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            • 1. 创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:_________________________________。

            • 2.

              苹果醋具有营养丰富,增强机体免疫力,护肤养肝等多种功效,以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下图1,请分析回答:

                           图1                                图2

              (1)过程甲中发酵温度控制在​                   ,经过10~12天后,样液中是否产生酒精,可以用            来检验。

              (2)利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是                          。

              (3)过程乙中使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得,操作过程中利用平板划线法进行接种,在操作过程中应注意的事项有下列哪几项____________(填序号)。

              ①每次划线前和结束时都需要灼烧接种环;②灼烧接种环后,待其冷却后再划线;③第二次及以后的划线,要从上一次划线的末端划线;④最后一次划线不能和首次划的线相接触。

              (4)为了保持菌种的纯净,对于长期需要保存的菌种,可以采用            的方法。

              (5)某同学尝试自己利用图2装置制果醋,制作过程中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是                           。

            • 3.
              某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5cm左右)为实验材料,研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用,对土壤处理情况见表.下列有关叙述不正确的是(  )
                 1组  2组  3组 4组 
              是否灭菌   灭菌  不灭菌  灭菌  不灭菌
               土壤处理  湿润  湿润  较干燥  较干燥
              A.该实验的目的是探究不同土壤湿度条件下土壤微生物对落叶的分解作用
              B.为了控制实验中的无关变量,作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
              C.该实验的自变量为土壤是否灭菌的处理,实验中的对照组是1组和3组
              D.预期结论是1、3组的落叶不被分解,2、4组中的落叶被不同程度地分解
            • 4.

              下列有关微生物培养、纯化及筛选的叙述,正确的是

              A.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落
              B.平板划线操作中第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始
              C.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源
              D.在纤维素—刚果红培养基上,能产生透明圈的为纤维素分解菌
            • 5.

              微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油黏度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题:

              (1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自___________________________的土壤。

              (2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分,应选用__________培养基。常用的接种方法是_________和___________培养基。

              (3)接种后,应密封培养的原因是________________,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取___________就可获得高效菌株。

              (4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为____________个/mL。该统计结果_________(填“低于”或“高于”)实际值。

            • 6.

              分析回答下列有关微生物的问题。

              Ⅰ.下图是细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。图中在________(填图中编号)区域出现了单个菌落,产生每个菌落的最初细菌数目是________个细菌。据图分析,在培养基上划线接种时,划线的顺序依次是_________________(用编号表示)。

              Ⅱ.下表是某微生物培养基成分,据表回答下列问题。

              编号

              成分

              含量

              编号

              成分

              含量

              粉状硫

              10 g

              (NH4)2SO4

              0.4 g

              K2HPO4

              4 g

              MgSO4

              9.25 g

              FeSO4

              0.5 g

              CaCl2

              0.5 g

              H2O

              100 mL




              (1)上述培养基所培养微生物的同化作用类型是________,判断依据是____________。

              (2)若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌,该培养基成分如何调整?___________________。依据是___________________________________________。

              (3)若表中培养基用于观察菌落形态,应增加的成分是________。

              Ⅲ.在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下,某些微生物仍然不能正常生长,还需要在培养基中添加________。

            • 7.

              下列关于微生物培养的叙述,不正确的是

              A.倒置平板可防止培养皿盖上冷凝水滴落,造成污染
              B.高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢
              C.划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落
              D.稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目
            • 8. 下表为某培养基的配方,有关叙述正确的是(  )

              A.依物理性质划分,该培养基属于液体培养基
              B.能在此培养基上生长的大肠杆菌,一定含有能合成青霉素的基因
              C.依用途划分,该培养基既属于选择培养基又属于鉴别培养基
              D.此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准 
            • 9.

              常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌。操作如下:

              (1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是______________________________________。获得纯净培养物的关键是____________________。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是__________________________。划线的某个平板经培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是______________________________。

              (3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一________的固体培养基上,在适宜的条件下培养一段时间,获得能利用木糖的多个酵母菌__________。实验中所用培养基按功能属于__________培养基。

              (4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用__________________法。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是______________________________。然后,将1 mL土壤溶液分别稀释10倍和100倍,各在3个平板上分别接入每种稀释度的稀释液0.1 mL,经适当培养后,6个平板上的菌落个数分别为59、57、58、2、7和5,据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为____________个。

            • 10.

              I.现有五种不同的抗生素(甲、乙、丙、丁、戊),要测它们对金黄色葡萄球菌的作用效果。图1表示在均匀接种了金黄色葡萄球菌的固体培养基上,分别于不同位置加入2mg不同的抗生素的实验结果(图中●为添加点)。图2表示这五种抗生素对成人产生毒副作用的剂量。请回答:



                            图1                                                  图2


              (1)由图1可知,_______种抗生素的抗菌效果最好。

              (2)如果给予剂量为2mg,那么________种抗生素最适宜成人使用,理由是_____________。

              (3)已知丁种抗生素作用的原理是抑制金黄色葡萄球菌细胞壁的形成,由此推测该种抗生素对成人的毒副作用较小的可能原因之一是___________________________。

              (4)为保证培养基上能均匀地生长出一层金黄色葡萄球菌,将菌液接种到固体培养基上时宜进行____________(填“涂布平板”或“平板划线”)操作。实验过程中,与用于计数的平板接种不同的是本实验要保证滴加到培养基上的菌液_______________,以缩短培养时间。

              (5)本实验过程中所使用的无菌技术,除用来防止培养物(金黄色葡萄球菌)被其他外来微生物污染外,还能_______________。



              II.人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图1所示。请回答:


                                                          图1


              (1)如图1所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为_________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是_________________________。

              (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行_______处理。

              (3)采用SRY-PCR法进行性别鉴定的基本程序是提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

              ①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有____________;其中,dNTP的作用是____________________________________,引物应选用图2中的________(填图中标号,图2中I、II、III、IV是引物,箭头是延伸方向)。




                                            图2


              ②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞______(填“能”或“不能”)用作图1所示技术流程中转化过程的受体细胞。

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