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[选修1:生物技术实践](15分)
临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本(如痰液、粪便等),然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:
⑴为了从样本中分离并获取某种致病菌单菌落,可用 法或 法将人体样本接种于固体培养基表面,再经过选择培养、鉴别等步骤实现。
⑵为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,取该单菌落适当稀释,接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置,培养一段时间后,在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A>C>D>B。由此推断,该病人目前适合使用的是抗生素 。含D的滤纸片周围的透明圈比含A、C的小,但透明圈中出现了一个菌落,这种菌落的出现可能是由于杂菌污染导致的,也可能是由于该致病菌发生了突变;若发生了基因突变,这种突变一般是否由抗生素诱发的? ,若要证明这种致病菌发生了基因突变,可检测和比较这类细菌细胞中 (“DNA 的碱基组成”“mRNA 的含量”“ DNA 的碱基序列”)。
⑶为防止杂菌污染,培养基的灭菌方法是 灭菌,接种环的灭菌方法是 灭菌,接种过程应该在 旁进行。