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[生物——选修3：现代生物科技专题]
基因工程技术、细胞工程技术、胚胎工程技术等在生产实践中有着广泛的应用。请回答下列相关问题：
（1）基因表达载体的构建是基因工程的核心环节，其结构中________是RNA聚合酶识别和结合的位点，将基因表达载体导入牛受精卵常用的方法为________。
（2）为了检测目的基因是否表达成功，可以用________技术，若没有出现相应的杂交带，则可能需要用________做探针来检测是否转录出mRNA。
（3）若要大量克隆该转基因奶牛，先需要进行细胞培养，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养时需在培养基中加入一定量的________。该过程得到的早期胚胎进行移植时，要用某种激素对代孕母体进行________处理，以保证供、受体的生理状况相同。
（4）牛体内进行受精作用时，防止多精入卵的两道屏障先后是________、________。
