(1) 图中过程(1)表示的是采取___________的方法来获取目的基因。获得目的基因后，如果想快速提高其数量，可以采用__________技术对相应的DNA片段进行扩增，该技术需要的酶是________________。此酶的特点是______________。

(2) 图中过程(2)是基因工程的第二步，即：____________________________。

(3) 图中过程(3)是用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒感染细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用______处理，使细胞处于能吸收外源DNA的生理状态，这种细胞称为__________细胞，再与溶于缓冲液的表达载体混合，在一定的温度下完成转化。

(4)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入。因为普通质粒A和重组质粒上都有______________________ 。

(5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，出现的现象是有的能生长，有的不能生长。其中导入 ___________ 的细菌不能生长。

(6)应用___________________杂交技术可检测工程菌是否表达出人的生长激素。

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如图据图回答：

(1) 获得目的基因后，如果想快速提高其数量，可以采用__________技术对相应的DNA片段进行扩增，该技术需要的酶是________________。此酶的特点是______________。

(2) 图中过程(2)是基因工程的第二步，即：____________________________。

(3) 图中过程(3)是用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒感染细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用______处理，使细胞处于能吸收外源DNA的生理状态，这种细胞称为__________细胞，再与溶于缓冲液的表达载体混合，在一定的温度下完成转化。

(4)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入。因为普通质粒A和重组质粒上都有______________________ 。

(5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，出现的现象是有的能生长，有的不能生长。其中导入 ___________ 的细菌不能生长。

下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(amp^r为抗氨苄青霉素基因)，其中①～④表示相关的操作步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。表中表示几种限制酶的识别序列和切割位点。请回答下列问题：

（1）图中过程①是基因工程的核心，需要用到的两种工具酶是限制酶和________，选择限制酶________ 切割目的基因所在DNA和质粒，可有效避免目的基因和质粒的末端任意连接；甲中启动子的作用是________。

（2）据表可知，相应DNA经限制酶SmaⅠ切割后形成的末端为________末端，切断的化学键名称是________。

（3）上图中过程②将基因表达载体导入番茄细胞的最常用方法是________要检测转基因番茄的DNA上是否插入了目的基因，常采用的方法是________。

（4）图中的过程③与④在培养基成分上的主要区别是________。

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如下图。据图回答下列问题：

（1）形成的PG反义质粒叫做_________________，它的构建过程是基因工程的核心，需要用到的工具酶有_________________。若已获取PG的mRNA，可通过__________法获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是大量复制目的基因，要实现此目的，还可以用___________技术。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有_________________的培养基进行筛选。将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________________现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用____________技术；其中，愈伤组织经__________形成完整植株。

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用                    酶处理。

(2)形成重组细胞时应选用                  期的卵母细胞。

(3)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出贴壁生长和        等特点。

(4)图中犊牛和体细胞核供体母牛并不完全相同，其原因是                           、。

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①—④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。该酶的特点                                    。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶           对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割，然后用                将它们连接起来。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有       作为标记基因。

（3）研究人员通常采用         法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用               技术，在分子水平检测目的基因是否转录形成了相应的mRNA。

（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的       和        过程。在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入           。同时，在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证                  。

（5）与植物组织培养的培养基相比,用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外,通常还要添加                  。