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            • 1. 苹果醋具有营养丰富,增强机体免疫力,护肤养肝等多种功效,以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下图1,请分析回答:

              (1)过程甲中使用的微生物代谢类型是_____________,发酵温度控制在180C~250C,经过10~12天后,样液中是否产生酒精,可以用___________来检验。
              (2)利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是___________________________________________。
              (3)过程乙中使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得,下图操作是分离纯化过程中利用_________法进行接种,在操作过程中应注意的事项有下列哪几项______________(填序号)。

              ①每次划线前和结束时都需要灼烧接种环;
              ②灼烧接种环后,待其冷却后再划线;
              ③第二次及以后的划线,要从上一次划线的末端划线;
              ④最后一次划线不能和首次划的线相接触。
              (4)为了保持菌种的纯净,对于长期需要保存的菌种,可以采用_______________________的方法。

              (5)某同学尝试自己利用图2装置制果醋,制作过程中进气口应_____________,排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是_________________________________________。

            • 2. 国家标准规定每毫升酸奶产品中乳酸菌菌数不得低于1×106.为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达到国家标准,某兴趣小组进行了如下实验,请回答下列问题:
              (1)制备培养基:培养基的碳源为 ______ (填“含碳无机物”或“含碳有机物”).检测培养基灭菌是否合格的方法是 ______ .
              (2)样品稀释: 先将样品稀释10倍,可用无菌移液管吸取25mL酸奶样品加入盛有 ______  mL无菌水的三角瓶中,使样品与水充分混匀.然后进行系列稀释操作,得到稀释至106、107、108倍的样品.
              (3)培养与统计:吸取不同稀释度的样品各1mL,分别置于不同培养皿内,加入适宜温度的溶化状态的培养基,使之混合均匀,冷却成平板.每个稀释度做3个重复.在适宜条件下培养一段时间后,对平板的菌落数进行统计,结果如表:为了保证结果准确,应选择上述稀释度为 ______ 倍的平板菌落数作为统计结果,计算出样品中每毫升乳酸菌数为 ______ .


              (4)测定微生物的数量常采用稀释涂布平板法,其统计的数值往往比实际数目______ ,原因是 _________________________________________________ .

            • 3. 回答下列有关微生物和酶工程的问题.
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶,后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值,且已大规模产业化应用.
              (1)在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时,培养基营养成分应包括水和 ______ (用序号组合回答).
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株,将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水(f) 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面;在37℃恒温箱中放置2~3天,结果如图1.

              (2)大规模产业化首选的菌株是 ______ ;菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是 ______
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据,即酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其酶活性.在该蛋白酶的工业化生产过程中,通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间,再制备酶制剂.
              (3)在60~70℃保温一定时间的作用是 ______
              A.诱导蛋白酶的热稳定性
              B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C.裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              (4)枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为 ______ (选择正确的序号并排序).
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩.
            • 4.

              [生物一选修1:生物技术实践]

              泡菜和酸奶的制作都离不开乳酸菌。请回答下列一种相关的问题。

              (1)制作泡菜时,泡菜坛需要加水密封,目的是_____________。制作期间,是否需要定时排气?为什么?_________________。一般地说,泡制14天后的泡菜中_____________的含量较低,不会危害人体健康,适合食用。

              (2)为了比较不同培养基上乳酸菌的生长效果,某同学制备了3种无菌培养基,再量取1mL乳酸菌发酵奶,进行梯度稀释后取10-8稀释液,分别接种到上述的3种培养基上,然后置于37°C环境中培养,第5天用直尺在放大镜下测量菌落直径。

              ①配制本实验的培养基时需要加入___________,使培养基能够凝固。配制好的培养基还需要放入________中进行彻底灭菌。

              ②采用________法,将乳酸菌稀释液分别接种到3种培养基上。接种要求在酒精灯的火焰旁进行,目的是______________________。

              ③菌落直径大的培养基更适合用于培养乳酸菌,原因是___________________。

            • 5.

