已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但有些淋巴细胞不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答：

（1）生产单克隆抗体时，不直接利用浆细胞，主要原因是_______________ 。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是_____________________。

（3）②过程为_______培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO₂的目的是__________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养，也可注射到小鼠_______内培养.体内培养与体外培养相比,其优点是_____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需在③过程向培养液中加入________________，理由是杂交瘤细胞可利用____________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。

胡萝卜是生活中常见的植物，根据所学知识回答下列有关问题。

（1）胡萝卜的韧皮部细胞中含有核酸的细胞器有&;      ，胡萝卜植株叶肉细胞的叶绿体和线粒体中，部分蛋白质由细胞核基因指导合成，说明二者具有       （选填“自主”、“半自主”）细胞器的特点。

（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是        法，用这种方法提取胡萝卜素常选用石油醚作为溶剂。

（3）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成       比。

（4）对提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时需要用         对照。

（5）用胡萝卜韧皮部进行植物组织培养所用的MS培养基通常要加入一定量的       、        等植物激素，以启动外植体的细胞分裂、脱分化和再分化。这两种激素的使用先后顺序和     都会影响植物组织培养的结果。

40 【生物———选修 3 :现代生物科技专题】( 15 分)

下图是人体免疫物质的培养方法，①~⑥ 表示不同的过程，请回答。

（1）方法 1 中，细胞 A 应具备的特点是      。体外培养细胞 Y 需要满足以下条件：           、添加了血浆（或 “血清”）培养基、适宜温度与pH、         的气体环境等。

（2）方法 2 中，通过④得到的目的基因与细胞 B 中原有基因            （一定/不一定）相同，⑤过程必须用到的工具酶有           ，结构甲的组成必须包括          及目的基因等。

（3）若用棉花生产抗体 2，⑥过程的受体细胞应选用                   ，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该抗体基因是否在再生植株中正确表达，通常采用                  法，在田间试验中检测植株是否含有该种抗体。

 （1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是          ▲         

①通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具酶是          ▲           

②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在   ▲     酶的作用下延伸形成DNA。

③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的           ▲          。

④如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括     ▲            （多选）。

    A．生物安全  B．环境安全    C．食品安全    D．伦理道德问题

⑤蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的        ▲            序列，所以蛋白质工程实质是对基因直接操作的。

（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用    ▲      ，以获得原生质体。

②骨髓瘤细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合时，由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞进行            ▲        ，且要适时克隆化培养。

（3）请回答下列有关胚胎工程的问题：

   ①在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是       ▲        ，

     以保证移植的胚胎能够继续正常发育。

   ②人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于    ▲        阶段。

（1）利用乳腺反应器生产抗体

将黑色素瘤抗体基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，构建            ，通过                 方法导人山羊受精卵中，在体外培养到           时期，进行胚胎移植，获得转基因山羊，待其成熟后，从乳汁中提取抗体。

（2）利用杂交瘤细胞生产抗体

 ①下列是该技术的部分图解，请把代表各步骤的字母填写在流程示意图中。

②该方法生产的黑色素瘤单克隆抗体的优点是                             。

    抗蛇毒血清含有特异性抗体，具有中和相应蛇毒的作用。 用于蛇咬伤者的治疗，其中蝮蛇毒血清，对竹叶青蛇和烙铁头蛇咬伤亦有疗效。咬伤后，应迅速注射本品，愈早愈好。若通过单克隆抗体制备的方式获得大量的蝮蛇毒血清，请回答下列有关单克隆抗体制备的有关问题：

（1）图中A过程，从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是________细胞，该细胞能够产生__________。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射的特定的物质是________。

（2）图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的________、聚乙二醇或电激等诱导。   

（3）__________________技术是单克隆抗体技术的基础。

（4）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是______________________________________________________________。

(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的__________特点，又具备淋巴细胞的产生特异性抗体的特点。

(6)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_____________。

(1) 述单克隆抗体制备过程中涉及 的细胞工程技术有        。

(2) 杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是     ，在HAT培养基上存活的细胞可能包括       （填下列序号）

①无抗体分泌的细胞   ②抗HPV抗体的分泌细胞     ③其它无关抗体的分泌细胞

(3) 对于抗体检测呈          性的杂交克隆应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～l0个细胞/mL，每孔加入细胞稀释液0. 1mL,使每个孔内不多于一个细胞，达到        克隆培养的目的。

(4) 由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是         。

(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因( p rG)，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路                。

（1）基因工程的核心步骤是                                      ，该步骤要用到的工具酶中能破坏磷酸二酯键的是                   。

（2）细胞工程中，诱导植物细胞融合前需用到               酶处理细胞，进而获得原生质体；制备单克隆抗体时，目的细胞应具备的特性是                           。

（3）胚胎工程中，用到的EK细胞或ES细胞可来自                  ；适合胚胎移植的胚胎应处于                    。