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            • 1. 中国科学家成功将肝再生增强因子(hALR)的基因导入羊的乳腺上皮细胞中,再利用核移植技术培育出了转基因克隆羊,其乳汁含有hALR.回答下列问题:
              (1)在体外,可通过PCR技术扩增hALR基因,该技术依据的原理是 ______ .为了保证PCR反应的进行,反应体系需要加入耐高温 ______ 酶、模板DNA、dCTP、dATP、dGTP、dTTP、 ______ 等.
              (2)将外源hALR基因导入乳腺上皮细胞常用的方法是 ______ ,检测其染色体上是否整合了hALR基因,可采用 ______ 技术;将乳腺上皮细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,对受体卵母细胞的处理是 ______
              (3)与转基因工程菌(大肠杆菌)相比,利用羊乳腺生产出的hALR有生物活性,其原因可能是 ______
            • 2. 科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了新思想.某国家重点实验室准备探索利用基因工程生产单克隆抗体,请回答下列问题:
              (1)实验室已获得无限增殖调控基因(prG).在体外,可采用 ______ 技术大量扩增该目的基因.该技术的基本反应过程:目的基因DNA受热 ______ 后解链为单链,与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶的作用下进行 ______ ,如此重复循环多次.该技术的前提是要有 ______ ,以便根据这一序列合成引物.
              (2)该基因工程操作的核心是 ______ .本研究中,受体细胞为 ______ ,欲将目的基因转入受体细胞,常采用 ______ 方法.若实验成功,则受体细胞既能 ______ ,又能 ______
              (3)制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术,使 ______ 细胞与 ______ 细胞融合,融合成功的细胞经过筛选就是所需要的 ______ 细胞.
            • 3. 如图表示转基因烟草的培育过程.请据图回答:
              (1)图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是 ______ ,若将外源基因导入动物细胞,目前采用最多、最有效的是 ______ 技术.
              (2)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因,携带外源基因的质粒上应有 ______ ,还应有 ______ ,以利于外源基因的表达.
              (3)该过程中用到的植物细胞工程技术是 ______ ,这项技术应在 ______ 条件下进行,依据的生物学原理是 ______
              (4)外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测 ______ ,其次采用分子杂交技术检测 ______ ,最后通过抗原-抗体杂交检测 ______
            • 4. 植酸酶能提高饲料中磷的利用率,减少磷随畜禽粪便排出量,进而降低环境污染. 科学家试图将黑曲霉植酸酶基因(phyA)转入猪细胞中,以培育出转植酸酶基因猪.如图为实验过程中基因表达载体的构建过程,图中A、A1,B、B1表示引物,NheⅠ(GCTAGC),XhoⅠ(GTCGAG)为限制酶.请问答.

              (1)实验室通用是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA,再通过 ______ 等技术形成 phyA对应的cDNA,从基因结构分析,这一cDNA比黑曲霉细胞中的phyA少 ______ 等结构.
              (2)由图可知,科学家首先将黑曲霉植酸酶基因phyA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因 (ps)拼接在一起,其目的是 ______ .实验室中,过程②(解链)一般可通过 ______ 的方法完成,利用 ______ 将这两个DNA片段连接起来.
              (3)限制酶X ho I切割DNA形成的黏性末端可以表示为 ______ .过程④中同时利用Nhe I酶和Xho I酶处理目的基因和运载体,其主要优点是 ______
              (4)研究中需要将重组质粒导入 ______ ,再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪,选取这类细胞作为目的基因的受体细胞的主要依据是 ______
            • 5. 如表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的而不重复标注.请回答下列问题.
              限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ
              识别序列及切割位点

