(1)获得矮杆抗病小麦新品种，常规方法是进行杂交育种，其培育过程如下图所示：

子二代中出现矮杆抗病个体的比例为________，基因型有________种，最符合要求的基因型是________。

(2)若用单倍体育种，首先需利用子一代产生的花粉进行离体培养，得到的幼苗被称为________，为使幼苗染色体数目加倍，还需用________处理，因为它能抑制________的形成导致染色体不能移向细胞两级，引起细胞内染色体数目加倍。

(3)为获得符合要求的小麦品种，还可用物理因素(如X射线)来处理，该育种方法是________，利用的原理是________。

(4)利用基因工程技术，也可获得具有各种抗逆性的小麦新品种。转基因育种过程中需要用到一些工具，其中“基因的剪刀”是________，DNA连接酶是________(填“基因的针线”或“基因的运载体”)。

(选修三)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

(1)过程①中最常用的运载工具是　　　　,所需要的酶是限制酶和　　　　。

(2)在过程②中,用　　　　处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中,将成纤维细胞置于5% CO₂的气体环境中,CO₂的作用是　　　　　。

(3)在过程③中,用　　　　处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行　　　　处理。

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是　　　　。在胚胎移植前,通过　　　　技术可获得较多胚胎。

（选修一）从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从　　　　　　　环境采集。

（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择　　　　　的培养基，并在　　　　　　　条件下培养。

（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 

获得图A效果的接种方法是　　　　　　　　，获得图B效果的接种方法是　　　　　　　　。

（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行　　　　　，接种前要进行　　　　　，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在　　　　　　　条件下进行。

MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结

果如下表。

请回答下列问题：

(1)青霉素的用量是该实验的________变量。应保持________，目的是________。

(2)第2组和第3组对比表明MRSA菌对________有抗性，________能杀死MRSA菌。

(3)蛋白质H不是新型抗生素，理由是________。

(4)测定培养液中MRSA菌的活菌数量，不宜在显微镜下用________直接计数，适合选用________法进行计数，原因是________直接计数获得的结果包含活的MRSA菌和死的MRSA菌的总数，而用涂布法进行计数，计数的是菌落数，一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌。

40 [生物一选修3  现代生物科技专题]

下图为培育转基因山羊生产人β酪蛋白的流程图。

请回答下列问题：

(1)获取过程①所用的人β-酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的________，以其作为模板，在________的作用下台成________。

(2)重组人β-酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，是________识别和结合的部位。

(3)过程②可选用________阶段的胚胎进行移植。

(4)过程③可使用________技术扩大转基因山羊群体，除此之外，还可以采取的措施有________。

(5)过程④人β-酪蛋白基因在细胞内表达的场所为________。

（1）用稀释涂布平板法可以纯化三孢布拉氏霉菌，进行梯度稀释时一般是将1 mL菌液移入盛有________mL无菌水的试管中。常用_____________法进行活菌计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于______________________。但统计的菌落数往往__________（填“多于”或“少于”）稀释液中的活菌数。

（2）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有_________________________的特点，常用_______法提取胡萝卜素，其效率主要取决_________________。

（3）图为提取的胡萝卜素样品通过纸层析进行鉴定的结果，从图中分析可知，色带________为β­胡萝卜素。出现样品2的结果，可能原因是在操作过程中①________(A．萃取温度高，时间长　B．干燥温度高，时间长)；②________(A．未经浓缩蒸馏　B．点样太快，样点小)。

【选修3现代生物科技专题】继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，请回答下列问题。

（1）人的生长激素基因可以从人类cDNA文库中获取，建立该基因文库时通常需要从人的_________________细胞中提取全部的_____________，通过__________方法获取cDNA，并将其导入________________中储存。

（2）人的生长激素基因进入小鼠细胞内，且能维持稳定和表达的过程称为________。常用方法是_______________________。基本操作是：首先提纯含有目的基因的_________________。并将其转入________细胞中。经过早期胚胎培养后再移植到雌性动物的子宫或输卵管中使其发育。

