知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．
如图表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的研究，请回答下列问题．

（1）a过程表示基因工程，则其核心步骤是 ______ ，该过程所使用的工具酶有 ______ ．
（2）将基因表达载体导入ES细胞的方法是 ______ ，为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA，可采用 ______ 技术．
（3）b过程可以获得更多的ES细胞，其采用的技术属于细胞工程中的 ______ 技术．
（4）完成c、d过程的胚胎工程技术分别是 ______ 、 ______ ．若要培养试管动物，除以上两种技术外，还需要运用 ______ 技术．试管动物的生殖方式属于 ______ ．
（5）用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物 ______ ，该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞．

难度：较易

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2．
基因工程靶向细胞疗法是细胞治疗和基因工程相结合的前沿生物疗法．治疗过程中先提取患者的免疫细胞，将特定靶向基因导入后，再对其进行扩增并诱导成效应细胞，最后回输至患者体内，以实现对被病毒感染细胞的特异性和主动性杀灭．回答下列问题：
（1）靶向基因需利用质粒、噬菌体衍生物或 ______ 作为载体才能导入免疫细胞，迄今为止，最为有效的导入方法是 ______ ．
（2）成功导入靶向基因后可利用 ______ 技术对免疫细胞进行扩增，该过程中首先要对培养液和用具进行
______ 处理．扩增细胞通常应在10代以内，以保持细胞正常的 ______ ．
（3）用该方法治疗病毒引起的疾病时，靶向基因表达产物的作用是 ______ ．
（4）回输的免疫细胞通过 ______ （填“体液免疫”或“细胞免疫”）清除感染的细胞．因回输的免疫细胞来自患者自身，可避免发生 ______ ．

难度：较易

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3．
如图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞（MEF细胞）的示意图，图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞（ES细胞）的示意图．
（1）图一所示，制备细胞悬液时，常用 ______ 酶来消化剪碎的组织块．配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加 ______ 等一些天然成分．当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象称为细胞的 ______ ．
（2）ES细胞是由 ______ 中分离出来的一类细胞，ES细胞在功能上具有发育的 ______ ．
（3）MEF细胞能够分泌某些蛋白质，该蛋白质是通过 ______ 方式分泌到细胞外．在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞的作用是 ______ ．
（4）在治疗性克隆过程中，细胞核取自患者细胞，这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生 ______ 反应．

难度：较易

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4．
请回答与动物细胞培养基胚胎工程有关的问题：
（1）欲获得牛的单个体细胞，需用 ______ 处理动物组织，在体外培养时，通常需在培养液中添加 ______ 等天然成分．
（2）获取的卵子需培养到 ______ 时期才能用于核移植，通过核移植获得的动物称为 ______ ．
（3）在胚胎分割技术中，需将牛囊胚的 ______ 均分，可利用囊胚的 ______ 细胞进行性别鉴定．
（4）ES细胞在 ______ 上或含有抑制因子的培养基上培养时，不会发生分化；可用ES细胞分化出人造器官用于器官移植，优点是 ______ ．

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5．
科学家通过转人四种基因，可使体细胞形成诱导性多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞具有胚胎干细胞的类似功能，但并不能发育成胚胎．我国科学家利用iPS细胞在世界上第一次获得完全由iPS细胞制备的活体小鼠--“小小”（流程见图）．

（1）过程①从亲代鼠体内获得皮肤细胞后，对其进行的初次培养称为 ______ ，科学家向经培养的细胞导入四种基因（过程②），使其形成诱导性多能干细胞（iPS细胞）．但基因导人受体细胞没有采用显微注射的方法，你认为最可能采用的方法是用 ______ 引入．
（2）iPS细胞在体外已成功地被分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，这说明iPS细胞在功能上具有 ______ ．科学家设想在不久的将来人们可通过向人体移植iPS细胞使功能出现异常、损伤或退化的器官得以修复，它的优点是可避免器官移植后的 ______ 问题．
（3）我国科学家通过将iPS细胞注人四倍体囊胚再经④过程 ______ 技术移入代孕母鼠的子宫内继续发育，最终获得克隆鼠及其后代．诱导二倍体细胞融合形成四倍体细胞的方法有 ______ 等．移入的胚胎能够在受体子宫内存活发育是因为供体胚胎可与受体子宫建立 ______ 联系．

