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          50条信息

            • 1.

              如图表示转基因马铃薯的培育过程,请回答相关问题:

              (1)构建含抗原基因的表达载体时,需选择图中的_______________限制酶进行酶切。____(填“能”或“不能”)用SmaⅠ对含目的基因的DNA片段进行切割,因为____________________。 将多个目的基因、质粒、所需限制酶及DNA连接酶混合于试管中,只考虑两两连接和自身环化两种情况,最终能形成________种环状产物。

              (2)如果用马铃薯发育的某个时期的mRNA反转录产生的__________片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做马铃薯的__________。

              (3)重组质粒中,目的基因的两端还必须有__________和终止子。用含重组质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后,采用__________技术检测转基因马铃薯的__________上是否插入了目的基因,同时还要采用__________技术检测目的基因是否在转基因马铃薯细胞中表达。

              (4)培育愈伤组织的固体培养基中,除了无机盐、有机营养物质、琼脂、卡那霉素外,还需添加的物质是__________,添加卡那霉素的作用是______________________。

            • 2. 随着科学技术的发展,人们可以通过结合多种现代生物技术大量生产出人类需求量大的一些药物,如我国基因工程药物的研制和生产就已取得极大的成功。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品,大致过程如图所示:

              (1)哺乳动物的体外受精主要包括[a]_____、[b]______和受精等几个主要步骤。若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能,可给供体注射________,使其排出更多的卵子。

              (2)通过过程c构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是_______识别、结合位点。d过程常用的方法是_________。

              (3)e过程的名称为_________,其实质是________________________。若要一次获得多只完全相同的转基因牛,应采用胚胎分割技术,通常选择发育良好、形态正常的_________或桑椹胚。

            • 3.

              在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里,一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β胡萝卜素,它呈现金黄色泽,故称“金色大米”。“金色大米”的培育流程如图所示,请回答下列问题。(已知酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—)。


              (1)培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中,其核心是_________________,它的构成至少包括_____________________________________________________等。
              (2)在研究过程中获取了目的基因后采用__________技术进行扩增。在构建c的过程中目的基因用_________________(填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”)进行了切割。检验重组载体导入能否成功,需要利用______________作为标记基因。

              (3)过程d采用__________________法,过程e运用了_________________技术,在该技术应用的过程中,关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行________________________。

            • 4.

              I.现有五种不同的抗生素(甲、乙、丙、丁、戊),要测它们对金黄色葡萄球菌的作用效果。图1表示在均匀接种了金黄色葡萄球菌的固体培养基上,分别于不同位置加入2mg不同的抗生素的实验结果(图中●为添加点)。图2表示这五种抗生素对成人产生毒副作用的剂量。请回答:



                            图1                                                  图2


              (1)由图1可知,_______种抗生素的抗菌效果最好。

              (2)如果给予剂量为2mg,那么________种抗生素最适宜成人使用,理由是_____________。

              (3)已知丁种抗生素作用的原理是抑制金黄色葡萄球菌细胞壁的形成,由此推测该种抗生素对成人的毒副作用较小的可能原因之一是___________________________。

              (4)为保证培养基上能均匀地生长出一层金黄色葡萄球菌,将菌液接种到固体培养基上时宜进行____________(填“涂布平板”或“平板划线”)操作。实验过程中,与用于计数的平板接种不同的是本实验要保证滴加到培养基上的菌液_______________,以缩短培养时间。

              (5)本实验过程中所使用的无菌技术,除用来防止培养物(金黄色葡萄球菌)被其他外来微生物污染外,还能_______________。



              II.人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图1所示。请回答:


                                                          图1


              (1)如图1所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为_________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是_________________________。

              (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行_______处理。

              (3)采用SRY-PCR法进行性别鉴定的基本程序是提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

              ①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有____________;其中,dNTP的作用是____________________________________,引物应选用图2中的________(填图中标号,图2中I、II、III、IV是引物,箭头是延伸方向)。




                                            图2


              ②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞______(填“能”或“不能”)用作图1所示技术流程中转化过程的受体细胞。

            • 5.

              下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。请据图回答:

              (1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在 ____________酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在 ____________作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的_ ___________序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的 ______________序列,再通过化学方法合成所需基因。
              (2)由A和载体B拼接形成的C通常称为_ ___________________
            • 6.

              北极比目鱼中有抗冻基因,下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图,请回答:


              (1)利用过程①的方法构建的基因文库是____________,除了从基因文库中获取目的基因以外,常用的获取目的基因的方法还有_____________________和_____________________。

              (2)过程②中常需要使用限制酶和DNA连接酶,既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是_________________________。

              (3)为使过程①获取的目的基因在番茄细胞中能够表达,在构建表达载体时,需要将目的基因插入______________________,并且需在目的基因的首端和尾端分别加入___________,___________。

              (4)此题中将目的基因导入受体细胞的方法是_____________。

              (5)要检测番茄的DNA上是否插入抗冻基因,应以_______________________________为探针,与番茄基因组DNA杂交;要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中正确表达,应通过_____________法检测转基因番茄植株中该基因的表达产物是否呈阳性。

            • 7. 下面是口蹄疫疫苗生产过程示意图,请据图回答下列问题:

                 

              (1)以合成病毒蛋白的RNA产生病毒蛋白的DNA,需用到的工具酶是________;

              (2)基因工程的核心步骤是________________;该过程所需要的工具酶是_______;基因表达载体除目的基因外,还应包括_________________;

              (3)将目的导入大肠杆菌前,需先用________________将大肠杆菌处理为______________细胞;

              (4)为检测目的基因是否导入受体细胞,常常要借助载体上__________的表达,更准确的方法是利用放射性同位素标记的________________作探针与受体细胞基因组DNA杂交;最后还要检测目的基因是否翻译成了病毒蛋白质,利用的技术是__________________________________________。

            • 8. 利用纤维素生产酒精,菌株_____更具有优势,其优势在于_______________。
            • 9. 干扰素是治疗癌症的药物,成分是一种糖蛋白,它必须从血液中提取,每升人血中只能提取0.05μg,所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚的基因公司用如图所示的方式生产干扰素,试分析回答下列问题:

              (1)从人的淋巴细胞中取出________________,使它同质粒相结合,然后移植到酵母菌体内,让酵母菌________________。

              (2)有人尝试将干扰素基因与大肠杆菌的质粒重组,转入大肠杆菌体内后,形成“工程菌”,此种操作能制备到干扰素吗?___,请说明理由:___。

              (3)中国青年科学家陈炬成功地把人的干扰素基因移植到烟草的DNA分子上,使烟草获得了抗病毒的能力,试分析:

              ①人的基因之所以能移接到植物体内,其物质基础是__________________________。

              ②烟草有了抗病能力,这表明烟草体内产生了____。这个事实说明,人和植物共用一套___,蛋白质合成方式_______(基本相同\大不相同)。

            • 10.

              在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanR)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答:

              (1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:提取目的基因、________________、将目的基因导入受体细胞、_______________________。

              (2)要使运载体与该抗虫基因连接,A过程中首先应将运载体与该抗虫基因进行切割。假如运载体被切割后,得到的分子末端序列为,则能与该运载体连接的抗虫基因分子的末端是(   )

              A.     B.    C.    D.

              (3)切割完成后,采用DNA连接酶将运载体与该抗虫基因连接,连接后得到的DNA分子称为_____________________________。

              (4)来自苏云金杆菌的抗虫基因能在植物体内成功表达,说明苏云金杆菌和植物等生物共用__________________。

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