54.（每空2分，共16分）请分析回答下列问题：

(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有____________灭菌、干热灭菌和________灭菌。

(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是        (        )

①土壤取样  ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液 

③吸取0.1 mL溶液进行平板涂布  ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵ 、10⁶、10⁷稀释度

A．①②③④         B．①③②④     C．①②④③         D．①④②③

(3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈______色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是______________________．

(4)酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为____________。

(5)在腐乳制作的过程中，起主要作用的微生物是____________。

(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些 (        )

①盐的用量  ②酒的种类和用量③发酵温度  ④发酵时间  ⑤香辛料的用量

A．①②③④⑤     B．①②③     C．①②⑤       D．③④

研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

(1)柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水并用________浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。

(2)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度________。

(3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4)柚皮油也可用萃取法来提取，原因是________。分析上图，提高萃取效果的方法是________、________。

生物技术的广泛应用，给社会带来了较大的经济效益，受到社会广泛重视。请回答下列有关问题：

(1)制作泡菜需要测定亚硝酸盐含量，其方法是________。其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—I—萘基乙二胺盐酸盐结合形成________，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

(2)生物柴油是一种可再生的清洁能源，一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，可从油料作物中提取植物油与甲醇在脂肪酶的催化下生成生物柴油，从微生物中提取脂肪酶通常需要检测________，为降低柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能重复使用。

(3)玫瑰精油被称为“液体黄金”，是世界香料工业不可取代的原料，多用于制造高级香水、化妆品等。玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，挥发性较强，要提取玫瑰精油可以用水中蒸馏法和________法，但一般采用水中蒸馏的方法，其原因是该法具有________的优点。在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳浊液的提纯过程中应先使用________分层，再使用________吸水。

(4)天然胡萝卜素可医治维生素A缺乏症，是因为________。在提取胡萝卜素的实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→A→胡萝卜素中，A过程叫________。

（1）提取玫瑰油的原料来自           ，提取方法是        ；实验中为加速油水混合物分层，可加入                。

 （2）胡萝卜素的提取方法是             ；实验过程中，尽量避免明火加热，原因是       ；该实验中的冷凝回流装置的作用是               。 

（3）图为胡萝卜素提取样品的鉴定结果示意图，图中②代表的物质是          。上述鉴定所用的方法在“绿叶中色素的提取和分离”实验中用于                 。

“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回。”这是唐诗中提及的葡萄酒。19世纪，法国的巴斯德发现葡萄汁变酒是酵母菌的发酵作用。
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（1）在无氧的条件下，酵母菌能进行酒精发酵，反应式是                          ，研究表明，酵母菌也可以在有氧条件下进行呼吸作用，说明酵母菌是一种    微生物。葡萄汁发酵后是否有酒精产生可以用重鉻酸钾来检验，在酸性条件下，重鉻酸钾与酒精反应的颜色变化情况是                 。

（2）酵母菌的酒精发酵过程一般控制在                温度范围，最适合酵母菌繁殖，请简要说明理由                                              。

（3）为了提高葡萄酒品质可以在葡萄汁中加入人工培养的酵母菌，可利用           培养基来分离获得较为纯净的酵母菌种。

（4）对野生酵母菌进行诱变可筛选出具有耐高糖和耐酸性的高产突变菌株，利用PCR技术可大量获得突变菌所携带的特殊基因，在PCR扩增反应中加入引物的作用是       ，加入DNA聚合酶的作用是                                      。