近日中科院公布了一项名为“NS1笫三代免疫缺陷小鼠”的技术。这意味着在不久之后，肿瘤患者在选择治疗、用药方案时，可以拥有一名小白鼠“替身”，用以提高治疗精准率，降低患者痛苦。请回答:

  (1)通常制备免疫缺陷小鼠时，要去掉骨髓、吞噬细胞和NK细胞(自然杀伤细胞，机体重要的免疫细胞)。此外，还需要全去掉小鼠体内的________________________(答两种)等特异性免疫细胞。

  (2)该“免疫缺陷小鼠”是通过基因敲除来实现的。首先选取老鼠的____________________________(填“早期胚胎干细胞”或“T细胞”)，去掉_________________________(填“免疫基因”或“免疫抑制基因”)，再将该细胞移植到代孕母鼠体内，获得第一只基因缺陷小鼠。

  (3)构建多只带有癌症患者等量肿瘤细胞的NS1小鼠，均分为甲、乙、丙三组。通过检测小鼠肿瘤细胞的数量，可评估不同药物抗肿瘤的效果。方案见下表。已知药物1和药物2均有一定抗肿瘤活性，请补充预期结果和结论:

若甲、乙、丙组中肿瘤细胞的数量关系表现为______________(用“<”“>”或“=”表示)，则小分子药物1的抗肿瘤效果更强。

若甲、乙、丙组中肿瘤细胞的数量关系表现为______________(用“<”“>”或“=”表示)，则小分子药物2的抗肿瘤效果更强。

利用一定方法使细胞群体处于细胞周期的同一阶段，称为细胞周期同步化。以下是能够实现动物细胞周期同步化的三种方法（注：对数生长期是指细胞在一定的环境下，经过短暂的适应期，进而快速生长的时期，此时期营养充足，细胞会以对数生长）。回答下列问题：

（1）DNA合成阻断法：在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的DNA合成可逆抑制剂，处于细胞周期的________期的细胞不受影响而继续细胞周期的运转，最终细胞会停滞在细胞周期的_______期，以达到细胞周期同步化的目的。

（2）秋水仙素阻断法：在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的秋水仙素，秋水仙素能够抑制_______________，使细胞周期被阻断，即可实现细胞周期同步化。经秋水仙素处理的细胞________（填“会”或“不会”）被阻断在间期。

（3）血清饥饿法：培养液中缺少血清可以使细胞周期停滞在间期，以实现细胞周期同步化。从分子水平上讲，分裂间期的特点是_____________。

（4）通常在体外培养动物细胞，为了提高细胞克隆形成率，需要在适宜的培养基中添加_________激素来促进葡萄糖的吸收，并且以经射线照射本身失去增殖力的小鼠成纤维细胞作为__________来支持细胞生长。

供体细胞的抗原决定基因能编码抗原或与抗原形成有关的酶，导致器官移植过程中出现免疫排斥。科学家利用基因工程方法对猪的基因组进行改造，以解决人体移植器官的短缺和免疫排斥问题。回答下列问题：

（1）对猪基因组进行改造，可以选择某种有调控作用的目的基因，重组后导入受体细胞，以达到抑制猪抗原决定基因                     的目的。进行DNA重组时需要使用的工具酶是                    。

（2）选择猪胚胎干细胞作为受体细胞，胚胎干细胞是由            或         中分离出来的一类细胞。将目的基因导入后，利用标记基因的作用             含有目的基因的受体细胞。

（3）将含目的基因的胚胎干细胞注入猪的囊胚，而后将囊胚通过              技术移入受体子宫，获得转基因猪。

（4）采用核移植技术克隆转基因猪时，应选用处于              期的卵母细胞作为受体细胞；随后从构建的重组胚胎中分离得到胚胎干细胞，经诱导分化形成多种器官，这是利用了胚胎干细胞的                  。

若小鼠的造血干细胞内Rag₂基因缺失，则不能分化为成熟的淋巴细胞。如图是治愈Rag₂基因缺失引发的免疫功能缺陷症小鼠的流程图。请回答下列问题：

（1）重组细胞必须使用去核的卵母细胞作为受体细胞，说明卵母细胞________________________。

（2）图中②过程所用培养液的成分一般都比较复杂，除了一些____________外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。

（3）图中分离出的ES细胞是囊胚中的____________。除此之外，还可以从____________中提取ES细胞。

（4）图中③过程导入ES细胞的物质是____________。获得该物质用到的工具酶是____________。

（5）经④过程处理以后，为检测Rag₂基因的表达情况，可提取该小鼠骨髓细胞的蛋白质，用____________（物质）进行直接检测，也可利用____________，观察小鼠的发病情况，进行间接检测。

紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取分离出来的具有独特抗肿瘤作用的物质，目前靠从树皮中提取紫杉醇远远不能满足需求。回答下列问题：

(1)研究人员从红豆杉树皮中分离出具有产紫杉醇能力的内生真菌。将获得的菌丝体分别置于不同pH或温度的培养液中，并加入适量酶X溶液，经过一系列处理后，收集纯化的原生质体，结果如下。图表结果表明，酶X在________条件下活力最佳。

(2)培养基灭菌常采用__________法，灭菌后需要冷却到______________℃左右才能用来倒平板，平板冷却凝固后倒置其原因是_______________________________。

(3)若将收集到的原生质体培养液稀释104倍后，各取_____ mL稀释液分别均匀涂布在3个固体培养基上培养，一段时间后统计菌落数分别为18、19、17。这种接种方法是____________________________，得到的菌落数____________(填“大于”“等于”或“小于”)接种的有活力的原生质体的数量。

(4)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

⑤上述治病方法虽然操作复杂，但效果较为可靠，称为__________________。

英国科学家日前发明了一种培育成人干细胞(ES)的新方法，可能会带来治疗某些疾病的革命性新疗法。通过移植ES细胞可能治疗下列哪一组疾病

①糖尿病　②败血症　③21三体综合征　④老年痴呆症　⑤血友病　⑥肝衰竭

(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。

(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。

(3)步骤③中，需要构建含有基因Rag₂的表达载体。可以根据Rag₂基因的________设计引物，利用PCR技术扩增Rag₂基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________酶的酶切位点。

(4)为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_____，用抗Rag₂蛋白的抗体进行杂交实验。