(1)科学家在进行图中[①]操作时,要用______________________

分别切割运载体和目的基因,还要用__________将运载体和目的基因连接起来,形成___________________________。 

(2)经过[②]操作将目的基因导入________,然后经过组织培养形成抗虫棉植株,此过程体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是________、___________________________

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

（1）若要获得抗病基因，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。要获得含抗病基因的重组质粒可用_____和_______限制酶切割质粒。它们能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________________ 断开。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有________基因，作为标记基因。

（3）将重组DNA分子导入香蕉受体细胞的常用方法是________法。

（4）为了进一步确定抗病基因是否插入香蕉细胞染色体，可采用的检测方法是_______________。目的基因进入受体细胞后的表达过程中，RNA聚合酶需与______________识别和结合，从而驱动转录过程。

（5）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过____________________的方法，可培育成能表现新性状的植株，该方法依据的原理是：__________________________。

紫杉醇是新型抗癌药物，能与细胞微管蛋白结合，具有促进微管聚合，抑制微管解聚的功能，从而起到抗癌作用。

（1）细胞进行有丝分裂时需要微管聚合和解聚的正常动态平衡，从而在有丝分裂的          期染色体能够随微管解聚产生的拉力和微管聚合产生的推力，向两极移动。紫杉醇通过影响癌细胞在有丝分裂时        的形成，导致染色体数目异常，从而抑制了癌细胞分裂和增殖。

（2）紫杉醇是红豆杉的细胞代谢产物，可从红豆杉中提取，但红豆杉生长十分缓慢，数量有限且紫杉醇含量非常低。因此，研究人员尝试运用现代生物技术获取紫杉醇。

①传统提取紫杉醇的过程中会产生大量废弃物，经研究发现酶A可将废弃物部分转化为紫杉醇，但酶A活性较低，研究人员成功获得能表达高活性酶A的目的基因，并利用基因工程技术导入            （大肠杆菌/酵母菌）细胞中，最终获得高活性酶A，从而提高紫杉醇转化量。

②研究人员欲通过植物组织培养获得紫杉醇，分别剪取曼地亚红豆杉和南方红豆杉的幼芽和嫩叶，作为外植体，在无菌条件下             （填“避光”或“照光”）培养，经          形成愈伤组织。记录实验数据，计算出愈伤组织诱导率，如下图。

（3）由上图可知，同一品种红豆杉以           （部位）作为实验材料愈伤组织的诱导率较高，这可能是因为                。

（4）从实验数据可知，选择           作为实验材料并用           号培养基培养，更易获得愈伤组织，从而大量生产紫杉醇。

我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗,其有效成分是乙肝表面抗原蛋白。下图是将乙肝表面抗原基因转移到烟草细胞内生产乙肝疫苗的示意图,请据图回答下列问题。

（1）过程①表示             。为了使目的基因正常表达，其首端必须有       ，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择           进行连接。（填“E•coli DNA连接酶”或“T4 DNA连接酶”）

（2）图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为            。它是利用运载体Ti质粒中含有__________序列，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。

（3）图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞后，长芽、生根的过程中采用了细胞工程的_______________技术，该技术的原理是                    。

（4）检测烟草植株细胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，采用的方法是            。

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关，获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①是基因工程的核心，通过过程①构建的基因表达载体除了含有KIFⅡ基因外，还必须有启动子、     以及     等。

（2）过程②必需加入     酶，才能获得单个的成纤维细胞。

（3）在过程③中，为了获得更多的卵（母）细胞，需用   处理成年母绒山羊。

（4）在过程④进行之前，需对卵（母）细胞进行                处理。过程④称为              。

（5）过程⑤称为            ，进行该过程的最佳时期是              ，通过      技术可以实现同卵多胎。 过程⑤能够成功进行的生理基础是__________。

1型糖尿病患者的另一种治疗方法是可以通过注射胰岛素的方法来缓解病情。利用微生物基因工程技术发酵生产可以获得大量胰岛素。现有一种可以作为目的基因运载体的普通质粒，用不同的酶切割质粒如图2所示[ 1kb即1000个碱基对，*表示EcoRV限制酶切割的一个黏性末端（单链片段）]。请将Mbol酶和EcoRV酶在图3中标注其所在位置和切割的长度。

下图表示以某种农作物①和②两个品种为基础，培育出④⑤⑥⑦四个品种的育种过程请回答下列问题:

（1）过程Ⅰ叫做         ；④Ab可称作         植株,获得该植株常采用的方法是               。

（2）通过I、Ⅱ过程培育出⑤所采用的育种方法的原理是      ；用I、Ⅲ、V培育出⑤所采用的育种方法是        ，其优越性主要表现为                。

（3）在图Ⅳ育种过程中，用秋水仙素处理的对象是              ，其发挥作用的时期为            。

图Ⅵ培育⑦的育种原理为                   。

（4）某植株产生了一种新的抗病基因，若要获得该抗病基因，应用              酶处理切割DNA分子，此酶的作用部位是DNA分子的                  。将该抗病基因转移到农作物体内的四个操作步骤为：

提取目的基因、              、将目的基因导入受体细胞、目的基因的表达与检测。

（1）根据表面抗原蛋白质的氨基酸序列推测出目的基因的________，进行人工合成，然后通过______技术大量扩增。

（2）基因工程的核心步骤是________，要利用________连接被限制酶切开的键。

（3）在表达过程中，启动子需与________识别和结合，从而驱动转录过程。

（4）实验证明，一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的________细胞数量增多，导致获得的免疫预防作用更强，持续时间更久。

科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠一人嵌合抗体，用于癌症治疗。如图表示形成鼠一人嵌合抗体的过程。请据图回答：

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与             融合，形成杂交瘤细胞，并

通过体内培养或体外培生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的             ，可大量制备。

(2)与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方面的主要区别是还常用             诱导融合。

(3)生产单克隆抗体一般不直接培养B淋巴细胞，主要原因是             。人体内的抗体中             细胞合成分泌的。

(4)科学家通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠一人嵌合抗体基因，然后导入到鼠淋巴细胞中，这个过程中用到的工具酶有             、             ，改造抗体属于             工程的范畴。

为进行牛胚胎移植，可通过下列途径获得优良胚胎，请回答

(1)在途径①中，为一次性获得数目较多的胚胎，可对优良母牛注射       。体内受精一段时间后，可通过          操作收集早期胚胎用于移植；若进行体外受精，应使用培养到        的卵母细胞。