MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结

果如下表。

请回答下列问题：

(1)青霉素的用量是该实验的________变量。应保持________，目的是________。

(2)第2组和第3组对比表明MRSA菌对________有抗性，________能杀死MRSA菌。

(3)蛋白质H不是新型抗生素，理由是________。

(4)测定培养液中MRSA菌的活菌数量，不宜在显微镜下用________直接计数，适合选用________法进行计数，原因是________直接计数获得的结果包含活的MRSA菌和死的MRSA菌的总数，而用涂布法进行计数，计数的是菌落数，一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌。

40 [生物一选修3  现代生物科技专题]

下图为培育转基因山羊生产人β酪蛋白的流程图。

请回答下列问题：

(1)获取过程①所用的人β-酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的________，以其作为模板，在________的作用下台成________。

(2)重组人β-酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，是________识别和结合的部位。

(3)过程②可选用________阶段的胚胎进行移植。

(4)过程③可使用________技术扩大转基因山羊群体，除此之外，还可以采取的措施有________。

(5)过程④人β-酪蛋白基因在细胞内表达的场所为________。

 
（1）控制小鼠尾形的基因位于____（2分）（常/X/Y）染色体上，子一代雄鼠的基因型是____________（2分）。 

（2）为确定转基因小鼠DNA插入的具体位置，研究者让该转基因小鼠与非转基因弯曲尾雄性小鼠杂交，统计子代的表现型种类及比例，并进行了以下分析（不考虑交叉互换）：若子代表现型及比例为弯曲雌﹕正常雌﹕弯曲雄﹕正常雄=                    （2分），则该DNA片段的插入位置属于第一种可能性；若子代表现型及比例为弯曲雌﹕正常雌﹕弯曲雄﹕正常雄=                       （2分），则该DNA片段的插入位置属于第二种可能性。

（3）培育该转基因小鼠，需运用________技术将含有外源DNA的体细胞的细胞核与去核的______细胞融合得到重组细胞，培养至早期胚胎后通过                        技术转移至受体体内。 

（4）外源DNA影响B基因表达的机制是：二者转录的产物碱基互补配对从而抑制                     。 

（5）图二中的两条长链为B基因的两条单链，若要对B基因进行PCR扩增，应选用引物                      。该过程中需使用                        酶以合成子链中的

                     键。

 （1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是          ▲         

①通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具酶是          ▲           

②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在   ▲     酶的作用下延伸形成DNA。

③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的           ▲          。

④如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括     ▲            （多选）。

    A．生物安全  B．环境安全    C．食品安全    D．伦理道德问题

⑤蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的        ▲            序列，所以蛋白质工程实质是对基因直接操作的。

（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用    ▲      ，以获得原生质体。

②骨髓瘤细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合时，由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞进行            ▲        ，且要适时克隆化培养。

（3）请回答下列有关胚胎工程的问题：

   ①在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是       ▲        ，

     以保证移植的胚胎能够继续正常发育。

   ②人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于    ▲        阶段。

(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有________________________、________________________。(写出其中两种)

(2)图中A、B分别表示________________________________________、________________________________。

（1）利用乳腺反应器生产抗体

将黑色素瘤抗体基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，构建            ，通过                 方法导人山羊受精卵中，在体外培养到           时期，进行胚胎移植，获得转基因山羊，待其成熟后，从乳汁中提取抗体。

（2）利用杂交瘤细胞生产抗体

 ①下列是该技术的部分图解，请把代表各步骤的字母填写在流程示意图中。

②该方法生产的黑色素瘤单克隆抗体的优点是                             。

（1）ES细胞一般从囊胚的_______________分离得到。在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为_______________。为获取更多的囊胚，首先要对供体母鼠注射相应激素，使其                      ，然后可用人工方法从小鼠体内获得囊胚，该过程称为__________________。

（2）ES细胞在功能上具有                   的特点；目前研究人员正尝试通过科技手段利用ES细胞经过特殊诱导，为因故失去手的患者提供新的“手”，该过程揭示了细胞             的机理。

（3）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，一般情况下，细胞中有D或S途径即能分裂增殖。人淋巴细胞中虽然有这两种DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠ES细胞中只有D途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。若要从培养液中分离出杂种细胞，写出实验方法（不考虑机械方法），并说明理由。

方法：___________________________________________________________。

理由：___________________________________________________________。

  近期，中国和韩国的科学家利用某项技术去掉了猪体内的肌肉生长抑制基因，然后把这些“改造过的基因”植入猪的受精卵中，进而发育成肌肉细胞生长不受限制的“肌肉猪”。回答下列问题：

(1)利用体外受精的方法获得猪的受精卵时，采集卵母细胞时，可用 _______激素处理母猪，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，卵子在与______的精子在体外受精前，__________ （填“需”或“无需”）在体外经人工培养。

(2)将“改造过的基因”导入受精卵（而不是体细胞）的原因是__________________________________________。

(3)“改造过的基因”需与________拼接成重组质粒，再利用_________法将其导入受精卵。而将目的基因导人双子叶植物时常采用________法。

(4)将具有“改造过的基因”的受精卵培育成“肌肉猪”需涉及胚胎工程，该工程最后一道“工

序”是______________。

(1) 图中①表示______________的构建，所用的工具酶有____________、___________。

(2) 图中②过程选择受精卵作为TPA基因受体细胞的主要原因是____________；若需体外形成羊的受精卵，需在____________(垂体激素)的作用下促其排卵，然后再进行体外受精。

(3) 图中③过程是否成功，与供体和受体的____________状况有关；受体对移入子宫的____________基本上不发生____________反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

(4) 图中④过程表示产生大量的克隆羊，则该过程可采用的技术有____________，这些克隆羊的基因型____________(填“相同”或“不同”)。

33．如图为经过体外受精和胚胎分割移植培养优质牛奶的过程，请回答下列问题。

（1）在进行体外受精前,要对精子进行           处理。在受精过程中，防止多精入卵的生理反应是      　　　　   ，      　　　　      。

（2）进行胚胎分割时，应选择发育到            时期的胚胎进行操作。

（3）通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性的根本原因是                   。

（4）在对囊胚阶段的胚胎进行分割，应注意                       。

（5）受体母牛必须和供体牛属于同一物种，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是              

             。

（6）若要获取优质牛的胚胎干细胞（ES细胞），可以从囊胚的_________或胎儿__________中分离出来，在功能上，ES细胞具有_____________的特性。