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            • 1． （2016春•江阴市期中）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作．回答下列问题：
              （1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是    ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为    ．
              （2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过    方法灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线．这样做的目的是    ．
              （3）示意图A和B中，    表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果．
              （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液中    的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高    的利用率．
              难度：中等
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            • 2． 如图是我国利用基因工程方法生产人生长激素的示意图．图中的质粒是基因工程中常选用的载体--pBR322质粒，ampR表示青霉素抗性基因，tetR表示四环素抗性基因，限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同．据图回答下列问题：

              （1）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，③过程采用的酶是    ，④过程采用的酶是    ．
              （2）为了提高⑤过程的成功率，常用    溶液处理大肠杆菌．作为受体的大肠杆菌细胞内，应不含    基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌．
              （3）如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成的DNA片段有    _种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占_    _．
              （4）按照图示的操作，将三角瓶中的大肠杆菌先接种到甲培养基上，然后分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置，一段时间后，菌落的生长状况如图所示．接种到甲培养基上的目的是筛选    的大肠杆菌．
              （5）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程    ，原因是    ．
              难度：中等
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            • 3． 某校兴趣小组的同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验．实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数．请回答与此实验相关的问题．
              （1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉，分别为细菌培养提供    、    ．
              （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是    ，并在    条件下接种．
              （3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于      中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种    ，作为对照进行实验．
              （4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有多种细菌．一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越    ．
              （5）细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为    ．
              难度：中等
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            • 4． 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并初步筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如表所示．请分析回答问题：
              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000mL
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中加入尿素的目的是    ，这种培养基属于    培养基．
              （3）在培养“目的菌”的实验过程中需要振荡培养，原因是    ．
              （4）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有    、    和    ．
              （5）将土壤样品经过梯度稀释后，涂布在培养基平板上，若培养基中存在有分解尿素的细菌，细菌合成的脲酶将尿素分解为    使pH增高，使其菌落周围会出现红色环带．细菌因没有    系统，其分泌酶与真核细胞蛋白质的分泌方式不同．
              难度：中等
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            • 5． （2016春•唐山校级期中）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
              （1）细菌生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、     四类．该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是    ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为    ．
              （2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过    灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是    ．
              （3）示意图A和B中，    表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果．
              （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液的    的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高    的利用率．
              难度：中等
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            • 6． （2016春•江阴市期中）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题．
              成分含量
              蛋白胨10.0g
              乳糖5.0g
              蔗糖5.0g
              K2HP042.0g
              显色剂（伊红•美蓝）0.2g
              琼脂12.0g
              将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
              （1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是    ；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该    ．
              （2）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是    ，因此需对培养基和培养皿进行    （填“消毒”或“灭菌”），操作者的双手需要进行清洗和    ．空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使破坏DNA的结构，    ．
              （3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是    ．通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为    ．
              （4）根据用途划分，该培养基属于    （填“选择”或“鉴别”）培养基，配置该培养基时，需要将培养基的pH值，用于调节pH值的物质应该在灭菌    （前/后）加入．
              （5）使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是    （多选）．
              A．制作果酒    B．由果酒制作果醋   C制作泡菜    D．制作腐乳
              （6）右图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是    ．（填序号）
              ①安全阀、放气阀、压力表②放气阀、安全阀、压力表
              ③安全阀、放气阀、温度表④放气阀、安全阀、温度表．
              难度：中等
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            • 7． （1）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行    （消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和    ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能    ．
              （2）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的    ．
              （3）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的    ．
              （4）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是    ．
              （5）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过    处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
              难度：中等
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            • 8． 桑葚酒‍是一种新兴的果酒，它是水果酒之中的极品，具有滋补、养身及补血之功效．其制作工艺流程为：

              （1）上述流程中，A为    过程，该过程中涉及到的无菌操作不包括下列的    ．
              A．无菌操作前应先对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒
              B．为避免周围微生物污染，菌种转移时应在酒精灯火焰旁进行操作
              C．接种用具、培养器皿等器具和配制的培养基常要用高压蒸汽法灭菌后才可使用
              D．实验完成后所有用过的器皿和培养基等都应先用高锰酸钾溶液消毒后再洗涤
              （2）为加快酿酒的发酵过程，B过程的替代方法是加入足量经少量蔗糖活化后的    ．
              （3）为防止发酵过程产生大量的CO2致使发酵液溢出出现杂菌污染，装量时发酵缸中浆汁的体积应控制在    以下．
              A．1               B．
              1
              2
                            C．
              2
              3
                            D．
              1
              3

              （4）为提高成品桑葚酒的澄清度和纯度，除必要的过滤操作外，可在酒精发酵阶段和澄清阶段分别加入事先经    技术处理后的酵母菌和    酶．
              （5）经此工艺制成的成品桑葚酒的酒精浓度明显高于葡萄酒但仍不超过    ，原因是酒精浓度一旦超过该值时酵母菌就会死亡．此外桑葚酒还具有桑葚特有的素雅果香和陈酿酒香，其中的挥发性醋酸的来源过程主要为    （用反应式表示）．
              难度：中等
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            • 9． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮丰富的有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行    处理．
              （2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养基的成分应注意    ．从物理性质上看，该培养基为    体培养基．制备该培养基的一般步骤为：计算→称量→    →灭菌→    ．
              （3）在第2次及其后划线总从上次划线末端开始的原因是    ．
              （4）培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    或有氧条件抑制了这些细菌的生长．其中无透明带菌落的出现说明该培养基中还出现了能利用    的微生物．
              难度：中等
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            • 10． （2016春•彭州市期中）某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答问题．
              （1）接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌，常用的灭菌方法是    ．培养基中加入化合物A的目的是筛选    ．
              （2）实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是    ，振荡的目的    ．
              （3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量    的培养液，接入新的培养液中连续培养的目的是    ．
              （4）转为固体培养时，为获得单菌落进行继续筛选，常采用    法或    法，接种后，应将培养皿    （填“正放”或“倒置”），目的是    ．
              （5）实验结束时，使用过的培养基应该进行    处理后，才能倒掉．
              （6）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑    、    和渗透压等条件．由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、    、    等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料．
              难度：中等
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