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            • 1.

              某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO47H2O

              蛋白胨

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4 g

              2.1 g

              0.2 g

              1.0 g

              10.0 g

              1.0 g

              15.0 g

              (1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?________(填“能”或“不能”),原因是__________________。

              (2)分装培养基的培养皿常用___________方法灭菌,待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在____________附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止____________________________________________,以免造成污染。

              (3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用_______________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的____________就能大约推测出样品中活菌数。

              (4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________________。

              (5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。

            • 2.

              回答下列有关微生物发酵技术的相关问题:

              (1)在酿制葡萄酒时,课外小组用同一种葡萄汁对三种酵母菌进行发酵能力测试,结果如下:

               

              原重(g)

              第一天

              第二天

              第三天

              第四天

              第五天

              第六天

              菌种1

              150.5

              151.83

              150.85

              149.38

              148.34

              147.32

              145.94

              菌种2

              158.4

              156.73

              154.78

              152.99

              152.10

              151.24

              150.04

              菌种3

              164.8

              163.82

              161.51

              159.43

              158.24

              157.25

              155.49

              从表格中培养基重量的变化分析,发酵能力最强的是__________ 。进行发酵前,发酵瓶要注意清洗干净,并且要使用_______消毒。

              (2)某同学在制作果酒之后,欲进一步制作果醋。他先接种优良的醋酸杆菌,再持续通入无菌空气,进一步发酵。请分析能否得到果醋?______,原因是_____________。

              (3)制作腐乳、泡菜时,需要氧气的是______ ,该过程中起主要作用的微生物是____。

              (4)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取,可以从土壤微生物中筛选。制备培养基时,常用______做唯一碳源,制成_____(固体、半固体或液体)培养基。

            • 3. 回答下列有关微生物和酶工程的问题.
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶,后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值,且已大规模产业化应用.
              (1)在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时,培养基营养成分应包括水和 ______ (用序号组合回答).
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株,将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水(f) 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面;在37℃恒温箱中放置2~3天,结果如图1.

              (2)大规模产业化首选的菌株是 ______ ;菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是 ______
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据,即酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其酶活性.在该蛋白酶的工业化生产过程中,通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间,再制备酶制剂.
              (3)在60~70℃保温一定时间的作用是 ______
              A.诱导蛋白酶的热稳定性
              B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C.裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              (4)枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为 ______ (选择正确的序号并排序).
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩.
            • 4.
              某研究小组从牛的瘤胃中采集样本,进行分解尿素的微生物的分离与计数.实验基本步骤如下:

              (1)分解尿素的微生物含有 ______ ,因此,配制培养基时以尿素作为唯一氮源,尿素会被分解成 ______ 使培养基的碱性增强.
              (2)配制培养基时,需添加琼脂,琼脂起 ______ 作用;培养基中添加 ______ 作为指示剂,可使目标菌落的周围产生红色环带.
              (3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 ______ 灭菌.
              A.高压蒸汽 B.干热 C.添加抗生素 D.过滤 E.紫外线照射 F.70%酒精浸泡
              (4)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ______ ;然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板的菌落数分别为49、47和45.据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为 ______ ,理论上,统计的菌落数往往 ______ (低、等、高)于接种的实际活菌数目.
            • 5.

              乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为:

                玉米秸秆糖液酒精

               (1)玉米秸秆经预处理后,应该选用        酶进行水解,使之转化为发酵所需的葡萄糖。

               (2)(多选)从以下哪些微生物中可以提取上述酶?            

                 A.酿制果醋的醋酸菌   B.生长在腐木上的霉菌   C.制作酸奶的乳酸菌   

                 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌                        E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物

               (3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物,所需要的培养基为         (按功能分),培养基中的碳源为            

               (4)从生物体提取出的酶首先要检测           ,以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中,为了使酶能够被反复利用,可采用固定化酶技术。

              (5)发酵阶段需要的菌种是           ,在产生酒精时要控制的必要条件是           

            • 6. (19分)反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官——瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源。以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程。



              (1)进行①过程的目的是            ;②过程所使用的接种方法是             。用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目             ,原因是                                  

              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于        培养基,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→               。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供       的条件。此培养条件也是        (填“果醋”或“果酒”)制作过程中需要的。

              (3)在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是    

              (4)以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后,加入             指示剂后变红色,说明“目的菌”能分解尿素。理由是                                    

              (5)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h-48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中          倍的稀释比较合适。假设每个平板分别接入0.1mL稀释液,据此可得出每毫升瘤胃液体中的活菌数为               个。

              稀释倍数

              103

              104

              105

              106

              107

              菌落数

              >500

              367

              248

              36

              18




            • 7.