              (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用限制酶为 ______ ,酶切后的载体和目的基因片段通过 ______ 酶作用后获得重组质粒.
              (2)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端可直接被DNA连接酶连接,原因是 ______ ,这两种酶 ______ (选填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开连接的部位,原因是 ______
              (3)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得 ______ 种大小不同的DNA片段.
              (4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加 ______ ,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中 ______
            • 6. 科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高.在培养转基因番茄的过程中,下列操作不合理的是(  )
              A.可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
              B.利用选择性培养基对构建的基因表达载体直接筛选
              C.利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
              D.在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄植株
            • 7. 预防乙肝最有效的途径是接种疫苗.将乙肝表面抗原基因转移到植物细胞内可生产乙肝疫苗.回答下列问题.
              (1)欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因.通过 ______ (填写中文名称)技术,其原理是 ______ ,利用该技术扩增乙肝表面抗原基因的前提是 ______
              (2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,此外采用 ______ 法十分简便经济.用抗原--抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白,若有 ______ 出现,表明目的基因已形成蛋白质产品.
              (3)将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后,采用 ______ 技术获得愈伤组织,该技术需在 ______ 条件下进行.
              (4)乙肝疫苗在2~8℃条件下保存,其不宜在常温下保存最可能的原因 ______
            • 8. “无废弃农业”是我国古代传统农业的辉煌成就之一,也是生态工程最早和最生动的一种模式.如图是无废弃农业中对有机废弃物进行处理的一种方案,请回答问题:

              (1)生态工程是指人类应用 ______ 等学科的基本原理,通过系统设计、调控和技术组装,对已被破坏的生态环境进行 ______ ,对造成环境污染和破坏的传统生产方式进行改善,并提高生态系统的生产力,从而促进人类社会和自然环境的和谐发展.
              (2)“无废弃农业”遵循的生态学原理主要是 ______ 原理.施用有机肥料有利于提高农作物的产量,原因是土壤微生物分解有机肥料所产生的 ______ 使农作物的光合作用强度得到提高.
              (3)从资源化、无害化角度分析,途径②、③优于④的原因是通过 ______ 有机废弃物中的物质,既充分利用有机物中的能量、又减少 ______
              (4)少量有机废弃物排入河流,不会使河流中的生物种类和数量发生明显变化,这说明生态系统具有 ______ 能力.
              (5)焚烧塑料垃圾所产生的二噁英会诱发 ______  基因突变,导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞.
              (6)能降解塑料的微生物属于生态系统的 ______ (成分).若利用DNA重组技术将降解塑料的基因导入某些土壤微生物(如:根瘤菌)中,则土壤中的塑料有望得到较快降解,该技术的核心是 ______
            • 9. 2014年埃博拉病在非洲蔓延,我国派出医疗队首次在境外组建医院,帮助非洲防控埃博拉疫情.
              (1)研究表明,埃博拉病毒侵入机体后,通过靶向感染,破坏吞噬细胞等,使其不能暴露该病毒的 ______ ,以致感染信息不能呈递给 ______ ,从而无法正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程,导致机体对该病毒的 ______ 免疫功能下降.因此,病毒在体内快速增殖、致病.
              (2)用大肠杆菌生产埃博拉病毒的某蛋白(目的蛋白)时,因埃博拉病毒不是逆转录病毒,可先将埃博拉病毒的RNA与逆转率病毒的RNA重组,在 ______ 的作用下合成 ______ .再用 ______  切取该目的蛋白的基因,与质粒构建 ______ ,同时用 ______ 处理大肠杆菌使其成为感受态细胞.
              (3)用埃博拉病毒的某种蛋白免疫小鼠,通过 ______ 技术获得杂交瘤细胞,用于生产单克隆抗体治疗该病.单克隆抗体的优点是 ______
            • 10. 筛选是生物工程技术中的一个重要环节.下列关于生物工程对所需要的对象进行筛选叙述中,错误的是(  )
              A.基因工程中,依标记基因对工程菌进行筛选
              B.遗传育种中,利用病菌侵染法,对所育植物品种的抗病性进行筛选
              C.单克隆抗体制备过程中,最后大量抗体产生后还要经过筛选提纯才能得到纯净的单克隆抗体
              D.细胞工程中,利用双亲细胞的特性筛选出杂种细胞
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