选修题有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株．回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以     为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于     培养基．

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即     和     ．

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力     。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、     和          。无菌技术要求试验操作应在酒精灯     附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

(1)大肠杆菌的同化类型为________，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________。

(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是________，因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使________，还能破坏DNA的结构。

(3)根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中________换成________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红·美蓝换成________。

(4)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是________和________。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为________。

(5)使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(多选)。

A．制作果酒    B．由果酒制作果醋    C．制作泡菜    D．制作腐乳

(选修三)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

(1)过程①中最常用的运载工具是　　　　,所需要的酶是限制酶和　　　　。

(2)在过程②中,用　　　　处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中,将成纤维细胞置于5% CO₂的气体环境中,CO₂的作用是　　　　　。

(3)在过程③中,用　　　　处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行　　　　处理。

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是　　　　。在胚胎移植前,通过　　　　技术可获得较多胚胎。

（选修一）从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从　　　　　　　环境采集。

（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择　　　　　的培养基，并在　　　　　　　条件下培养。

（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 

获得图A效果的接种方法是　　　　　　　　，获得图B效果的接种方法是　　　　　　　　。

（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行　　　　　，接种前要进行　　　　　，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在　　　　　　　条件下进行。

（1）酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是___________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_____________。

（2）实验室可采用__________法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，还需要额外在培养基中添加_________________。

（3）为了保持所获得的菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，需将菌种接种在___________上。放入4℃冰箱中可保藏3-6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的_______ ___混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

（4）在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学认为是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持_______的观点，理由是______________。

    某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______（填“能”或“不能”），原因是___________________________。

   （2）培养基用_________方法灭菌，培养皿用____________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________，以免造成污染。

   （3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

   （4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

   （5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

（1）某小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过　　　灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　　　。 

（3）某同学尝试接种的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示。该同学的接种方法是__________________；推测该同学接种时可能的操作失误是               。

（4） 为了检验某致病菌对于抗生素的敏感性，在该病菌菌落均匀生长的平板的不同位置，分别放置含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，由此推断，该病人目前适合使用的抗生素是______．含C的滤纸片周围透明圈比含A的小，说明                                ；若抗生素B的滤纸片周围没有出现透明圈，最可能的原因是                        导致的结果；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现一个菌落，这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的                ，也可能是由于                  产生的抗生素D的耐药菌。 

根据上述实验结果，回答下列问题。

(1) 将编号a和f比较可知，有____________的培养基表面会变浑浊。

(2) 将编号e和a的结果比较可知，____________不适合大肠杆菌生长。

(3) 将编号d和a的结果比较可知，____________不适合大肠杆菌生长。

(4) b和c的结果说明______________________________________________________。

(5) 假定在细菌的培养过程中，分离获得了不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株。请设计一个实验以鉴定这种维生素的类型。 

第一步：将变异菌株接种到________________培养基上扩大培养。 
第二步：配制一系列培养基，每种培养基为只添加某一种维生素的“完全培养基”。 
第三步：________________________________________________________________。 
第四步：________________________________________________________________。 

(6) 若已分离获得不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株，可采用____________________方法进行短期保存，要想长期保存可采用____________________方法。

    已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于        染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用        （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以              （ 填“淀粉”或“蛋白质”或“脂肪”）为碳源的固体培养基进行培养。若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用：_________________直接计数。

（3）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的脂肪、脂肪酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间后，检测各试管中的脂肪的分解情况。该实验温度设置的不足之处有  _______________________和_________________。

（4）某同学取5组试管（A～E）分别加入等量的同种脂肪，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的脂肪酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组脂肪的分解情况。通过A～D组实验可比较不同实验组脂肪分解情况的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的脂肪分解情况，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是                     。

（1）由于锈去津的　　　　　作用，在长期使用锈去津的土壤中可能含有目的菌。

（2）目的菌培养常用的接种方法有              和                ，后者可用来统计微生物数量，其计数方法叫                             ，该法统计结果比实际数目       。

（3）在固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源是　　　　　　；有透明带菌落利用的氮源是　　　　　　　，据此可筛选出目的菌。硝化细菌的代谢类型为                 ，筛选硝化细菌的培养基的碳源为            ，能源物为         。

（4）下图是A～C瓶中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是　　　　　　　　　　　　。

（5）微生物的培养需要适宜的条件，醋酸菌生长的适宜温度为             ，用毛霉制作腐乳的温度应控制在               ，菊花组织培养温度应控制在               。

（6）制作泡菜测定亚硝酸盐含量的方法为               。

（1）在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供适合的____和____条件；另一方面需要确保无处不在的其它微生物无法混入。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。