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            • 1. 创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:_________________________________。

            • 2.

              苹果醋具有营养丰富,增强机体免疫力,护肤养肝等多种功效,以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下图1,请分析回答:

                           图1                                图2

              (1)过程甲中发酵温度控制在​                   ,经过10~12天后,样液中是否产生酒精,可以用            来检验。

              (2)利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是                          。

              (3)过程乙中使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得,操作过程中利用平板划线法进行接种,在操作过程中应注意的事项有下列哪几项____________(填序号)。

              ①每次划线前和结束时都需要灼烧接种环;②灼烧接种环后,待其冷却后再划线;③第二次及以后的划线,要从上一次划线的末端划线;④最后一次划线不能和首次划的线相接触。

              (4)为了保持菌种的纯净,对于长期需要保存的菌种,可以采用            的方法。

              (5)某同学尝试自己利用图2装置制果醋,制作过程中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是                           。

            • 3. 农作物收获后,燃烧秸秆会造成大气污染,如何回收利用是我国面临的一个重要问题.某同学设计从土壤中分离纤维素分解菌→分解秸秆,获得糖液→发酵生产乙醇,从而实现再次利用,请回答以下问题:
              (1)将从土壤中获得的微生物培养在以 ______ 为碳源,并在加入 ______ 的培养基上筛选周围有 ______ 的菌落.
              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ 和 ______ .采用固体平板培养细菌时,需要倒置培养,其原因是 ______ .
              (3)发酵阶段需要的菌种是 ______ ,在产生乙醇时要控制的必要条件是 ______ .
            • 4. 反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官--瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源.以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程.

              (1)进行①过程的目的是 ______ ;②过程所使用的接种方法是 ______ .用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目,原因是 ______ .
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基,制备该培养基的步骤是:计算→ ______ →灭菌→倒平板.由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供 ______ 的条件.
              (3)酶对化学反应的催化效率称为酶活性,图示的酶活性的高低可用 ______ 中 ______ 的减少量来表示.
              (4)萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热,采用水浴加热的原因是 ______ .
              (5)如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用 ______ 方法,在对外植体进行接种前,需要进行制备MS 固体培养基和 ______ 两项工作.培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 ______ (填“高”或“低”)时,有利于芽的分化.
            • 5.
              下列有关平板划线操作的叙述,错误的是(  )
              A.在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧
              B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液
              C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
              D.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
            • 6. 回答下列关于微生物和酶的问题.
              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图1所示.

              (1)①过程为梯度稀释其目的是将聚集在一起的微生物分散成 ______ 细胞,②过程的接种方法为 ______ .
              (2)Ⅰ号培养基属于 ______ (按功能分),该培养基中除了加入淀粉外.还需加入另一种重要的营养成分 ______ (选择序号)
              A.琼脂 B.葡萄糖   C.硝酸铵D.碳酸氢钠
              (3)一般对配制的培养基采用 ______ 灭菌.灭菌是为了杀死体内外所有微生物,包括 ______ .
              (4)从Ⅰ号培养基挑出菌落接种到Ⅱ号培养基时,向Ⅰ号培养基加入碘液,选择菌落周围蓝色浅而且范围 ______ 的菌落挑出.
              在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定.图2中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比.将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最适温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图2中的曲线②.

              (5)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是 ______ .
              A.40~50℃B.50~60℃C.60~70℃D.70~80℃
            • 7. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行 ______ 处理.
              (2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中的培养基应具有的特点是:在 ______  的培养基中加入 ______ .
              (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ .
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.
              (5)若实验接种时用的是稀释涂布平板法,在统计菌落数目时得到4个平板,统计的数目分别为21、213、257、278,则对数据处理后取平均值计数为 ______ ,该方法往往比活菌的实际数目偏 ______ (高/低).
            • 8. 在工业上常利用微生物将木屑、废纸(主要成分为木质纤维)转化为生物乙醇.基本流程如图所示,请据图回答:
              (1)微生物筛选常用的接种方法是______和______.筛选微生物X菌种的培养基中,应以______为唯一碳源,在培养基中加入______,并根据水解圈的大小来筛选微生物X.
              (2)从微生物X中提取的纤维素酶液可通过______法进一步纯化,判断纯化的蛋白质是否达到要求,可用______法对样品进行纯度鉴定.若想使该酶液能反复利用,常采用______的方法进行固定.
              (3)微生物Y是______.在生产生物乙醇的工艺中常对其进行固定化,采用的方法是______.在酸性条件下,可用______来检测发酵产物中是否含有酒精.
            • 9. 微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能讲解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通过项油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术.以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作.请分析回答:
              (1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自 ______ 的土壤.
              (2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分,应选用 ______ 培养基,常用的接种方法是 ______ 或
              ______ .
              (3)接种后,必须密封培养,其原因是该类微生物的异化作用类型是 ______ .培养一段时间后,在培养基上形成降油圈,此时选取降油圈 ______ 的菌落作为高效菌株.
              (4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220,则样品中微生物的数量为 ______ 个/mL.该统计结果 ______ (低于/高于)实际值.
            • 10. 反刍动物瘤胃内栖息着大量的乳酸产生菌如乳酸杆菌,可发酵产生大量的乳酸进而导致瘤胃酸中毒的发生;同时瘤胃中还存在大量的乳酸利用菌,可发酵乳酸.
              (1)乳酸是相应的微生物进行 ______ 产生的,要分离和计数瘤胃液中的乳酸利用菌,必须先制备培养基,该培养基以 ______ 为唯一碳源,采用 ______ 法灭菌,采用 ______ 法接种,并在适宜条件下培养.
              (2)在观察结果时发现培养的菌落形态多样,其原因可能是 ______ .
              (3)体外模拟急性酸中毒条件下添加乳酸利用菌对瘤胃微生物体外发酵的影响.实验设计:实验采用体外批次培养,每个发酵瓶接种12mL 经过四层纱布过滤的新鲜瘤胃液,根据菌株接种量(0mL、4mL、8mL)分为3组,即T0、T4和T8组,各组均设4个重复.如表所示,据此回答下列问题:
              ①该实验的自变量是 ______ .
              ②菌株接种量不足8mL的发酵瓶,用该菌株的 ______ 补足8mL,以保证每个发酵瓶内培养液体积一致.表中的X、Y分别是 ______ mL.
              ③39℃条件下培养18h,每间隔3h测定pH值(不测定初始值),同时收集样品以备测定各时间点的乳酸浓度.测定的乳酸浓度数据有 ______ 个.
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