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          50条信息

            • 1.
              科学家们对一位缺乏腺苷酸脱氨酶基因而患严重复合型免疫缺陷症的美国女孩进行基因治疗,其方法是首先将患者的淋巴细胞取出做体外培养,然后用病毒将正常腺苷酸脱氨酶基因转入人工培养的淋巴细胞中,再将这些转基因淋巴细胞回输到患者体内,经过多次治疗,患者的免疫功能趋于正常.其思路如图所示:

              回答下列问题:
              (1)如果要在短时间内获得较多的目的基因,通常采用 ______ 技术,该技术原理是 ______ .在操作步骤中需要加热至90-95℃使 ______ ,然后降温至55-65℃,其目的是 ______ .
              (2)在进行细胞培养时,对培养液要进行无菌处理,通常还添加一定量的 ______ ,以防止培养过程中的污染;使用合成培养基时,通常加入 ______ 等一些天然成分.
              (3)如果检测发现目的基因被成功导入了受体细胞,但却没有检测到目的基因相对应的蛋白质,应考虑位于目的基因首端的 ______ 和末端的 ______ 是否设计好,并从这方面进一步改善.
              (4)用于基因治疗的基因种类有三类,其中一类是反义基因,即通过产生的mRNA分子,与病变基因产生的 ______ 进行互补,来阻止 ______ 合成.
            • 2. 地中海贫血症属于常染色体遗传病.一对夫妇生有一位重型β地中海贫血症患儿,分析发现,患儿血红蛋白β链第39位氨基酸的编码序列发生了突变(C→T).用PCR扩增包含该位点的一段DNA片段l,突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s;但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切,如图11(a).目前患儿母亲再次怀孕,并接受了产前基因诊断.家庭成员及胎儿的PCR扩增产物酶切电泳带型示意图见图11(b).(终止密码子为UAA、UAG、UGA.)

              (1)在获得单链模板的方式上,PCR扩增与体内DNA复制不同,前者通过______解开双链,后者通过______解开双链.
              (2)据图分析,胎儿的基因型是______(基因用A、a表示).患儿患病可能的原因是______的原始生殖细胞通过______过程产生配子时,发生了基因突变;从基因表达水平分析,其患病是由于______.
              (3)研究者在另一种贫血症的一位患者β链基因中检测到一个新的突变位点,该突变导致β链第102位的天冬酰胺替换为苏氨酸.如果______,但______,则为证明该突变位点就是这种贫血症的致病位点提供了一个有力证据.
            • 3.
              变异链球菌在牙面的粘附、集聚是龋齿发生的先决条件,转基因可食防龋疫苗是通过基因工程技术,将变异链球菌中与龋齿发生密切相关的抗原基因(PAcA基因)转入植物的表达载体中,利用植物生物反应器生产的可食用基因工程疫苗.
              (1)转基因植物的制备:
              单一使用PAcA基因,机体免疫应答不理想,霍乱毒素中有增强机体免疫应答的氨基酸序列(CTB),将CTB基因与PAcA基因连接成嵌合(PAcA-CTB)基因,作为 ______ 与Ti质粒的T-DNA拼接,并用 ______ 法导入离体的黄瓜叶肉细胞中,经植物组织培养获得转基因植株.
              (2)转基因植株目的基因的PCR鉴定:已知PAcA-CTB基因部分序列如下
              5′---CCGTGT…ATGCCT---3′
              3′---GGCACA…TACGGA---5′
              根据上述序列选择引物 ______ (填字母)进行PCR.
              A.引物:5′-GGCACA-3′
              B.引物:5′-AGGCAT-3′
              C.引物:5′-CCGUGU-3′
              D.引物:5′-CCGTGT-3′
              反应结束后,电泳检测PCR产物,结果如图(1来自未转化植株,2是含PAcA-CTB基因的质粒,3-10来自转基因植物),从结果可以看出, ______ 号植物含有PAcA-CTB基因.

              (3)对上述含PAcA-CTB基因的植株进一步研究,发现其中一些植株体细胞中含两个PAcA-CTB基因(用字母A表示,基因间无累加效应).为了确定这两个基因与染色体的位置关系,研究人员单独种植每株黄瓜,将同一植株上雄花花粉授到雌花柱头上,通过子一代表现型及其分离比进行分析:
              ①若F1中疫苗植株:非疫苗植株= ______ ,则PAcA-CTB基因位于非同源染色体上,基因与染色体的位置关系如图甲所示.

              ②若F1中疫苗植株:非疫苗植株=3:1,则两个基因位于 ______ ,请在图乙中标出基因.
              ③若F1全为疫苗植株,则两个基因位于 ______ ,请在图丙中标出基因.
              (4)上述三种基因与染色体的位置关系适于进行推广种植的是两个基因位于 ______ 的植株.多年后,若出现了非疫苗植株,请写出一种可能的变异类型及产生的原因 ______ .
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