8.
(15分)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Amp
r或Tet
r中会导致相应的基因失活(Amp
r表示氨苄青霉素抗性基因,Tet
r表示四环素抗性基因).有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化.被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌.
回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有 ______ (答出两点即可).
而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子.
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 ______ ;并且 ______ 和 ______ 的细胞也是不能区分的,其原因是 ______ .在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有 ______ 的固体培养基.
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自于 ______ .