(1)大肠杆菌的同化类型为________，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________。

(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是________，因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使________，还能破坏DNA的结构。

(3)根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中________换成________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红·美蓝换成________。

(4)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是________和________。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为________。

(5)使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(多选)。

A．制作果酒    B．由果酒制作果醋    C．制作泡菜    D．制作腐乳

    某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______（填“能”或“不能”），原因是___________________________。

   （2）培养基用_________方法灭菌，培养皿用____________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________，以免造成污染。

   （3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

   （4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

   （5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

（1）某小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过　　　灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　　　。 

（3）某同学尝试接种的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示。该同学的接种方法是__________________；推测该同学接种时可能的操作失误是               。

（4） 为了检验某致病菌对于抗生素的敏感性，在该病菌菌落均匀生长的平板的不同位置，分别放置含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，由此推断，该病人目前适合使用的抗生素是______．含C的滤纸片周围透明圈比含A的小，说明                                ；若抗生素B的滤纸片周围没有出现透明圈，最可能的原因是                        导致的结果；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现一个菌落，这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的                ，也可能是由于                  产生的抗生素D的耐药菌。 

根据上述实验结果，回答下列问题。

(1) 将编号a和f比较可知，有____________的培养基表面会变浑浊。

(2) 将编号e和a的结果比较可知，____________不适合大肠杆菌生长。

(3) 将编号d和a的结果比较可知，____________不适合大肠杆菌生长。

(4) b和c的结果说明______________________________________________________。

(5) 假定在细菌的培养过程中，分离获得了不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株。请设计一个实验以鉴定这种维生素的类型。 

第一步：将变异菌株接种到________________培养基上扩大培养。 
第二步：配制一系列培养基，每种培养基为只添加某一种维生素的“完全培养基”。 
第三步：________________________________________________________________。 
第四步：________________________________________________________________。 

(6) 若已分离获得不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株，可采用____________________方法进行短期保存，要想长期保存可采用____________________方法。

    已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于        染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用        （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以              （ 填“淀粉”或“蛋白质”或“脂肪”）为碳源的固体培养基进行培养。若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用：_________________直接计数。

（3）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的脂肪、脂肪酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间后，检测各试管中的脂肪的分解情况。该实验温度设置的不足之处有  _______________________和_________________。

（4）某同学取5组试管（A～E）分别加入等量的同种脂肪，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的脂肪酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组脂肪的分解情况。通过A～D组实验可比较不同实验组脂肪分解情况的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的脂肪分解情况，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是                     。

（1）由于锈去津的　　　　　作用，在长期使用锈去津的土壤中可能含有目的菌。

（2）目的菌培养常用的接种方法有              和                ，后者可用来统计微生物数量，其计数方法叫                             ，该法统计结果比实际数目       。

（3）在固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源是　　　　　　；有透明带菌落利用的氮源是　　　　　　　，据此可筛选出目的菌。硝化细菌的代谢类型为                 ，筛选硝化细菌的培养基的碳源为            ，能源物为         。

（4）下图是A～C瓶中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是　　　　　　　　　　　　。

（5）微生物的培养需要适宜的条件，醋酸菌生长的适宜温度为             ，用毛霉制作腐乳的温度应控制在               ，菊花组织培养温度应控制在               。

（6）制作泡菜测定亚硝酸盐含量的方法为               。

（1）在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供适合的____和____条件；另一方面需要确保无处不在的其它微生物无法混入。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。

MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结

果如下表。

请回答下列问题：

(1)青霉素的用量是该实验的________变量。应保持________，目的是________。

(2)第2组和第3组对比表明MRSA菌对________有抗性，________能杀死MRSA菌。

(3)蛋白质H不是新型抗生素，理由是________。

(4)测定培养液中MRSA菌的活菌数量，不宜在显微镜下用________直接计数，适合选用________法进行计数，原因是________直接计数获得的结果包含活的MRSA菌和死的MRSA菌的总数，而用涂布法进行计数，计数的是菌落数，一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌。

40 [生物一选修3  现代生物科技专题]

下图为培育转基因山羊生产人β酪蛋白的流程图。

请回答下列问题：

(1)获取过程①所用的人β-酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的________，以其作为模板，在________的作用下台成________。

(2)重组人β-酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，是________识别和结合的部位。

(3)过程②可选用________阶段的胚胎进行移植。

(4)过程③可使用________技术扩大转基因山羊群体，除此之外，还可以采取的措施有________。

(5)过程④人β-酪蛋白基因在细胞内表达的场所为________。

已知硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基及硅酸盐细菌培养基上均能生长。表1为无氮培养基的配方，表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径。请回答下列问题：

(1)表1从物理性质上看属于________培养基，按用途划分，属于________培养基。

(2)硅酸盐细菌能在无氮培养基上生长，推测该细菌具有________功能。

(3)为统计硅酸盐细菌的数目，应采用________法进行接种，该方法的所有操作都应在________附近进行。表2中，稀释度为________时，统计的结果较为可靠。

(4)为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是________。由表2中的数据得出，用________培养基分离硅酸盐细菌的效果最好。

   [生物——选修3：现代生物科技专题]

如图所示为培育二倍体转基因抗虫棉的两种思路，其中EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，EcoRⅠ和BamHⅠ切割DNA形成黏性末端，SmaⅠ形成平末端。(箭头指向为对应的酶切位点。)回答下列问题：

(1)与思路2相比，思路1的最大优点是________。

(2)分析图可知，不宜选择SmaⅠ获取目的基因，理由是________；选择________酶，可避免目的基因和质粒的自身环化。

(3)基因工程获得抗虫棉的核心步骤是________。

(4)图①过程得到的重组质粒，除了图中标出的特殊DNA片段外，还应有________；将重组质粒导入植物细胞采用最多的方法是________，如采用该方法，则图中所用的质粒应为________。

(5)检测目的基因是否翻译的方法是________。

&;   某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答：

(1)培养基中加入尿素的目的是____，该培养基是____培养基（按功能分类）。 从同化作用类型来看的，该菌属于____。

(2)实验需要振荡培养，目的是____；转为固体培养时，常采用____的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(3)在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中的液体。其中需要灭菌的是____（填序号）。

(4)分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有____（填序号）。    

①取样不同    ②培养基污染    ③操作失误     ④没有设置对照

(5)以尿索为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入____指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素。理由是__________________。

(6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37恒温培养箱中培养24h-48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如下表，其中____倍的稀释比较合适。