请回答下列与微生物培养相关的问题：

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生________酶，该酶能将尿素分解成____________。

（2）某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000ml，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中能分解尿素的细菌？__________（填“能”或“不能”），原因是__________________。

（3）某小组采用平板划线法分离某样品的细菌时，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_______________________________。使用稀释涂布平板法检测土样中细菌含量时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间，这样做的目的是_________________。

（4）在分离尿素分解菌的实验中，大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落，这种实验结果差异产生的原因可能是________________、_______________。

为获取可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌，研究人员进行了如下实验：

①制备含3％NaCl的固体培养基，以及含3％、5％和7％Nacl以高盐度工业废水中有机物为碳源的液体培养基；

(4)由图二可知，该耐盐菌最适合处理含________(浓度)NaCl的废水。用该耐盐菌处理较高盐度工业废水时，需要_________________(合理措施)，才能达到理想效果。

人们的日常生活与发酵技术密切相关。柿子经过发酵可制成柿子醋，以下是柿子醋制作的流程:柿果→挑选→清洗→去皮→去核→脱涩处理→切块→压榨→柿汁→灭菌→酒精发酵→醋酸发酵→灭菌→陈酿→淋醋→过滤→成品。请回答：

（1）脱涩过程可以用成熟的苹果、梨等水果释放的____________(气体)促进柿子成熟。

（2）将压榨后的柿汁加热到80℃保持10～20分钟的目的是                                      。酒精发酵可添加活性干酵母进行，发酵的原理是                                                                                           (写出反应式）。

（3）若醋酸发酵时需扩大培养醋酸菌种，实验室常用的接种方法是____________和______________。接种前应对培养皿、接种环和培养基进行灭菌，方法分别是​                                      ，接种时应在火焰附近进行，同时需设置空白培养基做对照，原因是                                                                                                                  。

水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

(1)下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为_______________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显__________(填“多于”或“少于”)选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

(2)要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用___________计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌____________个，该方法的测量值与实际值相比一般会___________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。

(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入________用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：_________________________________________________________________________________________________。

尿素是一种重要的农业氮肥，不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此，对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。回答下列问题：

（1）该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供_________________。

（2）该培养基可以选择出分解尿素的细菌，原因是___________________________。

（3）某同学用0.1ml的稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数（取10克该土壤加90ml无菌水制成稀释液）。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：231、212、256，则每克该土壤样品中的菌落数为___________。

（4）若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，可以向培养基中加入__________________。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高，pH升高的原因是__________________________。

（5）细菌的数目可以通过滤膜法来测定，例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现__________，根据培养基菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

(1)为了缩短泡菜制作时间，可在冷却的盐水中加入少量陈泡菜液，目的是___________________。

(2)泡菜液中的乳酸的产生场所是乳酸菌的___________。在制作泡菜初期，泡菜坛水槽总是有气泡冒出的主要原因是_______________。随着泡制时间的延长，泡菜坛中亚硝酸盐的含量变化趋势为__________

(3)为分离纯化出优质的乳酸菌，应挑选_________________的菌落作为候选菌。

(4)乳酸菌发酵产酸奶，发酵到后期时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是：___________________。

    (一)要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种，一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题：

    (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养，一般用LB培养基，在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是__________，为调节渗透压，要加入一定量的___________。为进行大肠杆菌的分离，还要加入琼脂配制成固体培养基，并进行倒平板的操作。

    (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________，为此，必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用_____________________法灭菌，接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时，除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外，还必须_________________________，以防止空气中的杂菌污染。

    (3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基，接种后将培养基置于37℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离时一般在固体培养基上采用____________法，并将培养皿_______________状态。

    (二)科学家将蜘蛛的蛛丝基因导入山羊体内，创造出转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。生产原理如下图。请回答：

    (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____________。如果选取的受体细胞为体细胞，当在培养过程中出现接触抑制现象时，需要进行____________培养。要使重组细胞具有发育的全能性，乙过程需要的技术操作是____________。

    (2)下列关于丙过程的叙述，正确的是______。

    A．该过程为动物细胞培养，目的是获得更多的重组细胞

    B．该过程所用培养液的成分往往是相同的

    C．该过程在无菌条件下进行，需要提供CO₂来调节pH

    D．通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

    (3)为了快速繁殖转基因山羊，还可在丁过程前对早期胚胎进行____________，经培养后再分别移植到____________________的代孕母羊的相应部位。

工业生产中，提取天然β一胡萝卜素的方法之一是利用红酵母等微生物进行发酵，经过菌体裂解、离心后进行萃取。请回答以下有关问题：

（1）若要初步确定某一菌株是否为红酵母菌株，相对简便的操作是通过________法将菌种接种于固体培养基上，并在适宜的条件下培养一段时间，观察其形成的菌落的________________（填2个）特征。

（2）碳源的种类对β－胡萝卜素的产量有着一定的影响，有关研究结果如下：

据表分析，最佳碳源是________。若要进一步探究最佳氮源，请简要写出实验设计思路：

_____________________________________________________________________________________________________________。

（3）有科研人员尝试利用紫外线处理红酵母，以获得高产菌株。对处理所得菌株分别进行培养并经裂解、离心后，根据β－胡萝卜素___________的特点，可以采用有机溶剂萃取法萃取产物，并对萃取产物通过________法进行鉴定，鉴定过程需要用________样品进行对比。经定量分析后，若得到高产菌株，要对其进行长期保存，可采用________的方法在－20℃的冷冻箱中保存。

（每空1分，共5分）某些土壤细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO₂作为碳源，原因是_______________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是___________________（答出两点即可）。

（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_________________（填“尿素”“NH₄NO₃”或“尿素 NH₄NO₃”）作为氮源，不选择其他两组的原因是_____________。

（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH₂PO₄和Na₂ HPO₄，其作用有_______________（答出两点即可）。