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            • 1. (1)凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶.从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中.

              ①科学家已经测出该酶的氨基酸序列,因此可以通过DNA合成仪用    方法来获取目的基因.获得目的基因后,常利用PCR技术(    反应)在体外将其大量扩增.
              ②目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是    
              ③工业化生产过程中,最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶,现多采用重组毛霉或重组的酵母菌来生产,毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是    
              ④研究发现,如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸,其催化能力将提高2倍.科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是    
              (2)胚胎移植是指将良种雌性动物配种后的    ,或者通过    及其他方式得到的胚胎,移植到    的其他雌性动物体内,使之继续发育成为新个体的技术.胚胎移植的基本程序主要包括    ,配种或进行人工授精(人工受精前,精子需    处理),对胚胎的收集、检查、培养或保存,    ,以及移植后的检查等步骤.
              (3)生态工程是实现循环经济最重要的手段之一,请写出它遵循的基本原理(至少答三项):    
            • 2. 我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛.目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品,大致过程如图所示:

              (1)哺乳动物的体外受精主要包括[a]    、[b]    和受精等几个主要步骤.若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能,可给供体注射    ,使其排出更多的卵子.
              (2)在过程C中需要用到的工具酶有    .要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、    、标记基因等部分.
              (3)d过程常用的方法是    ,e过程的名称为    
              (4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛,应采用    技术,通常选择    的桑椹胚或囊胚.
              (5)早期胚胎发育的几个阶段:受精卵→    期→桑椹胚→囊胚→    
            • 3. 动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵,进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术.目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品.大致过程如图所示:

              (1)在过程③中需要用到的工具酶有    .要保证人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达,基因表达载体除了要包括目的基因、标记基因等部分外,还必须有    
              (2)要实现超数排卵,应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用    处理.通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精,原因是    
              (3)将获得的重组细胞培养成早期胚胎后,移植到经过    处理的受体母牛子宫内.因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚,所以,在早期胚胎的培养基中,往往还需要添加    
              (4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛,应采用胚胎分割移植技术.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意将    均等分割.胚胎分割移植后发育成小牛,这些小牛的基因型    (填“相同”或“不同”).
            • 4. 胚胎干细胞(ES细胞)在基础生物学、畜牧学和医学上都具有十分重要的价值,胚胎干细胞的应用前景吸引着众多科学家投入到这一研究领域中.根据相关知识,回答下列问题:
              (1)哺乳动物的胚胎干细胞(ES细胞)是由    或原始性腺中分离出来的一类细胞,在功能上具有    ,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞.
              (2)ES细胞液是研究体外细胞分化的理想材料,ES细胞在    细胞上能维持不分化的状态.在培养液中加入    可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化.
              (3)ES细胞的另一个重要的应用前景为体外诱导分化,从而培育出人造组织器官,进而解决临床上存在供体器官不足和    问题.此外科学家还试图用基因工程的方法对动物器官进行改造:向器官    (供体/受体)基因组中导入某种调节因子,以抑制    (抗原/抗体)决定基因的表达或设法除去该基因,再结合    技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因动物器官.
            • 5. 图表示利用二倍体小鼠所做的实验,有关叙述正确的是(  )
              A.过程①需运用胚胎分割技术
              B.嵌合体幼鼠是二倍体
              C.代孕母鼠需进行超数排卵处理
              D.图中囊胚细胞的基因型都相同
            • 6. 根据生物科学技术有关知识,回答下列问题:
              (1)动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础.动物细胞培养需要提供无菌、无毒环境,因此除了要对培养液和培养用具进行灭菌外,通常还要在培养液中添加一定量的    ,以防培养过程中的污染;采用    方法,防止代谢产物积累对细胞造成危害.
              (2)在基因工程构建基因表达载体时,需要把来自cDNA文库的目的基因片段正确插入到表达载体的        之间.检测目的基因在受体细胞中是否表达,可采用的方法是    杂交.
              (3)应用胚胎工程技术培育“试管牛”,需要经过体外受精、        以及在母体中发育和分娩过程.若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体,则表明    过程已完成.
            • 7. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述,正确的是(  )
              A.采用胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎,可以看作动物的无性繁殖
              B.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行
              C.胚胎移植时,供体母畜需要具备优良的遗传性能
              D.试管动物技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术
            • 8. 利用生物工程技术,可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV,用于血友病的治疗.请回答下列问题:
              (1)根据凝血因子IV基因上游和下游的碱基序列,可用    技术获取并扩增基因.构建该基因表达载体时,所用到的工具酶是    ,该基因表达载体中,凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别是    
              (2)将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是    .受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和    
              (3)在体外胚胎培养时,应选用囊胚的    进行DNA分析,用于选择雌性胚胎.此期的胚胎也适于胚胎分割移植,此技术的优点是    
              (4)人凝血因子IV是一种胞外酶,该蛋白的加工是在    等细胞器上进行的.人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是    
            • 9. 如图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图,图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图.

              (1)图一所示,制备细胞悬液时,常用    酶来消化剪碎的组织块.配制培养液时,通常需要在合成培养基的基础上添加    等一些天然成分.当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂,这种现象称为细胞的    
              (2)ES细胞是由中分离出来的一类细胞,ES细胞在功能上具有发育的    
              (3)MEF细胞能够分泌某些蛋白质,其合成到分泌至细胞外的过程是:核糖体→    →囊泡→    →囊泡,再通过    方式分泌到细胞外.在培养液中单独培养ES细胞时,ES细胞容易发生分化,结合图二可推知MEF细胞的作用是    
              (4)在治疗性克隆过程中,细胞核取自患者细胞,这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生    反应.
            • 10. 白血病是由于造血干细胞增殖分化异常而引起的恶性增殖性疾病.目前治疗白血病的主要方法是骨髓移植,但骨髓配型的成功率较低,大大限制了白血病的治疗.随着基因工程的日渐兴起,迎来了基因治疗白血病的曙光.请回答下列相关问题:
              (1)骨髓移植必须进行骨髓配型实验,原因是    .目前,临床上通常通过使用    来提高造血干细胞移植的成活率.
              (2)造血干细胞移植之前先要进行培养.动物细胞培养一般分为        两个阶段.对于培养的环境条件,除需要适宜的温度、无菌无毒等以外,还要向培养液中通人氧气和二氧化碳,通人氧气的目的是    ,通人二氧化碳的目的是    ;对子所用的培养液,应定期更换,其目的是    
              (3)在进行细胞移植前,有时需对移植的细胞进行基因改造.要了解基因改造是否成功,可在分子水平上检测是否翻译成了相应的蛋白质,常用的方法是    
              (4)上述使用的正常细胞,通常为    代以内,以保持细胞正常的二倍体核型.
              (5)哺乳动物的胚胎干细胞是从    中分离出来的一类细胞,可以在体外被诱导    形成新的组织细胞,这使科学家进一步培育人造骨髓成为可能.
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