（1）.下列操作必需在严格无菌条件下进行的是（     ）

   A．称量牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分     B．利用平板划线法接种细菌 

   C．用酒精擦拭双手                       D．溶化牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分

（2）按功能分，筛选该菌株时所用的培养基称为                        ；该培养基中必须添加的成分有                  （多选）等。  

A.琼脂   B．葡萄糖   C．硝酸铵   D．纤维素

（3） 刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶

的                      有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是              (填图中序号)

（4）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株        更适合用于人工瘤胃发酵,理由是                       。

(1)酵母菌在果酒制作过程中发挥重要的作用，发酵装置需短通气→密封→定时排气等流程，其中通气的目的是________，密封的目的是________。

(2)在果酒的基础上制作果醋时，主要的发酵菌是________，该菌在________条件下能将乙醇间接转化成乙酸。

(3)制备果汁类饮料吋，首先要获取能分泌高活性________酶的微生物，分离该微生物时，向固体培养基上接种微生物的常用方法是________，提取该微生物分泌的此酶可采用的方法有________。为提高该复合酶的利用率，一般不选择________法进行固定。

(1)过程②常用的发酵菌是________，在苹果酒的基础上制作苹果醋时，需要________(填“升高”、“降低”)温度，同时还需要适当________．

(2)该发酵菌种可以从食醋中分离获得．若用平板划线法分离该发酵菌，接种结束后，对接种环还要进行一次________灭菌，是为了________．

(3)对该发酵菌进行扩大培养时，将其接种到液体培养基中并混匀，然后分为甲乙两组．甲组进行静置培养，乙组进行振荡培养，结果发现________组培养的发酵菌生长速度快，原因是________、________．

2 近年来，有科学家把来自于动物体的精子注入到去掉DNA的卵细胞中，获得重组细胞，进一步培育出“孤雄单倍体胚胎”．

(1)该过程用到的技术手段主要有________、________．

(2)将重组细胞培育为胚胎的过程中，除必要的营养条件、适宜的pH和温度外，还需保证其处在________的环境下，同时提供一定量的O₂和CO₂，其中CO₂的主要作用是________．

(3)科学家发现成活的“孤雄单倍体胚胎”细胞中含有的性染色体均为X染色体，分析可能的原因是________．拿出任何一个“孤雄单倍体胚胎”细胞，都可当作精子使用，使卵细胞受精，并生下正常小鼠，可能的原因是________．

(4)有人认为这种“人造精子”的基因可以被加工，比如敲除或增加某个基因，这使得科学家能方便地制造出实验所需要的小鼠模型，该过程用到的工具酶主要有________、________．

(1)葡萄发酵可产生葡萄酒,利用葡萄制作葡萄酒的过程中,发挥作用的微生物是　　　     　  　,其通过　　　　        　呼吸将葡萄糖分解为CO₂和酒精。 

(2)酵母菌利用大米可酿制米酒,待发酵产生大量酒精后,还要将米酒与酒糟分离,下图是农村家庭常用的装置,该装置构思巧妙,使用方便。

①从分离原理看,该装置是一个　　　　装置,铁锅1在该装置中起的作用是　                  。 

②若用此法提取玫瑰精油,收集到乳白色的乳浊液后,需加入NaCl,目的是　                     。 

③橘皮精油一般用　　　　　方法进行提取,胡萝卜素一般用　　　　　方法进行提取。 

(3)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中主要是　　  　　   　。它们产生的

　　    　　酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,产生的　         　　酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。 

由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α－淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。回答下列问题：

(1)为筛选目的菌，平板内的固体培养基应以淀粉作为唯一碳源，而碳源是指________的一类物质的总称。②、③过程需要重复几次，目的是________。

(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________；推测该同学接种时可能的操作失误是________。

(3)为了检测工程酵母菌的“特长”，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________的发酵罐需要后排气，其原因是________。

(4)酵母菌也是果酒发酵的重要发酵菌，发酵装置留1／3空间的目的是________。

现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程，请回答相关问题：

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在 &;         的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以         为碳源，并加入         的培养基上，筛选周围有         的菌落。

（2）在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶的浓度相同，则你认为三种酶液的活性               （填“一定相同”、“不一定相同”或“一定不同”），可以通过                                 进行定量测定。

（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是          ，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意                         。

35[生物一现代生物科技专题」(15分)

  回答现代生物科技方面的有关问题:

  (1)单克隆抗体的制备原理和方法如下图所示，这样制得的抗体为鼠源性抗体。

在此过程中，小鼠必须经过          才能获得所需的小鼠细胞，B过程需要用         处理，才能形成杂交瘤细胞。

(2)这种抗体临床应用时，对人是异种抗原，重复注射可使人产生        ，从而减弱或失去疗效，并增加了过敏反应。

(3)在上世纪80年代早期，人们开始利用基因工程制备抗体，以降低鼠源抗体的免疫原性。进行基因改造时，应该把下图的       和        进行连接，以避免如(2)所提到的麻烦;进行改造的过程中要用的工具酶有                 。

(4)将改造好的基因与质粒进行构建，构建好的结构称为             ，扩增构建好的结构采用的方法是                                                                  。

絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。其流程图如下,据图回答：

（1）溶菌酶的作用是_________________________。

（2）PEG的作用是_________________________。

（3）经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是_______________________________。

（4）目的菌株的筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_________的培养基上生长的AB融合菌，选择效果最好的最为目的菌株。

（5）为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中：同时设置________________为对照组。经搅拌、静置各3分钟后，分别测定上层水样的石油浓度COD值（COD值越高表示有机物污染程度越高）,计算石油去除率和COD去除率，结果如下图。

（6）目的菌的种群增长曲线是_____________型。在40～44小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是_________________。

利用选择培养技术从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物

（1）本实验所需培养基的碳源为___________。

（2）①→③重复培养的目的是：_____________________________。⑥和⑦属于对照组的是_____组。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________________________________。

（4）某小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中__________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高____________的利用率。

（5）科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：

 突变株A不能在一般培养基上生长的原因是____________________。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是_________________________。

苹果酒、苹果醋、苹果汁等是人们餐桌上的常见食品。请结合相关知识回答以下问题： 

（1）如图所示是在苹果酒的基础上制作苹果醋的流程图。

过程②常用的发酵菌是               ，可以在食醋中获得，分离和纯化该微生物的方法如下：第一步：配制培养基。根据物理性质，培养微生物常用的培养基为                     。 

第二步：采用                  法对培养基进行灭菌处理。

第三步：                              。

第四步：培养温度控制在                。

第五步：挑选符合要求的菌落。

（2）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10^－4、10^－5、10^－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是              ，此对照实验的目的是证明              过程中是否被杂菌污染。

（3）苹果泥与果胶酶混合能提高苹果的出汁率并使浑浊的果汁变澄清，其原因是                                   。

(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是       ，推测该同学接种时可能的操作失误是       。

 (3)为了将分离到的菌株进一步纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌落生长，最可能的原因是       。

(4)科研人员配制了a、b、c三种菌液进行实验，得到如图所示曲线，分析可知       菌液最适合在实际工程中应用，原因是        。