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            • 1. 某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起.请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤,并回答有关问题:
              (1)主要步骤:
              ①制备两种培养基:一种是    培养基,另一种    的培养基.分别分成两份,依次标上A、A′和B、B′,备用.
              ②分别向A、B培养基中接种    
              ③接种后,放在恒温箱中培养3~4天.
              ④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种,接种到A′、B′培养基中.
              ⑤接种后,把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3~4天.
              (2)回答问题:
              第④⑤两个步骤的目的是    
              在步骤①中,为保证无杂菌污染,实验中应采用的主要措施有            
            • 2. (2016春•建湖县校级期中)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题.
              成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4指示剂琼脂
              含量(g)10.05.05.02.00.212.0
              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于    
              (2)若根据用途划分,该培养基属于     (填“选择”或“鉴别”)培养基.微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、    四类
              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行    ;操作者的双手需要进行清洗和    
              (4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:        ,这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的    
              (5)图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数.此外,测定微生物数目的另一种方法是    
              在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌,完成图2中划线操作,共需要灼烧接种环    次.
            • 3. (2016春•成都期中)某种工业生产中会产生一些含碳有机废水(含氮量极少),某细菌X在该种生物处理废水中能发挥很大作用,现要对其进行筛选.
              培养液NaNO3牛肉膏K2HPO4MgSO4•7H2OKClNiSO4
              A--1g/L1g/L0.5g/L0.01g/L
              B3g/L3g/L1g/L1g/L0.5g/L0.01g/L
              C3g/L-1g/L1g/L0.5g/L0.01g/L
              (1)应选用上表中的    (填图中字母)培养液,解释不选用其他培养液的原因:①    ,②    
              (2)接种前培养基必须进行    灭菌,为确定培养基灭菌是否彻底,可设置    的培养基为对照组;若要制作平板,常在培养液中加入    作为凝固剂.对获得的目的菌种,可采用    法,长期保存.
              (3)为获得单个菌落,某同学将细菌X接种到正确的培养基中,经培养后,其中一个平板的菌落分布如图所示,该同学的接种方法是    ,所用的主要接种工具是    ,该同学可能的操作失误是    
              (4)对细菌X计数时,可吸取菌液1mL稀释1000倍,然后吸取稀释后的菌液0.2mL,接种于平板上培养,一段时间后观察到三个平板上的菌落数为61、62、63,则该菌液中的细菌X数量约为    个/mL.
            • 4. 回答下列问题:
              (1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑        和渗透压等条件.
              (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行    ;操作者的双手需要进行清洗和    ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能    
              (3)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行    的过程.该过程发生在乳酸菌细胞的    中.
              (4)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即        
              (5)利用葡萄制作葡萄酒的过程中,发挥作用的微生物是    
              (6)有些细菌可分解原油,而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株.在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以    为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于    培养基.
            • 5. (2016春•武汉校级期中)棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物,此外,木材、作物秸秆等也富含纤维素.现在环保工作小组正进行作物深加工,变废为宝.
              (1)作物秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母利用,纤维素酶是复合酶,其中的    可将纤维二糖分解成葡萄糖.除碳源外,培养基成分还应该有    、无机盐和水等.
              (2)能分解纤维素的微生物能合成纤维素酶,多见于腐殖土中,如纤维弧菌、噬胞菌等.分离纤维素分解菌常用的方法是    .其实验流程是:土壤取样→选择培养→    →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生    的菌落.实验时得到了如图所示的结果,则纤维素分解菌位于    内.
              A.①B.①②C.②③D.①②③
              (3)将获得的3种微生物甲、乙和丙分别接种在相同的选择培养基中继续培养(其他营养充足、且条件适宜),观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为18h、21h、42h,应选择微生物    作为菌种进行后续培养.后续分离纯化的工程中,若要测定培养液中的菌体数,可在显微镜下用    直接记录.
              (4)为了保持菌种纯净,对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,将菌种接种到试管的    培养基上,在合适的温度下培养.
            • 6. 最新研究表明,地球历史上最悲剧的物种大灭绝事件可能是由细菌导致的.该物种大灭绝事件发生于2.52亿年前二叠纪末期(在恐龙出现之前),无数物种由于无法及时适应当时气候变化,而逐渐消失灭绝.与此同时,某种细菌A得到快速大量繁殖,原因有二:
              第一,该细菌A能利用海洋沉积层的二氧化碳和氢气合成并释放甲烷,显著改变气候和海洋化学成分;
              第二,火山喷发导致镍元素迅速增多,这种至关重要的营养物质帮助微生物(细菌A)增殖.
