（1）从牛的组织获得单个细胞，通常需要用______________酶处理。

（2）将人血清蛋白基因导入牛的受精卵常用的方法是___________________。

（3）未受精的卵应培养到______期，将细胞核和去核卵细胞组装的技术称为___________，在该过程中要用____________使两细胞融合，构建重组胚胎。

（4）在胚胎发育过程中，____________将发育成转基因牛的各种组织，如果要求转基因牛大批量生产人血清蛋白，则要求获取组织的牛性别是_______。

绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示，请据图回答下列问题。

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程①表示________，获得的DNA必须在两侧添加________和终止子，还要添加________酶能识别切割的碱基序列。

(2)由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________。

(3)在过程⑤培养基中需要添加卡那霉素、植物必需的各种营养成分和植物激素，以保证受体细胞能培养成再生植株。其中过程⑤添加卡那霉素的作用是________。

(4)在个体水平的鉴定过程中，可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。

(1) 基因工程中运用的基因载体必需的元件有启动子、终止子、____、____等。 

(2) 过程②利用了“假病毒颗粒”具有____和能将DNA整合到受体细胞染色体DNA上特点。与正常病毒相比较,这种“假病毒颗粒”的主要特点是________

(3) 科学家利用ES细胞培育出转基因动物依据的主要原理是_________________,在利用合成培养基培养ES细胞时,还要加入______等天然成分。 

(4) 经鉴定,某嵌合小鼠产生的配子中有1/2带有外源基因,请写出利用该嵌合小鼠培育纯合转基因小鼠的思路:_________。 

(1)科学家在进行图中[①]操作时,要用______________________

分别切割运载体和目的基因,还要用__________将运载体和目的基因连接起来,形成___________________________。 

(2)经过[②]操作将目的基因导入________,然后经过组织培养形成抗虫棉植株,此过程体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是________、___________________________

我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）过程①必需用到的酶是___________________________________。  

（2）重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有启动子、终止子和_____________________才能构成一个完整的基因表达载体。

（3）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射促性腺激素的方法，做_________处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到________________________期即可通过显微操作将其细胞核去除。

（4）我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程运用了哪些现代生物技术_        _________________________________________________________。

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

（1）若要获得抗病基因，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。要获得含抗病基因的重组质粒可用_____和_______限制酶切割质粒。它们能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________________ 断开。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有________基因，作为标记基因。

（3）将重组DNA分子导入香蕉受体细胞的常用方法是________法。

（4）为了进一步确定抗病基因是否插入香蕉细胞染色体，可采用的检测方法是_______________。目的基因进入受体细胞后的表达过程中，RNA聚合酶需与______________识别和结合，从而驱动转录过程。

（5）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过____________________的方法，可培育成能表现新性状的植株，该方法依据的原理是：__________________________。

如图表示转基因马铃薯的培育过程，请回答相关问题：

（1）构建含抗原基因的表达载体时,需选择图中的_______________限制酶进行酶切。____（填“能”或“不能”）用SmaⅠ对含目的基因的DNA片段进行切割，因为____________________。 将多个目的基因、质粒、所需限制酶及DNA连接酶混合于试管中，只考虑两两连接和自身环化两种情况，最终能形成________种环状产物。

（2）如果用马铃薯发育的某个时期的mRNA反转录产生的__________片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做马铃薯的__________。

（3）重组质粒中，目的基因的两端还必须有__________和终止子。用含重组质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后，采用__________技术检测转基因马铃薯的__________上是否插入了目的基因，同时还要采用__________技术检测目的基因是否在转基因马铃薯细胞中表达。

（4）培育愈伤组织的固体培养基中，除了无机盐、有机营养物质、琼脂、卡那霉素外，还需添加的物质是__________，添加卡那霉素的作用是______________________。

  (1)核移植的受体细胞一般选用____________________________________细胞。进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出细胞核和__________。

  (2)细胞在体外培养时，除培养液提供必需的营养条件、适宜的温度和pH、气体环境外，还需要有无菌、无毒环境，为保证无菌、无毒环境，在培养液中通常要加入__________。此外，还应定期__________。以便清除代谢废物。

  (3)现有一段人工合成的正常胰岛素基因的脱氧核苷酸序列，可利用PCR技术扩增正常胰岛素基因，该技术的原理是______________。将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞通常采用________法。

  (4)“定向诱导”的本质是_____________________________________________________。

（1）哺乳动物的体外受精主要包括[a]_____、[b]______和受精等几个主要步骤。若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能，可给供体注射________，使其排出更多的卵子。

（2）通过过程c构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子，启动子是_______识别、结合位点。d过程常用的方法是_________。

（3）e过程的名称为_________，其实质是________________________。若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用胚胎分割技术，通常选择发育良好、形态正常的_________或桑椹胚。

科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答：

 ( 2 )也有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图。

①酶A是指________，酶B是指__________________________。

②图中Ⅰ表示________，对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是______________，Ⅲ所指的细胞具有的特点是_______________。