（1）从牛的组织获得单个细胞，通常需要用______________酶处理。

（2）将人血清蛋白基因导入牛的受精卵常用的方法是___________________。

（3）未受精的卵应培养到______期，将细胞核和去核卵细胞组装的技术称为___________，在该过程中要用____________使两细胞融合，构建重组胚胎。

（4）在胚胎发育过程中，____________将发育成转基因牛的各种组织，如果要求转基因牛大批量生产人血清蛋白，则要求获取组织的牛性别是_______。

绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示，请据图回答下列问题。

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程①表示________，获得的DNA必须在两侧添加________和终止子，还要添加________酶能识别切割的碱基序列。

(2)由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________。

(3)在过程⑤培养基中需要添加卡那霉素、植物必需的各种营养成分和植物激素，以保证受体细胞能培养成再生植株。其中过程⑤添加卡那霉素的作用是________。

(4)在个体水平的鉴定过程中，可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。

(1) 基因工程中运用的基因载体必需的元件有启动子、终止子、____、____等。 

(2) 过程②利用了“假病毒颗粒”具有____和能将DNA整合到受体细胞染色体DNA上特点。与正常病毒相比较,这种“假病毒颗粒”的主要特点是________

(3) 科学家利用ES细胞培育出转基因动物依据的主要原理是_________________,在利用合成培养基培养ES细胞时,还要加入______等天然成分。 

(4) 经鉴定,某嵌合小鼠产生的配子中有1/2带有外源基因,请写出利用该嵌合小鼠培育纯合转基因小鼠的思路:_________。 

(1)科学家在进行图中[①]操作时,要用______________________

分别切割运载体和目的基因,还要用__________将运载体和目的基因连接起来,形成___________________________。 

(2)经过[②]操作将目的基因导入________,然后经过组织培养形成抗虫棉植株,此过程体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是________、___________________________

我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）过程①必需用到的酶是___________________________________。  

（2）重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有启动子、终止子和_____________________才能构成一个完整的基因表达载体。

（3）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射促性腺激素的方法，做_________处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到________________________期即可通过显微操作将其细胞核去除。

（4）我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程运用了哪些现代生物技术_        _________________________________________________________。

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

（1）若要获得抗病基因，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。要获得含抗病基因的重组质粒可用_____和_______限制酶切割质粒。它们能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________________ 断开。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有________基因，作为标记基因。

（3）将重组DNA分子导入香蕉受体细胞的常用方法是________法。

（4）为了进一步确定抗病基因是否插入香蕉细胞染色体，可采用的检测方法是_______________。目的基因进入受体细胞后的表达过程中，RNA聚合酶需与______________识别和结合，从而驱动转录过程。

（5）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过____________________的方法，可培育成能表现新性状的植株，该方法依据的原理是：__________________________。

A、转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞)：

（1）图中①过程用到的酶是                 ,所形成的B叫做              。

（2）②过程常用        处理农杆菌,使之成为          细胞,此时利于完成转化过程。

（3）图中③过程需要用到的主要激素有                             ，而且配比不同。

（4）在分子水平上,可采用       的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。

B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。

（1）实验中，去除细胞壁需用到的酶主要有                和                  等。

（2）专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是                    。

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关，获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①是基因工程的核心，通过过程①构建的基因表达载体除了含有KIFⅡ基因外，还必须有启动子、     以及     等。

（2）过程②必需加入     酶，才能获得单个的成纤维细胞。

（3）在过程③中，为了获得更多的卵（母）细胞，需用   处理成年母绒山羊。

（4）在过程④进行之前，需对卵（母）细胞进行                处理。过程④称为              。

（5）过程⑤称为            ，进行该过程的最佳时期是              ，通过      技术可以实现同卵多胎。 过程⑤能够成功进行的生理基础是__________。

1型糖尿病患者的另一种治疗方法是可以通过注射胰岛素的方法来缓解病情。利用微生物基因工程技术发酵生产可以获得大量胰岛素。现有一种可以作为目的基因运载体的普通质粒，用不同的酶切割质粒如图2所示[ 1kb即1000个碱基对，*表示EcoRV限制酶切割的一个黏性末端（单链片段）]。请将Mbol酶和EcoRV酶在图3中标注其所在位置和切割的长度。

干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取0.5μg，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。

从人的淋巴细胞中获取出干扰素基因，此基因在基因工程中称为                   ，此过程需要用                         酶。

（2）此基因与细菌的质粒相结合要依靠                ，其作用部位是                   ，然后将此基因移植到酵母菌体内，酵母菌在基因工程中叫              。

（3）基因工程的核心是                            ，其组成上必须有                 、

                 、                      和                         。