（3）若要一次获得多只相同的转基因小鼠，可采用_________技术，该技术的最后一道工序是___________________。

胡萝卜是生活中常见的植物，根据所学知识回答下列有关问题。

（1）胡萝卜的韧皮部细胞中含有核酸的细胞器有&;      ，胡萝卜植株叶肉细胞的叶绿体和线粒体中，部分蛋白质由细胞核基因指导合成，说明二者具有       （选填“自主”、“半自主”）细胞器的特点。

（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是        法，用这种方法提取胡萝卜素常选用石油醚作为溶剂。

（3）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成       比。

（4）对提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时需要用         对照。

（5）用胡萝卜韧皮部进行植物组织培养所用的MS培养基通常要加入一定量的       、        等植物激素，以启动外植体的细胞分裂、脱分化和再分化。这两种激素的使用先后顺序和     都会影响植物组织培养的结果。

40 【生物———选修 3 :现代生物科技专题】( 15 分)

下图是人体免疫物质的培养方法，①~⑥ 表示不同的过程，请回答。

（1）方法 1 中，细胞 A 应具备的特点是      。体外培养细胞 Y 需要满足以下条件：           、添加了血浆（或 “血清”）培养基、适宜温度与pH、         的气体环境等。

（2）方法 2 中，通过④得到的目的基因与细胞 B 中原有基因            （一定/不一定）相同，⑤过程必须用到的工具酶有           ，结构甲的组成必须包括          及目的基因等。

（3）若用棉花生产抗体 2，⑥过程的受体细胞应选用                   ，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该抗体基因是否在再生植株中正确表达，通常采用                  法，在田间试验中检测植株是否含有该种抗体。

(1)过程①中，应提取_______________的基因组DNA作模板；同时根据________________基因的核苷酸序列合成引物，过程①中使用的工具酶为____________________

(2)进行过程③前，利用_______________处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。

(3)过程④中，应将大肠杆菌置于__________条件下诱导培养；然后提取大肠杆菌的____________进行检测，以鉴定目的基因是否成功表达，此方法称为___________

(1)如图表示目的基因在DNA分子中的相对位置及利用PCR技术(多聚酶链式反应)扩增目的基因过程中第一轮循环产生的产物：

①PCR技术的原理是利用了________。

②与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制________条件。

③PCR中加入的引物有________种。

④请绘出以3链为模板经PCR扩增的产物________。

(2)用两种识别序列不同的限制酶M和N切割(识别序列和切割位点如图)某种质粒后，通过凝腔电汰分离分析得下表：

则：①在该质粒中，N酶的切割位点有________个。

②若将M酶与N酶切出的DNA末端用________酶相互连接后，对于该连接部位序列是否仍可以用M酶、N酶进行切割：________(填“都可以”、“都不可以”或“只有一种可以”)。

 （1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是          ▲         

①通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具酶是          ▲           

②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在   ▲     酶的作用下延伸形成DNA。

③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的           ▲          。

④如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括     ▲            （多选）。

    A．生物安全  B．环境安全    C．食品安全    D．伦理道德问题

⑤蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的        ▲            序列，所以蛋白质工程实质是对基因直接操作的。

（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用    ▲      ，以获得原生质体。

②骨髓瘤细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合时，由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞进行            ▲        ，且要适时克隆化培养。

（3）请回答下列有关胚胎工程的问题：

   ①在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是       ▲        ，

     以保证移植的胚胎能够继续正常发育。

   ②人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于    ▲        阶段。

(1) 图中①表示______________的构建，所用的工具酶有____________、___________。

(2) 图中②过程选择受精卵作为TPA基因受体细胞的主要原因是____________；若需体外形成羊的受精卵，需在____________(垂体激素)的作用下促其排卵，然后再进行体外受精。

(3) 图中③过程是否成功，与供体和受体的____________状况有关；受体对移入子宫的____________基本上不发生____________反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

(4) 图中④过程表示产生大量的克隆羊，则该过程可采用的技术有____________，这些克隆羊的基因型____________(填“相同”或“不同”)。