请根据以上图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是                          。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？_______________。

（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？     。

（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为               。

（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到________种DNA片断。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到________种DNA片断。

(1)过程①中，应提取_______________的基因组DNA作模板；同时根据________________基因的核苷酸序列合成引物，过程①中使用的工具酶为____________________

(2)进行过程③前，利用_______________处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。

(3)过程④中，应将大肠杆菌置于__________条件下诱导培养；然后提取大肠杆菌的____________进行检测，以鉴定目的基因是否成功表达，此方法称为___________

(1)如图表示目的基因在DNA分子中的相对位置及利用PCR技术(多聚酶链式反应)扩增目的基因过程中第一轮循环产生的产物：

①PCR技术的原理是利用了________。

②与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制________条件。

③PCR中加入的引物有________种。

④请绘出以3链为模板经PCR扩增的产物________。

(2)用两种识别序列不同的限制酶M和N切割(识别序列和切割位点如图)某种质粒后，通过凝腔电汰分离分析得下表：

则：①在该质粒中，N酶的切割位点有________个。

②若将M酶与N酶切出的DNA末端用________酶相互连接后，对于该连接部位序列是否仍可以用M酶、N酶进行切割：________(填“都可以”、“都不可以”或“只有一种可以”)。

（1）甲和乙的细胞都属于_________细胞．从图中看，与丙细胞结构主要区别是甲和乙的细胞都有___________________________。

（2）酵母菌产生ATP的场所是_______________________________。

（3）甲细胞比乙细胞代谢速率快，从结构方面找出可能的原因是：____________（多选）

A．甲细胞线粒体多   B．甲细胞核糖体多   C．甲细胞核孔多   D．甲细胞核仁大

（4）从甲图结构上提取了某种物质，加入双缩脲试剂出现紫色；若加入斐林试剂并加热，出现砖红色沉淀，则说明该物质是______________。

（1）图中②所示的生物技术的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，这是因为________。

（2）重组细胞培养成囊胚过程所用的培养液与植物组织的培养基在成分上的主要区别是前者必须含有________。重组细胞培养过程中所需要的基本条件包括充足的营养、________、________、气体环境。

（3）④所示的生物技术名称是________，若想得到大量健康的胰岛B细胞的胰岛素基因，可利用________技术。

（4）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是________。该种基因治疗所属类型为________。

用农杆菌转化法可以获取转基因抗病植物，回答有关问题：

(1)若该抗病基因取自某种真菌的CDNA文库，转入植物细胞后，________(能、否)正常表达。若想得到大量的抗病基因，需用到________技术，中文全称为________，条件除了原料、能量、模板外还需要________、________。

(2)某培养基中的卡那霉素会抑制愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的植物细胞，应使基因表达载体中含有________基因，作为________基因。

(3)农杆菌是一种在________中生活的微生物，农杆菌转化法适用于________和________植物，其原因是该类植物受到损伤时，伤口的细胞会分泌大量的________。

(4)Ti质粒的T—DNA(可转移的DNA)可整合到植物细胞中________上，所以，构建基因表达载体时，将目的基因插入到________中。用到的工具酶有________。

(5)鉴定成功获得转基因植物的最简捷的方法是________。

（1）催化①过程的酶是                ；核酸酶H的作用是                        。

（2）③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90~95℃时才能完成，说明DNA分子具

有                    性。

（3）由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是                  ，两者在作用特性上的区别是                                   。

（4）如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶              个。

 
（1）控制小鼠尾形的基因位于____（2分）（常/X/Y）染色体上，子一代雄鼠的基因型是____________（2分）。 

（2）为确定转基因小鼠DNA插入的具体位置，研究者让该转基因小鼠与非转基因弯曲尾雄性小鼠杂交，统计子代的表现型种类及比例，并进行了以下分析（不考虑交叉互换）：若子代表现型及比例为弯曲雌﹕正常雌﹕弯曲雄﹕正常雄=                    （2分），则该DNA片段的插入位置属于第一种可能性；若子代表现型及比例为弯曲雌﹕正常雌﹕弯曲雄﹕正常雄=                       （2分），则该DNA片段的插入位置属于第二种可能性。

（3）培育该转基因小鼠，需运用________技术将含有外源DNA的体细胞的细胞核与去核的______细胞融合得到重组细胞，培养至早期胚胎后通过                        技术转移至受体体内。 

（4）外源DNA影响B基因表达的机制是：二者转录的产物碱基互补配对从而抑制                     。 

（5）图二中的两条长链为B基因的两条单链，若要对B基因进行PCR扩增，应选用引物                      。该过程中需使用                        酶以合成子链中的

                     键。

“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回。”这是唐诗中提及的葡萄酒。19世纪，法国的巴斯德发现葡萄汁变酒是酵母菌的发酵作用。
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（1）在无氧的条件下，酵母菌能进行酒精发酵，反应式是                          ，研究表明，酵母菌也可以在有氧条件下进行呼吸作用，说明酵母菌是一种    微生物。葡萄汁发酵后是否有酒精产生可以用重鉻酸钾来检验，在酸性条件下，重鉻酸钾与酒精反应的颜色变化情况是                 。

（2）酵母菌的酒精发酵过程一般控制在                温度范围，最适合酵母菌繁殖，请简要说明理由                                              。

（3）为了提高葡萄酒品质可以在葡萄汁中加入人工培养的酵母菌，可利用           培养基来分离获得较为纯净的酵母菌种。

（4）对野生酵母菌进行诱变可筛选出具有耐高糖和耐酸性的高产突变菌株，利用PCR技术可大量获得突变菌所携带的特殊基因，在PCR扩增反应中加入引物的作用是       ，加入DNA聚合酶的作用是                                      。