转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点，据图回答下列问题。

（1）若要获得抗病基因，可用_____________限制酶切，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。切割质粒与获取目的基因用的是___________（相同、不同）的限制酶。切割好的质粒与目的基因需要在_______________酶的作用下形成含抗病基因的重组DNA分子。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有__________________基因作为标记基因。

（3）图中将重组DNA分子导入香蕉受体细胞用到的方法是_____________法。

（4）为了进一步确定目的基因是否翻译成蛋白质，可用的检测方法是________。

（5）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________________的方法，可培育成能表现新性状的植株。图中①到②表示______过程，②到③表示______过程。

(1) 图中过程(1)表示的是采取___________的方法来获取目的基因。获得目的基因后，如果想快速提高其数量，可以采用__________技术对相应的DNA片段进行扩增，该技术需要的酶是________________。此酶的特点是______________。

(2) 图中过程(2)是基因工程的第二步，即：____________________________。

(3) 图中过程(3)是用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒感染细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用______处理，使细胞处于能吸收外源DNA的生理状态，这种细胞称为__________细胞，再与溶于缓冲液的表达载体混合，在一定的温度下完成转化。

(4)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入。因为普通质粒A和重组质粒上都有______________________ 。

(5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，出现的现象是有的能生长，有的不能生长。其中导入 ___________ 的细菌不能生长。

(6)应用___________________杂交技术可检测工程菌是否表达出人的生长激素。

A、转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示(①至④代表过程，A至C代表结构或细胞)：

⑴②过程常用______处理农杆菌，使之成为______细胞，利于完成转化过程．

⑵图中③过程需要用到的激素是______。

⑶在分子水平上，可采用______的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原．

B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．

⑴专家在实验中，需用到的酶主要有______和______等。

⑵专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是______。

⑶对于农民，种植杂交系马铃薯除可获得较高的收成外，还有什么优点？(要求写出两点) _________________________________。

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如图据图回答：

(1) 获得目的基因后，如果想快速提高其数量，可以采用__________技术对相应的DNA片段进行扩增，该技术需要的酶是________________。此酶的特点是______________。

(2) 图中过程(2)是基因工程的第二步，即：____________________________。

(3) 图中过程(3)是用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒感染细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用______处理，使细胞处于能吸收外源DNA的生理状态，这种细胞称为__________细胞，再与溶于缓冲液的表达载体混合，在一定的温度下完成转化。

(4)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入。因为普通质粒A和重组质粒上都有______________________ 。

(5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，出现的现象是有的能生长，有的不能生长。其中导入 ___________ 的细菌不能生长。

下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(amp^r为抗氨苄青霉素基因)，其中①～④表示相关的操作步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。表中表示几种限制酶的识别序列和切割位点。请回答下列问题：

（1）图中过程①是基因工程的核心，需要用到的两种工具酶是限制酶和________，选择限制酶________ 切割目的基因所在DNA和质粒，可有效避免目的基因和质粒的末端任意连接；甲中启动子的作用是________。

（2）据表可知，相应DNA经限制酶SmaⅠ切割后形成的末端为________末端，切断的化学键名称是________。

（3）上图中过程②将基因表达载体导入番茄细胞的最常用方法是________要检测转基因番茄的DNA上是否插入了目的基因，常采用的方法是________。

（4）图中的过程③与④在培养基成分上的主要区别是________。

A.                         B.

C.                         D.

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用                    酶处理。

(2)形成重组细胞时应选用                  期的卵母细胞。

(3)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出贴壁生长和        等特点。

(4)图中犊牛和体细胞核供体母牛并不完全相同，其原因是                           、。

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①—④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。该酶的特点                                    。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶           对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割，然后用                将它们连接起来。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有       作为标记基因。

（3）研究人员通常采用         法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用               技术，在分子水平检测目的基因是否转录形成了相应的mRNA。

（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的       和        过程。在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入           。同时，在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证                  。

（5）与植物组织培养的培养基相比,用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外,通常还要添加                  。

(1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述，正确的是（　　）

A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低而减小

B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA

C．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于所有有机溶剂

D．在沸水中，DNA遇双缩脲试剂会出现紫色反应

(2)由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成功，其原因最可能是（    ）

A．操作方法不对   B．人血含DNA太少   C．NaCl溶液浓度太高   D．加二苯胺太少

(3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图：

①正确操作顺序是       。

②上图C、D步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是      和       。

③上图A步骤中所用酒精必须是经过充分遇冷才能使用，该步骤的目的是       。

(4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加      试剂，沸水浴，如果出现        则该丝状物的主要成分为DNA。