(1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H₂O等；该培养基中微生物所需的氮源来自________，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是_______________________________________________；培养基灭菌后，需要冷却到________ ℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是___________________________________________________________________________。

(2)为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中，某一实验组平板上的平均菌落数为39个，而空白对照组的平板上出现了9个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

(3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是：_________________________________。

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每毫升水样中的活菌数为________。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。制备培养基前，培养皿最好通过________灭菌。操作时，接种环最好通过________灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是________________。

（3）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种水样培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的________的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用______________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是______________________。

(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________和________。

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是__________________。

(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为____________。

皮肤作为人体最大的器官，拥有达1.8m²的表面积，其主要功能是作为物理屏障，保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时，皮肤也是人体与外界环境接触的部位，因此常驻有各类微生物，包括细菌、真菌和病毒等。通过微生物培养技术能了解我们皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题：

(1)微生物生长繁殖所需要的营养物质有碳源、水、_________、_________四大类。由于不同种类微生物的菌落特征表现不同，因此可以利用_________（填“固体”或“液体”）培养基来培养，通过观察菌落特征对微生物进行初步的鉴定和分类。

(2)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。在溶化之后、灭菌之前需要调节______；灭菌后，待培养基冷却至______℃左右时，在酒精灯火焰旁倒平板；待平板冷却凝固后，需要将平板____________。

(3)利用平板划线法分离纯化某细菌的操作中，使用________法对接种环进行灭菌。第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，目的是____________。

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株．回答问题：

实验室通常需要对目的菌种进行纯化。回答以下关于微生物实验室培养的有关问题。

（1）获得纯净培养物的关键________________________。在无菌技术中，对操作者用酒精擦拭双手属于________，对金属用具、玻璃器皿、培养基等要进行灭菌，其中，培养基只能用__________灭菌。

(2)通常在某一环境中微生物有多种并混合在一起，若要对某种微生物进行纯化，最常用的方法是平板划线法和__________________。使用平板划线法时，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是______________________。

（3）制备培养基的操作步骤是_____________________。（用下列字母排序）

a．倒平板 b．计算     c．溶化      d．称量     e．灭菌

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养主要提供了 ________ 和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_____和水。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）在接种操作过程中，为防止杂菌污染，需对接种空间和操作者的衣着和手等进行________（消毒、灭菌）；该小组可采用 ________ 或 ________ (接种方法)检测水样中的细菌含量。在接种前，随机取若干灭菌后的空平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是检测平板培养基_________是否合格；

（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，温度设定在37℃。为明确培养基的灭菌效果和接种中无菌操作的是否规范，使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

（5）培养20小时后，观察到平板上有5种形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（6）该小组将得到的某菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的_______的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高培养液中__________的利用率。

（7）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌。

（8）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

淀粉分解菌是能分解淀粉的一类微生物，在自然条件下，淀粉分解菌和其他各种细菌混杂生活在土壤中。某实验小组利用培养基将土壤中的淀粉分解菌筛选出来，回答下列问题：

（1）将土壤中的淀粉分解菌筛选出来的培养基应添加_____________作为唯一的碳源，此外还需要添加的成分有________________。微生物的接种的方法很多，最常用的是________________和________________。

（2）该实验小组将样液分别稀释了 10^１倍、 10² 倍、 10³ 倍、 10⁴ 倍，然后将 10² 倍、 10³ 倍、 10⁴ 倍的稀释液分别涂布在不同的平板上，若有三个平板均涂布了稀释倍数为 10³ 倍的稀释液 0.1 mL，分别形成了 68、 70 和 72个菌落，则原样液体中每升含有淀粉分解菌_____________个，该方法测量值一般比实际值___________，原因是________________________________  。

（3）胡萝卜素化学性质比较稳定，易溶于有机溶剂，可采用萃取法提取。萃取过程中采用___________加热，因为______________________________________________________；

萃取装置要在加热瓶口安装回流冷凝装置，其目的是___________________________________ 。

（1）像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有 ____________________等。(要求回答4种营养物质)

（5）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用 __________________培养基，常用的接种方法 _______和 _________．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为 ______________个/mL．该统计结果 ____________（低于、高于）实际值。