(选修三)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

(1)过程①中最常用的运载工具是　　　　,所需要的酶是限制酶和　　　　。

(2)在过程②中,用　　　　处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中,将成纤维细胞置于5% CO₂的气体环境中,CO₂的作用是　　　　　。

(3)在过程③中,用　　　　处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行　　　　处理。

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是　　　　。在胚胎移植前,通过　　　　技术可获得较多胚胎。

（选修一）从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从　　　　　　　环境采集。

（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择　　　　　的培养基，并在　　　　　　　条件下培养。

（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 

获得图A效果的接种方法是　　　　　　　　，获得图B效果的接种方法是　　　　　　　　。

（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行　　　　　，接种前要进行　　　　　，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在　　　　　　　条件下进行。

MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结

果如下表。

请回答下列问题：

(1)青霉素的用量是该实验的________变量。应保持________，目的是________。

(2)第2组和第3组对比表明MRSA菌对________有抗性，________能杀死MRSA菌。

(3)蛋白质H不是新型抗生素，理由是________。

(4)测定培养液中MRSA菌的活菌数量，不宜在显微镜下用________直接计数，适合选用________法进行计数，原因是________直接计数获得的结果包含活的MRSA菌和死的MRSA菌的总数，而用涂布法进行计数，计数的是菌落数，一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌。

40 [生物一选修3  现代生物科技专题]

下图为培育转基因山羊生产人β酪蛋白的流程图。

请回答下列问题：

(1)获取过程①所用的人β-酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的________，以其作为模板，在________的作用下台成________。

(2)重组人β-酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，是________识别和结合的部位。

(3)过程②可选用________阶段的胚胎进行移植。

(4)过程③可使用________技术扩大转基因山羊群体，除此之外，还可以采取的措施有________。

(5)过程④人β-酪蛋白基因在细胞内表达的场所为________。

33．如图为经过体外受精和胚胎分割移植培养优质牛奶的过程，请回答下列问题。

（1）在进行体外受精前,要对精子进行           处理。在受精过程中，防止多精入卵的生理反应是      　　　　   ，      　　　　      。

（2）进行胚胎分割时，应选择发育到            时期的胚胎进行操作。

（3）通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性的根本原因是                   。

（4）在对囊胚阶段的胚胎进行分割，应注意                       。

（5）受体母牛必须和供体牛属于同一物种，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是              

             。

（6）若要获取优质牛的胚胎干细胞（ES细胞），可以从囊胚的_________或胎儿__________中分离出来，在功能上，ES细胞具有_____________的特性。

⑴图中c的操作名称是_____________，d、f的操作名称是______________，在其之前需要对受体母牛进行__________________处理。

⑵图中用到的激素是___________，其目的是为了获得更多的卵母细胞，其受精后发育可得到早期胚胎；图中早期胚胎属于胚胎发育的_______________期，其中胚胎干细胞来源于___________（填数字标号）。

⑶图中A和B的性别____________(填“相同”、“不相同”、“不一定相同”)

（1）若使人乳铁蛋白基因在转基因奶山羊的乳腺细胞中特异性表达，在构建基因表达载体时，应在重组质粒中插入                        的启动子。

（2）为检测人乳铁 蛋白基因是否成功表达，可采用_____________技术。

（3）若欲获取多只具有相同遗传物质的转基因奶山羊，可在过程①使用____________技术。

（4）过程②需选用传代培养10代内的转基因奶山羊供体细胞，其原因是这样的供体细胞能维持正常的________核型；将该供体细胞注入______的卵母细胞，可构建出克隆胚胎，最终培育出转基因克隆奶山羊。

请回答：

（1）过程①注射的A物质是          ，过程④常用的方法是         。

（2）在开展过程⑥时对受体的要求是                                         。

（3）蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是抗原—抗体杂交法，该方法的原理是                            ，采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的转基因小鼠，分割时可选用桑葚胚期的胚胎，原因是                      。

（4）转基因小鼠因含有一个携带目的基因的DNA片段，故可看作是杂合子。理论上，转基因小鼠相互杂交后代中，有转基因性状的小鼠中纯合子占           。

基因疫苗指的是DNA疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达出抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。口蹄疫是一种危害严重的偶蹄动物传染病，近年来国内外在口蹄疫基因疫苗研究方面有了许多新的突破。

回答下列问题：

(1)将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，此过程在基因工程中称作________，一般选________作为受体细胞，将目的基因导入受体细胞常采用的方法是________。

(2)将导入目的基因的受体细胞在体外培养至________阶段后进行胚胎移植，选用的受体动物应符合的条件是________。

(3)欲检测人或动物体内是否具有了抗原蛋白，在分子水平上检测的方法是从转基因人或动物中提取蛋白质，进行________。

(4)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用________技术形成一个重组细胞，再经________技术获得具有口蹄疫免疫特性的多个胚胎，进而克隆出多头高产奶牛。

（图甲）

（图乙）

（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射      。冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的      冲洗出来。

（2）图乙中②指的是      。进行胚胎分割时，应选择发育到      时期的胚进行操作

（3）图甲中标号3为      ，它将来可发育为       。

（4）图乙中A细胞是      ，在进行体外受精前要对精子进行      处理。哺乳动物受精过程有哪些机制阻止多精子入卵受精？（      ）

A．顶体反应　

B．精子穿越卵子透明带触及卵黄膜，导致透明带反应

C．精子触发卵黄膜表面微绒毛的抱合反应　  

D．精子入卵后，触发卵黄膜封闭作用

（5）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意      。

（6）受体母牛必须和供体牛属于      。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是      。

(1)“试管牛”技术的操作流程是________(用箭头和字母表示)。

(2)写出图中数字标号代表的结构名称：①________；②________；③________。

(3)d操作的名称是________，受体子宫内胚胎发育的过程中细胞不断分裂，其分裂方式为________。

(4)图中用到的激素是________，过程h常用的方法是________。

(5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意__________________________________________________________________

________________________________________________________________。

(6) 受体母牛必须和供体牛属于________。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________________________________________________________________。

​

请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是                  ，②过程常用的方法是                。

（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_________________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用  _____      ___和____技术，培育出多头相同的转基因犊牛。