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            • 1． 组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用，如图是利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂（tPA）的图解，据图回答下列问题：
              （1）过程①在构建的基因表达载体中，应将tPA基因首端与______基因的启动子等调控组件结合，③过程常用的方法是______．
              （2）要获得单个成纤维细胞，过程②需用______处理奶牛胎儿皮肤组织块．在单个组织细胞的培养过程中，为了防止杂菌污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的______．
              （3）成功进入成纤维细胞的tPA基因，最终在转基因牛C中维持稳定和表达的过程称为______，④涉及到的生物技术为______，得到的转基因牛C称之为转基因克隆动物．
              （4）从A到B过程中所用的胚胎工程技术是______．从个体水平上看，若______，则可确定转基因牛培育成功．
              难度：易
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            • 2．
              利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的生长激素，根据图回答有关问题．

              （1）基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有 ______ 、 ______ 以及标记基因等．
              （2）在体外受精前，要对精子进行 ______ 处理，对于牛的精子常采用 ______ ．
              （3）图中①过程常采用 ______ ，图中②过程的培养液成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、 ______ 、氨基酸、核苷酸等成分，以及 ______ 等物质．
              （4）早期胚胎发育到 ______ 才进行移植．
              难度：易
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            • 3．
              如图1是某同学在观察植物细胞的质壁分离与复原实验中的基本操作步骤，请回答下列问题．

              （1）D过程在低倍镜下可观察到 ______ 和 ______ 分离．若低倍镜下观察到的视野如图2所示，则N处为 ______ ．
              （2）花青素为紫色，它溶于洋葱鳞片叶外表皮细胞的 ______ 中．如果用 ______ 进行处理，可得到原生质体，再加入清水后，视野中的颜色变化过程是 ______ ．
              （3）该同学为探究茉莉酸（植物生长调节剂）对离体培养的成熟胡杨细胞质壁分离的影响，将细胞分别移至不同的培养液中继续培养3天，结果如表所示．
              组别 培养液中另添加的成分 结果
              NaCl 茉莉酸
              ① + - 部分细胞质壁分离
              ② + + 细胞正常，无质壁分离
              ③ - - 细胞正常，无质壁分离
              注：“+”表示有添加，添加后NaCl浓度为100mmol•L-1，茉莉酸浓度为10-3mg•L-1；“-”表示无添加
              结果表明，茉莉酸对NaCl引起的胡杨细胞质壁分离有 ______ 作用．
              难度：易
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            • 4． 许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRI的酶切位点），其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色．基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如图所示．请据图回答：
              （1）限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G↓AATTC-，SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-．图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是 ______ ．
              （2）转化过程中，大肠杆菌应先用 ______ 处理，使其成为细胞．
              （3）菌落①②③中颜色为白色的是 ______ ，原因是 ______ ．
              （4）菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是 ______ ．
              难度：易
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            • 5． 请回答与动物细胞培养及胚胎工程有关的问题：
              （1）欲获得牛的单个体细胞，需用______处理动物组织；在体外培养时，通常需在培养液中添加______等天然成分。
              （2）获取的卵子需培养到______时期才能用于核移植，通过核移植获得的动物称作______，该技术运用的生物学原理是______。
              （3）在胚胎分割技术中，需将牛囊胚的______均分，目的是______，可利用囊胚的______细胞进行性别鉴定。
              （4）ES细胞在______上或含有抑制因子的培养基上培养时，不会发生分化；可用ES细胞分化出人造器官用于器官移植，优点是______。
              难度：易
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            • 6． H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的靶向治疗具有重要的意义，但H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着细胞的高密度培养以及生产能力的提高，通过基因工程以改造H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力，相关研究步骤如下：
              ①细胞培养：将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养．一段时间后用胰蛋白酶处理培养液，漂洗后调整细胞悬液浓度为1×107个•mL-1．
              ②细胞融合及筛选：将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEC作用下进行融合，筛选出能产生抗人肝癌单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞．
              ④改造H18杂交瘤细胞：利用PCR技术获得小鼠的bel-Xi基因（抗凋亡基因），构建表达载体，通过脂质体法导入H18杂交留细胞，再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞．
              请分析回答：
              （1）步骤①肝癌细胞培养液中加入小牛血清的目的是______，培养液中还需加入一定量抗生素的目的是______．
              （2）步骤②中，肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次，其目的是______．
              （3）步骤③中，除了用50%PEC促进细胞融合外，常用的生物诱导因素是______，步骤④中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交廇细胞的原理是______．
              （4）与普通抗肝癌药物相比，用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是______．
              （5）乙醇有诱导细胞调亡的作用，为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型，科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交廇细胞凋亡，其结果如图所示，抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的诱导条件是______．
              难度：易
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            • 7． 如图表示培养转基因克隆羊和胚胎工程的部分操作流程，其中字母代表有关结构或个体，数字代表过程、方法，请据图回答：

              （1）图中过程l-7所涉及的生物技术有______（两种即可）． 
              （2）通过l、2过程获取分散的细胞时，用到的酶是______，培养的细胞在充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为______． 
              （3）图中动物细胞培养过程中应将细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是______．此培养过程中为防止杂菌感染，需要添加一定量的______． 
              （4）早期胚胎可通过[______]______技术移入代孕母体子宫内继续发育，该技术在生产实践中的意义在于______． 
              （5）通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它______．此时的卵母细胞应该培养到______（细胞分裂方式及时期）．f细胞在形态上表现为______．
              难度：易
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