              【生物一选修1:生物技术实践】

              某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO47H2O

              蛋白胨

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4 g

              2.1 g

              0.2 g

              1.0 g

              10.0 g

              1.0 g

              15.0 g

              (1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?________(填“能”或“不能”),原因是_________________。

              (2)培养基用________方法灭菌,培养皿用________方法灭菌,待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在________附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止________,

               以免造成污染。

              (3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的________就能大约推测出样品中活菌数。

              (4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____________         ___。

              (5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过______  __处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。

            • 8.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              下表为培养某种微生物的培养基配方,请回答有关问题:

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              蒸馏水

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              定容至1000mL


               (1)该种培养基可用来培养            的细菌。从用途看,这种培养基称为___ ____培养基。

              (2)如果要通过统计培养基中的菌落数来估算样品中的细菌数,则在上述培养基中还需要添加 

                      作为凝固剂,接种时应采用                  法才能达到目的。这种方法统计到的是样品中_______的数目,除了这种方法,还有                也是测定微生物数量的常用方法。在用不同浓度的稀释液培养得到的平板中,为保证统计的数目结果较为准确,一般选择菌落数在_______的平板进行计数。

              (3)某同学从土壤中分离出目的细菌以后,若要对其作进一步的鉴定,可在上述的培养基中加入_______指示剂,培养该菌后,如果指示剂变_______,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

            • 9. 32、 2015年诺贝尔奖生理学或医学奖授予屠呦呦、威廉·C·坎贝尔和大村智,以表彰他们发现了治疗疟疾的开创性疗法和治疗线虫门感染新疗法。寄生虫生物学家威廉·C·坎贝尔利用大村智的链霉菌菌株,分离并纯化出了一种能有效对抗家养和畜牧动物的寄生虫成分命名为阿维菌素。阿维菌素随后被进一步化学修饰成为一种叫“伊维菌素”的物质,变得更加有效。这两个发现为人类对抗这些每年影响数亿人的疾病提供了有力的新手段,对提升人类健康、减少患者痛楚方面的意义是无可估量的。以下是从土壤溶液中分离链霉菌菌株的主要步骤:
              ①按以下配方配制培养基:
              ②将培养基在121℃下高压蒸汽灭菌20min。
              ③倒平板,冷却备用。
              ④用稀释涂布平板法接种。
              ⑤将平板倒置,与28℃下培养7天。
              据此回答问题:
              (1)培养基中为链霉菌提供碳源的物质是      ,提供氮源的物质是       。培养基中的重铬酸钾能够减少细菌、真菌的数量,故该培养基属于              培养基。

              (2)培养基pH的调节是在培养基灭菌            (填之前或之后)进行。

              (3)在倒平板之前,应将培养基冷却至            ℃左右才能进行;冷却凝固的平板要倒过来放置,原因是                

              (4)从稀释倍数为104的稀释液中取0.1mL,涂布一个平板,某同学共涂布了3个这样的平板,统计的菌落数分别是201个、212个和256个,那么每克样品中的菌株数是                  个。

              (5)下图所示的四种菌落分布图中,不可能由稀释涂布平板法得到的是_ _ _____。

              (6)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入            指示剂培养几种菌后,指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌;若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入             染料,培养几种菌后,培养基中出现透明圈,就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

            • 10. (8分)“树橘柚者,食之则甘,嗅之则香”,每年的10月,正是柑橘大量上市的季节。橘子全身都是宝:不仅果肉的营养价值高,药用价值较高,其皮、核、络、叶都是“地道药材”。请回答下列问题。

              (1)江南某橘子盛产地想建立一个大型的果酒、果醋加工厂,需要的发酵菌种是_________和________。分离纯化这两种微生物的常用方法是:将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上,用涂布器将菌液铺平。这种接种方法称为_________________  。

              (2)提取桔皮的胡萝卜素过程中,萃取加热时需安装冷凝回流装置,其目的是________________________________________________________________________。

              (3)四川一果汁加工厂在制作橘子汁的过程中发现果汁有些浑浊,为提高出汁率,可加入适量的________________使果汁变得澄清。

              (4)培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值____________(填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时,应采取的灭菌方法是______________________________________________。

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