3.
A.炭疽杆菌能使人畜患炭疽病,主要引起皮肤炭疽和肺炭疽等。对炭疽病疑似患者,可通过甲图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊,其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。
(1)炭疽杆菌在细胞结构上_______(“有”或“无”)成形细胞核,根据炭疽病的发病部位,你猜测炭疽杆菌的代谢方式应为__________。
(2)若要从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌,可将患者皮肤脓胞渗出物接种于特定的固体培养基表面,如乙图所示。图中A和D所示的接种方法分别叫:____________和____________
(3)甲图中制备的液体培养基时需采取______________法灭菌。甲乙两图中的各组培养基中都必须含有的营养成分有水、无机盐、____________.接种可疑菌后,需将三角瓶置于35℃下的摇床上振荡培养24小时,可疑菌会大量繁殖,液体培养基变浑浊。
(4)甲图中,对照组与实验组试管同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组______(高/低),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。此判断的依据是
______ 。
B.下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了质粒和目的基因中相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具有的基本条件有________________(答出两点即可),而作为基因表达载体,除了满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)根据表格分析,经BamHⅠ酶切后得到的DNA片段_____________("可以"或"不可以")与经HindⅢ酶切后的产物连接,理由是________________.
(3)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用两种限制酶切割,即BelⅠ酶和___________。酶切后的载体和目的基因片段,通过______酶作用后获得重组质粒.为了扩增重组质粒,需将其转入处于_________态的大肠杆菌。
(4)转入了重组质粒的大肠杆菌可在添加了_____________的培养基表面长出菌落。若用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中______________。