              如图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工作流程,请回答下列问题:

              (1)微生物一般来自土壤,图中①过程选取产酶微生物时应选择__________的土壤,在鉴定和筛选这种微生物时需用_______对纤维素进行染色并制成选择培养基.最后还要在平板培养基上分离纯化目的菌。

              (2)图中②环节获得的酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,分别为C1酶、CX酶和________。前两种酶使纤维素分解成______,第三种酶将其进一步分解成葡萄糖。

              (3)⑤环节常用的菌种是________.微生物在果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品加工方面应用广泛,其中与果醋、泡菜制作密切相关的微生物分别是______和_______。

              (4)产生酒精的过程中,要注意对发酵装置进行灭菌处理.通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有_______、________和高压蒸汽灭菌.无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行,其目的是___________。

            • 6. 某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示,请分析回答问题:


              (1)培养基中加入化合物A的目的是筛选______________,这种培养基属于____________培养基。

              (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的______________,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是_____________。

              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量__________________的培养液,接入新的培养液中连续培养。

              (4)转为固体培养时,常采用________________________法接种,获得单菌落后继续筛选。

              (5)实验结束后,使用过的培养基应该进行_________________处理后,才能倒掉。

            • 7.

              下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏蛋白胨培养基的配方。请回答:

              (1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________和________。培养基配制完成以后,一般还要调节pH并对培养基进行__________处理。

              (2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和______________两种。在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是_____________________。

              (3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片,可能的原因是什么?

              _____________________________________________________________________

              ______________________________________________________________。

            • 8.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题:

              (1)培养基中加入化合物A的目的是               ,这种培养基属于         培养基。

              (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的           。实验需要振荡几次进行培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是         

              (3)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,在进行下一区域划线前要将接种环       ____________。

              (4)研究人员统计污水池中“目的菌”的总数,选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布平板,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是                    ,此对照实验的目的是                             

              (5)研究人员采用平板划线法纯化水样中分离出的细菌.操作时,在第二次及以后的划线,总是从上一次划线的末端开始划线.这样做的目的___________________.划线的某个平板培养后,第一划线区域的平行线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条平行线上无菌落,其他平行线上有菌落.造成第一条平行线无菌落可能的操作失误有______________。

              (6)在示意图A和图B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

            • 9. (19分)反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官——瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源。以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程。



              (1)进行①过程的目的是            ;②过程所使用的接种方法是             。用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目             ,原因是                                  

              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于        培养基,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→               。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供       的条件。此培养条件也是        (填“果醋”或“果酒”)制作过程中需要的。

              (3)在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是    

              (4)以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后,加入             指示剂后变红色,说明“目的菌”能分解尿素。理由是                                    

              (5)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h-48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中          倍的稀释比较合适。假设每个平板分别接入0.1mL稀释液,据此可得出每毫升瘤胃液体中的活菌数为               个。

              稀释倍数

              103

              104

              105

              106

              107

              菌落数

              >500

              367

              248

              36

              18




            • 10.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              下表为培养某种微生物的培养基配方,请回答有关问题:

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              蒸馏水

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              定容至1000mL


               (1)该种培养基可用来培养            的细菌。从用途看,这种培养基称为___ ____培养基。

              (2)如果要通过统计培养基中的菌落数来估算样品中的细菌数,则在上述培养基中还需要添加 

                      作为凝固剂,接种时应采用                  法才能达到目的。这种方法统计到的是样品中_______的数目,除了这种方法,还有                也是测定微生物数量的常用方法。在用不同浓度的稀释液培养得到的平板中,为保证统计的数目结果较为准确,一般选择菌落数在_______的平板进行计数。

              (3)某同学从土壤中分离出目的细菌以后,若要对其作进一步的鉴定,可在上述的培养基中加入_______指示剂,培养该菌后,如果指示剂变_______,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

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