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6．
华蟾素注射液是将蟾蜍的全皮阴干后，提炼而成的中药复方制剂，是我国经典抗肿瘤药物．研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，进行了一系列实验．请根据题中信息回答下列问题．

Ⅰ．肝癌HepG-2细胞的培养：
（1）培养肝癌HepG-2细胞时，在培养基中加入适量的 ______ 以补充合成培养基中缺乏的物质，为防止培养过程发生污染要加入 ______ ．此外，每48h更换1次培养液，目的是 ______ ．同时还要提供适宜的温度、 ______ 、氧气和二氧化碳等环境条件．
Ⅱ．探究华蟾素药效作用机理的实验：
（2）用不同浓度的华蟾素注射液分别处理HepG-2细胞12h、24h和48h，测定华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的影响，结果如下图．图1由图甲可知，华蟾素能有效地 ______ 肝癌HepG-2细胞增殖，且与 ______ 呈正相关．图乙的结果进一步表明，华蟾素对肝癌HepG-2细胞增殖的影响体现在 ______ ．
（3）DNA拓扑异构酶Ⅱ（简称TopoⅡ）为真核生物所必需，在DNA复制、转录、重组及形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩等方面发挥重要作用，TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞．华蟾素注射液处理HepG-2细胞48h后，采用RT-PCR技术检测TopoⅡ基因的表达情况，结果如图丙．
①RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应．其主要原理是：提取HepG-2细胞中的总RNA，以一段 ______ 作为引物，在 ______ 酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板进行 ______ ．
②由图丙可知，华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是 ______ ．

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7．
我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因．请回答：
（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理 ______ ，并用 ______ 酶使两者结合．将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞．
（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有 ______ 现象，需要定期使用 ______ 酶处理，以便于分瓶培养．
（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不需采用的是 ______ ．
A．取单个细胞进行培养 B．加入胰岛素
C．二氧化碳培养箱 D．加入动物血清
（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品．在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是 ______ ．

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8．
某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性．供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞．请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量 ______ ．细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是 ______ ．
（2）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长 ______ ．若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用 ______ 消化处理．
（3）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 ______ ．
（4）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入 ______ ，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 ______ 合成水平的差异，确定Y的药效．

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9．
随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化．如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回答下列问题：

（1）应用1中获得的良种小牛，细胞核遗传物质来源于 ______ 个体，性别为 ______ ．
（2）在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其 ______ ，得到的卵母细胞需要发育至 ______ 时期才能受精．
（3）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题；对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将 ______ 均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．之后的胚胎移植要保证成功，需对供、受体母畜注射相关激素进行 ______ ，移植时要选择发育良好，形态正常的 ______ 胚．
（4）应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官．在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还要加入 ______ ；向培养液中通入95%空气和5%二氧化碳，空气中的氧气参与细胞的代谢，二氧化碳可以维持培养基的 ______ ．

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10．
染色体的断裂片段在有丝分裂时不能进入子细胞核中，而在细胞溶胶中形成圆形结构，称为微核．通过染色可观察到微核，常用含微核的细胞数占观察细胞总数的比例（微核率）来检测有毒物质对细胞的危害程度．某研究小组应用微核检测技术探究不同浓度的氯苯对人类细胞的危害程度．请根据以下提供的实验材料与用具，补充完成实验思路及其它小题．
材料和用具：人成纤维细胞悬浮液、培养液、0.1mg/L氯苯溶液、染色液、显微镜、细胞培养瓶、二氧化碳培养箱等．（染色和制作装片的具体方法不作要求）
（1）实验步骤：
①配制 ______ ，分别等量加入到细胞培养瓶中，另设一只培养瓶不加氯苯化合物，并编号；
②向各培养瓶中加入 ______ ；
③取各培养瓶中培养液， ______ ．
（2）绘制一个用于呈现实验数据的坐标系，并画出最可能的实验结果．
______ ．
（3）检测微核时可用 ______ 溶液作染色剂．

难度：较易

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