土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1  取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如下表）。

分析回答：

（1）从物理形态看，培养基A属于_____培养基。培养基中磷源应该是____。

（2）步骤1中接种方法是_____，步骤2中接种环的灭菌方法是_____。

（3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_____。

（4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min^-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到下图所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是________________________________________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是____________。

在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需求。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：

    （1）液体培养基中除了把葡萄糖作为____________外，还应该含有________________________。

    （2）样品中还发现了CV101、CV103新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：_______________。请设计并完成下列实验，来验证你的观点。

    ①配制______________________的固体培养基（A组）和不含碳源的固体培养基（B组）；

    ②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在____________条件下进行。

    ③预期实验结果：___________________________________________________________。

    （1）配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的____________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是__________。

    （2）接种微生物的方法有很多，图1中过程①②③所示的方法为___________________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/mL），这里的n＝________________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是_______________________。

    （3）为了检测乳酸菌对抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含抗生素A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___________（填“敏感”或“不敏感”）；含抗生素C滤纸片周围的透明圈比含抗生素A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是____________。

请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

（1）从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于                  ，它的同化作用类型是                    。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于       (选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是                        。

（3）在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行    (消毒、灭菌）操作者的双手需要进行清洗和      。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能          。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和             。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的       。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是                                                         。 若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过        处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（4）通常采用______法来测定亚硝酸盐的含量，其原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与______发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成______色染料。

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品,但易变质,保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离,并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果,为生产豆浆时,优化保质方法提供依据。主要研究过程如下:

①豆浆变质处理:将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250 mL三角瓶中,密封、37 ℃条件下,放置7 d后,豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数:取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上,培养一段时间后,统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表:

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果:以自制的新鲜豆浆为材料,经相应处理后,在37 ℃下放置35 d后,统计豆浆中腐败细菌数量,结果如图。

请回答下列问题:

(1) 步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是________,步骤②中培养基的常用灭菌方法是____________。 

(2) 步骤②中适宜采用的接种方法是________。区分菌落种类的依据是________________。统计菌落种类和数量时要每隔24 h观察统计一次,直到各类菌落数目稳定,以防止____________________。 

(3) 乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂,它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明,最能耐受乳酸链球菌素的细菌是____;为有效防止豆浆腐败,在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在____左右。 

(4) 与用抗生素防腐相比,使用乳酸链球菌素防腐的优点是_。 

A．大肠杆菌    B．产甲烷细菌    C．金黄色葡萄球菌      D．极端嗜盐菌

请回答下列有关“微生物的实验室培养”的问题：

（1）微生物的接种技术操作方法各有不同，其核心都是__________________________________。

（2）平板划线法是通过接种环在固体琼脂培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种___________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。

（3）平板划线时，每次划线前都需要灼烧杀死上次划线残留的菌种，其目的是_________________________________________________________。

（4）对水样中的大肠杆菌进行计数时，采用的技术方法为___________________，利用的培养基为___________________。

（5）对于需要长期保存的菌种，可以采用________________法。

Ⅰ.如图所示为某同学绘制的玫瑰精油的提取装置。请回答下列问题;

（1）分离装置中常加入氯化钠，目的是_________________________。制取纯玫瑰精油时，加入无水硫酸钠的目的是____________________________________。

（2）植物芳香油的提取方法有_________、_________、_____________，由于玫瑰精油具有化学性质稳定、_________________溶于水等特性，而适宜用图示方法提取。

（3）提取过程中，许多因素都会影响玫瑰精油的品质，例如______________，会导致产品的品质比较差，而如果提高品质，就需要延长___________________________。

Ⅱ.胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取。下图为某同学利用酵母菌R获得胡萝卜素的部分流程。请回答下列问题：

（1）采用平板划线法接种酵母菌R时，需先灼烧接种环，其目的是                     。培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供                                        。

（2）酵母菌R能分泌A、B两种酶，下图是某课题组关于这两种酶的实验结果：

图中结果显示，在40℃至60℃范围内，热稳定性较好的酶是      。高温条件下酶容易失活，其原因是                                                   。

Ⅲ.柠檬油是植物芳香油中的一种，它是一种广谱性的杀虫剂，可杀死蚊子、苍蝇、蟑螂和臭虫等传染疾病的害虫，以及危害粮食、蔬菜的常见害虫，包括幼虫、蛹等，被称为一种绿色杀虫剂。提取柠檬油的操作步骤如图。请根据实验流程图回答下列问题：

（1）压榨是个机械加压过程，要求既要将原料压紧，防止原料滑脱，又要将__________挤压出来。

（2）A是________________，目的是破坏细胞结构，分解果胶，防止压榨时果皮滑脱，提高________   。B过程一般加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠，其目的是使________________                 。

（3）C过程为________________，目的是除去固体物和残渣。

紫外线辐射可使细胞产生活性氧和自由基，二者容易发生一系列的氧化连锁反应，产生的某些氧化产物可以对细胞造成伤害。一些水果的果皮富含抗氧化剂，某研究小组的同学对“果皮成分能否保护细胞免受紫外线辐射伤害?”的问题进行了探究。(8分)

实验材料与用具：适宜浓度的大肠杆菌菌液、柚皮提取液、葡萄皮提取液、无菌水、已灭菌的大肠杆菌培养基(装在培养皿中)、接种环、紫外灯、恒温培养箱等。

 实验步骤： ①取6份大肠杆菌培养基，编号为a、b、c、d、e、f。

 ②按下表配方配制接种液，然后使用接种环分别将菌种接种到上述培养基上。

③紫外线照射：将a、b、c三份已接种的培养基置于紫外灯正下方]0cm处照射3min，然后立即用铝箔纸包住培养皿，与d、e、f三份已接种的培养基一起放入37℃恒温培养箱中培养。

④24h后，取出培养皿，观察、计数。

(1)因紫外线辐射所产生的某些氧化产物，很可能是通过诱导_   ▲ _而对细胞造成伤害的。

(2)a、d培养基接种液的配方是__▲ __+1mL无菌水，c、f培养基接种液的配方是__▲ _。

(3)无菌技术的目的是     ▲ _ ；培养基的灭菌方法是     ▲ _。

(4)本实验的因变量是___ ▲ ___。

(5)通过对实验结果的分析，可以得出的初步结论是__ ▲ ___。

(6)为提高本实验的可信度，下一步需要做的是___ ▲ _。