              (1)从生态系统成分的角度看,该细菌A属于    
              (2)在进行微生物培养时必须防止外来其他杂菌的干扰.为此,在接种前,除了必须对培养皿、接种用具和培养基进行严格灭菌外,还必须对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外;在接种操作时,必须            
              (3)鉴于细菌A在高浓度有机废水的生物处理中能发挥很大作用,要对其进行筛选,则应选用表中的    培养液,针对不选用的其他培养液,分别说明原因:
               培养液NaNO3  牛肉膏K2HPO4  MgSO4•7H2OKClNiSO4 
               A-- 1g/L1g/L  0.5 g/L0.01g/L 
               B 3g/L3g/L  1g/L1g/L  0.5 g/L 0.01g/L 
               C 3g/L- 1g/L 1g/L0.5 g/L 0.01g/L 
                  ,②    
              (4)分离并观察细菌A,可采用    法将初筛菌液接种在配方适宜的    培养基上.接种前,必须对培养基进行灭菌的方法是    
              (5)细菌A计数,可吸取菌液1ml稀释1000倍,然后吸取稀释后的菌液0.2ml,接种于培养基上培养,接种所使用的工具是    .一段时间后观察菌落并计数,实验重复三次结果如图,则该菌液的浓度是    个细菌/ml.
            • 7. (2016春•泰州期中)表所示为筛选某种纤维素分解菌的培养基配方,用刚果红染色法鉴定.请据此回答下列问题:
              NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO4MgSO47H2OKCl酵母膏水解酪素纤维素粉蒸馏水
              1g1.2g0.8g0.5g0.5g0.5g0.5g5g定容至1000mL
              (1)根据上述配方可知该培养基是     培养基(填“固体”或“液体”).为观察菌落特征,通常在该培养基中加入    .从功能上看,该培养基为选择培养基,因为它只允许分解纤维素的细菌生长,其他种类的细菌会因为     生长受抑制.
              (2)该培养基的配制步骤包括:计算,称量,溶化,灭菌,    ;该培养基通常采用    法进行灭菌,据图结果分析在培养基接种时采用了     法.
              (3)若某同学取稀释倍数为106的稀释液各0.1mL分别制作了三个平板,统计的菌落数分别为183、176和169,则1mL 样品中的细菌数是     个,该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目    
            • 8. 微生物与人类关系密切,请分析有关的资料并回答问题:
              表1:A培养基配方
              KH2P04Na2 HP04MgS04.7H20葡萄糖尿素琼脂H2O
              1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g1000ml
              表2:B培养基配方
              纤维素粉NaN03Na2HP04.7H20KH2P04MgS04.7H20KCl酵母浸膏H2O
              5glg1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g1000ml
              (1)A培养基中氮源物质是    ,B培养基中属于碳源的是    .据B培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是    
              (2)依物理性质划分,A培养基属于    培养基.如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择上述    种培养基,该培养基能分离该菌的原因是    
              (3)制备培养基的基本操作步骤是    
              a.倒置培养基b.计算c.溶化d.称量e.灭菌 f.调PH值
              A.a→b→c→d→f→e B.e→b→d→f→c→aC.b→d→f→c→a→eD.b→d→c→f→e→a
              (4)通常培养基采用    法灭菌,原因是    .在制备固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒过来放置,这样做的目的是    
              (5)培养微生物时,接种方法有多种,常用的除了涂布法,还有    法、    法.将接种环在火焰上灼烧并冷却后才能接种的原因是    
            • 9. 如表所示为某微生物培养基的配方,请回答:
              成分含量
              NaNO33g
              K2HPO41g
              KCl0.5g
              MgSO4•7H2O0.5g
              FeSO40.01g
              (CH2O)30g
              H2O1 000ml
              青霉素0.1万单位
              (1)依物理性质,该培养基属于    培养基.依用途划分,则属于    培养基.
              (2)根据培养基原料,所培养微生物的同化作用的类型是    ,培养的微生物可能是    
              (3)该培养基中的碳源是    .不论何种培养基,在各成分都溶化后分装前,要进行的是    
              (4)若用该培养液培养纤维素分解菌,应除去的物质是    ,应加入的物质是    ,为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入    
            • 10. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行    处理.
              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,上述培养皿中培养基为    体培养基.对培养基进行灭菌,常采用的方法是    .实验操作者的双手用    消毒.
              (3)在第2次及其后划线总从上次划线末端开始的原因是    
              (4)培养后发现,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (5)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是    ,有透明带菌落利用的氮源主要是    ,据此可筛选出目的菌.
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