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            • 1. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

              据图回答下列问题:

              (1)过程①所需的酶_____________________。

              (2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

              (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是________。原生质体经过________再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

              (4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和________植株的根尖,通过________、________、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

              (5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断,再生植株1—4中一定是杂种植株的有__________________。

              (6)对杂种植株进行________接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。

            • 2. (9分)研究发现,基因IPA1发生某种突变后,会使水稻穗粒数和千粒重(一千粒种子的重量)增加,同时茎秆变得粗壮,增强抗倒伏能力。科学家将突变后的IPA1基因导入常规水稻品种,可以使其产量增加10%以上。下图表示培育该水稻新品种的简易流程,请回答下列问题:

              (1)与传统的杂交育种相比较,通过基因工程育种具有明显的优势,一方面能   ▲   ,另一方面能   ▲  

              (2)图中步骤①是基因工程的核心步骤,其构建“重组质粒”的目的是   ▲  

              (3)限制酶BamHⅠ的识别序列和切点是—GGATCC—,在土壤农杆菌Ti质粒上有该酶的一个切点。一个Ti质粒分子经BamHⅠ切割前后,分别含有   ▲      ▲   个游离的磷酸基团。Ti质粒被限制酶BamHⅠ切割后所形成的黏性末端是   ▲  

              (4)步骤④所依据的原理是   ▲   。如在该过程中,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是   ▲  

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