的安全性能,在载体一般应具备的条件中,科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的 ______ 特点.检测P53基因的表达产物,可以采用 ______ 技术.
              (2)如果要大量扩增P53基因,一般采用 ______ 技术,该技术中需使用的一种特殊的酶是 ______ .除此之外,获得目的基因还可以采取的方法有:化学方法直接人工合成和 ______
              (3)在研究中如果要获得胚胎干细胞,则胚胎干细胞可来源于囊胚的 ______ 或胎儿的原始性腺,也可以通过 ______ 技术得到重组细胞后在进行相应处理获得.在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是 ______
            • 5. 【生物——选修3:现代生物科技专题】(15分)

              人的血清白蛋白有着广泛的药用价值,科学家通过培育乳腺生物反应器生产人血清白蛋白,流程如下:

              (1)在基因工程中,①被称为       。若①因数量少而不能满足生产需要,常利用     技术进行扩增。

              (2)②应该取自     (填“雄性”或“雌性”)荷斯坦奶牛,由②到③的过程中,需将②用    处理后进行培养。

              (3)从③到④的过程中,用于核移植的供体细胞③一般都选用传代10代以内的细胞,原因是            ;作为受体细胞的卵母细胞需培养至

                   期;形成④时常通过     (物理方法)进行激活,使其完成分裂和发育进程。

              (4)④培养至⑤后,可通过     技术获得多个⑥,从而提高胚胎的利用率。胚胎移植的实质是                

            • 6. 胚胎干细胞(ES细胞)在基础生物学、畜牧学和医学上都具有十分重要的价值,胚胎干细胞的应用前景吸引着众多科学家投入到这一研究领域中.根据相关知识,回答下列问题:
              (1)哺乳动物的胚胎干细胞(ES细胞)是由 ______ 或原始性腺中分离出来的一类细胞,在功能上具有 ______ ,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞.
              (2)ES细胞液是研究体外细胞分化的理想材料,ES细胞在 ______ 细胞上能维持不分化的状态.在培养液中加入 ______ 可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化.
              (3)ES细胞的另一个重要的应用前景为体外诱导分化,从而培育出人造组织器官,进而解决临床上存在供体器官不足和 ______ 问题.此外科学家还试图用基因工程的方法对动物器官进行改造:向器官 ______ (供体/受体)基因组中导入某种调节因子,以抑制 ______ (抗原/抗体)决定基因的表达或设法除去该基因,再结合 ______ 技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因动物器官.
            • 7. 某人因大面积烧伤需要皮肤移植,下列哪种来源的皮肤最容易成功(  )
              A.将父母的胚胎干细胞定向诱导分化成的皮肤
              B.将兄弟或姐妹的胚胎干细胞定向诱导分化成的皮肤
              C.将子女的胚胎干细胞定向诱导分化成的皮肤
              D.自己的皮肤细胞经细胞培养技术培育成的皮肤
            • 8. 美国学者已成功地利用人体皮肤细胞诱导出具备胚胎干细胞功能的干细胞,并利用皮肤干细胞治疗镰刀型细胞贫血症获得进展.下列叙述中正确的是(  )
              A.人体皮肤细胞是高度分化的细胞,遗传物质发生改变
              B.从皮肤细胞诱导出具备胚胎干细胞功能的干细胞,是细胞再分化的过程
              C.皮肤干细胞用于治疗镰刀型细胞贫血症是其经诱导形成了造血干细胞
              D.与利用人体胚胎干细胞进行研究和疾病治疗相比,皮肤干细胞没有优势
            • 9. 【生物—选修3:现代生物科技专题】

              图为科学家采用不同方法培育良种牛的过程.请据图回答有关问题:

              (1)“转基因牛”D培育过程中,常用受精卵作为外源基因的受体细胞,其主要原因是________.检测目的基因是否翻译成蛋白质通常采用的方法是________.

              (2)“试管牛”技术的操作流程是________.(用图中字母和箭头形式表示)

              (3)d操作的名称是________.若要对早期胚胎进行长期保存,应将其置于________条件下.

              (4)受体母牛必须和供体牛属于同一物种.移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________.

              (5)在动物细胞体外培养过程中,除了需要营养、适宜的温度和PH以外,还需要提供________和________.

              (6)图中数字标号③代表的结构为________,哺乳动物的胚胎干细胞(ES细胞)是由内细胞团①或________中分离出来的一类细胞,在功能上具有________,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞.

            • 10. 哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。下图就是利用小鼠的胚胎干细胞获得转基因小鼠的流程图,请分析回答下列问题:

              (1)图中作为供体的是发育到             阶段的胚胎,A是           

              (2)上述实验,胚胎干细胞可以作为受体细胞,是因为具有            特点;目的基因导入受体细胞应先与运载体结合,其目的是                          

              (3)获得转基因小鼠还需要动物细胞培养。动物细胞的体外培养需要满足                         、适宜温度和气体条件等。

              (4)获得转基因小鼠的最后一道“工序”是             ,代孕的母鼠需要进行                          处理以保证胚胎的正常存活和发育。

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