（1）酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是___________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_____________。

（2）实验室可采用__________法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，还需要额外在培养基中添加_________________。

（3）为了保持所获得的菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，需将菌种接种在___________上。放入4℃冰箱中可保藏3-6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的_______ ___混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

（4）在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学认为是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持_______的观点，理由是______________。

（1）用稀释涂布平板法可以纯化三孢布拉氏霉菌，进行梯度稀释时一般是将1 mL菌液移入盛有________mL无菌水的试管中。常用_____________法进行活菌计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于______________________。但统计的菌落数往往__________（填“多于”或“少于”）稀释液中的活菌数。

（2）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有_________________________的特点，常用_______法提取胡萝卜素，其效率主要取决_________________。

（3）图为提取的胡萝卜素样品通过纸层析进行鉴定的结果，从图中分析可知，色带________为β­胡萝卜素。出现样品2的结果，可能原因是在操作过程中①________(A．萃取温度高，时间长　B．干燥温度高，时间长)；②________(A．未经浓缩蒸馏　B．点样太快，样点小)。

【选修3现代生物科技专题】继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，请回答下列问题。

（1）人的生长激素基因可以从人类cDNA文库中获取，建立该基因文库时通常需要从人的_________________细胞中提取全部的_____________，通过__________方法获取cDNA，并将其导入________________中储存。

（2）人的生长激素基因进入小鼠细胞内，且能维持稳定和表达的过程称为________。常用方法是_______________________。基本操作是：首先提纯含有目的基因的_________________。并将其转入________细胞中。经过早期胚胎培养后再移植到雌性动物的子宫或输卵管中使其发育。

（3）若要一次获得多只相同的转基因小鼠，可采用_________技术，该技术的最后一道工序是___________________。

研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

(1)柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水并用________浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。

(2)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度________。

(3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4)柚皮油也可用萃取法来提取，原因是________。分析上图，提高萃取效果的方法是________、________。

生物技术的广泛应用，给社会带来了较大的经济效益，受到社会广泛重视。请回答下列有关问题：

(1)制作泡菜需要测定亚硝酸盐含量，其方法是________。其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—I—萘基乙二胺盐酸盐结合形成________，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

(2)生物柴油是一种可再生的清洁能源，一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，可从油料作物中提取植物油与甲醇在脂肪酶的催化下生成生物柴油，从微生物中提取脂肪酶通常需要检测________，为降低柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能重复使用。

(3)玫瑰精油被称为“液体黄金”，是世界香料工业不可取代的原料，多用于制造高级香水、化妆品等。玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，挥发性较强，要提取玫瑰精油可以用水中蒸馏法和________法，但一般采用水中蒸馏的方法，其原因是该法具有________的优点。在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳浊液的提纯过程中应先使用________分层，再使用________吸水。

(4)天然胡萝卜素可医治维生素A缺乏症，是因为________。在提取胡萝卜素的实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→A→胡萝卜素中，A过程叫________。

胡萝卜是生活中常见的植物，根据所学知识回答下列有关问题。

（1）胡萝卜的韧皮部细胞中含有核酸的细胞器有&;      ，胡萝卜植株叶肉细胞的叶绿体和线粒体中，部分蛋白质由细胞核基因指导合成，说明二者具有       （选填“自主”、“半自主”）细胞器的特点。

（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是        法，用这种方法提取胡萝卜素常选用石油醚作为溶剂。

（3）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成       比。

（4）对提取的胡萝卜素粗品进行鉴定时需要用         对照。

（5）用胡萝卜韧皮部进行植物组织培养所用的MS培养基通常要加入一定量的       、        等植物激素，以启动外植体的细胞分裂、脱分化和再分化。这两种激素的使用先后顺序和     都会影响植物组织培养的结果。

40 【生物———选修 3 :现代生物科技专题】( 15 分)

下图是人体免疫物质的培养方法，①~⑥ 表示不同的过程，请回答。

（1）方法 1 中，细胞 A 应具备的特点是      。体外培养细胞 Y 需要满足以下条件：           、添加了血浆（或 “血清”）培养基、适宜温度与pH、         的气体环境等。

（2）方法 2 中，通过④得到的目的基因与细胞 B 中原有基因            （一定/不一定）相同，⑤过程必须用到的工具酶有           ，结构甲的组成必须包括          及目的基因等。

（3）若用棉花生产抗体 2，⑥过程的受体细胞应选用                   ，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该抗体基因是否在再生植株中正确表达，通常采用                  法，在田间试验中检测植株是否含有该种抗体。

（1）提取玫瑰油的原料来自           ，提取方法是        ；实验中为加速油水混合物分层，可加入                。

 （2）胡萝卜素的提取方法是             ；实验过程中，尽量避免明火加热，原因是       ；该实验中的冷凝回流装置的作用是               。 

（3）图为胡萝卜素提取样品的鉴定结果示意图，图中②代表的物质是          。上述鉴定所用的方法在“绿叶中色素的提取和分离”实验中用于                 。

用农杆菌转化法可以获取转基因抗病植物，回答有关问题：

(1)若该抗病基因取自某种真菌的CDNA文库，转入植物细胞后，________(能、否)正常表达。若想得到大量的抗病基因，需用到________技术，中文全称为________，条件除了原料、能量、模板外还需要________、________。

(2)某培养基中的卡那霉素会抑制愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的植物细胞，应使基因表达载体中含有________基因，作为________基因。

(3)农杆菌是一种在________中生活的微生物，农杆菌转化法适用于________和________植物，其原因是该类植物受到损伤时，伤口的细胞会分泌大量的________。

(4)Ti质粒的T—DNA(可转移的DNA)可整合到植物细胞中________上，所以，构建基因表达载体时，将目的基因插入到________中。用到的工具酶有________。

(5)鉴定成功获得转基因植物的最简捷的方法是________。

“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回。”这是唐诗中提及的葡萄酒。19世纪，法国的巴斯德发现葡萄汁变酒是酵母菌的发酵作用。
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（1）在无氧的条件下，酵母菌能进行酒精发酵，反应式是                          ，研究表明，酵母菌也可以在有氧条件下进行呼吸作用，说明酵母菌是一种    微生物。葡萄汁发酵后是否有酒精产生可以用重鉻酸钾来检验，在酸性条件下，重鉻酸钾与酒精反应的颜色变化情况是                 。

（2）酵母菌的酒精发酵过程一般控制在                温度范围，最适合酵母菌繁殖，请简要说明理由                                              。

（3）为了提高葡萄酒品质可以在葡萄汁中加入人工培养的酵母菌，可利用           培养基来分离获得较为纯净的酵母菌种。

（4）对野生酵母菌进行诱变可筛选出具有耐高糖和耐酸性的高产突变菌株，利用PCR技术可大量获得突变菌所携带的特殊基因，在PCR扩增反应中加入引物的作用是       ，加入DNA聚合酶的作用是                                      。