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            • 1. 在动物细胞培养过程中,使用胰蛋白酶的目的是(  )
              A.使动物组织分散为单个细胞进行培养
              B.去掉细胞壁成为原生质体
              C.去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合
              D.促进蛋白质水解为多肽
            • 2. 科学家通过转人四种基因,可使体细胞形成诱导性多能干细胞(iPS细胞),iPS细胞具有胚胎干细胞的类似功能,但并不能发育成胚胎.我国科学家利用iPS细胞在世界上第一次获得完全由iPS细胞制备的活体小鼠--“小小”(流程见图).

              (1)过程①从亲代鼠体内获得皮肤细胞后,对其进行的初次培养称为 ______ ,科学家向经培养的细胞导入四种基因(过程②),使其形成诱导性多能干细胞(iPS细胞).但基因导人受体细胞没有采用显微注射的方法,你认为最可能采用的方法是用 ______ 引入.
              (2)iPS细胞在体外已成功地被分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等,这说明iPS细胞在功能上具有 ______ .科学家设想在不久的将来人们可通过向人体移植iPS细胞使功能出现异常、损伤或退化的器官得以修复,它的优点是可避免器官移植后的 ______ 问题.
              (3)我国科学家通过将iPS细胞注人四倍体囊胚再经④过程 ______ 技术移入代孕母鼠的子宫内继续发育,最终获得克隆鼠及其后代.诱导二倍体细胞融合形成四倍体细胞的方法有 ______ 等.移入的胚胎能够在受体子宫内存活发育是因为供体胚胎可与受体子宫建立 ______ 联系.
            • 3. 基因工程靶向细胞疗法是细胞治疗和基因工程相结合的前沿生物疗法.治疗过程中先提取患者的免疫细胞,将特定靶向基因导入后,再对其进行扩增并诱导成效应细胞,最后回输至患者体内,以实现对被病毒感染细胞的特异性和主动性杀灭.回答下列问题:
              (1)靶向基因需利用质粒、噬菌体衍生物或 ______ 作为载体才能导入免疫细胞,迄今为止,最为有效的导入方法是 ______
              (2)成功导入靶向基因后可利用 ______ 技术对免疫细胞进行扩增,该过程中首先要对培养液和用具进行
              ______ 处理.扩增细胞通常应在10代以内,以保持细胞正常的 ______
              (3)用该方法治疗病毒引起的疾病时,靶向基因表达产物的作用是 ______
              (4)回输的免疫细胞通过 ______ (填“体液免疫”或“细胞免疫”)清除感染的细胞.因回输的免疫细胞来自患者自身,可避免发生 ______
            • 4. 近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势.狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消灭狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据.我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果.
              请根据上述材料,回答下列问题:
              (1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病,制成减毒活疫苗需要用 ______ 培养.
              (2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备.在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是 ______
              (3)如图所示是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              ①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是 ______ 细胞,该细胞能够产生 ______ .从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是 ______
              ②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的 ______ 、聚乙二醇或电激等诱导.
              (4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有 ______
            • 5. 如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:
              (1)OA段的培养称为 ______ 培养,AB段可能发生了 ______ 现象,需要用 ______ 酶处理,以使组织细胞分散开来.
              (2)动物细胞培养过程中,为维持培养液的pH,通常在培养液中通入一定浓度的 ______
              (3)培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集,并在体外培养到 ______ 期.
              (4)目前使用的或冷冻保存的细胞通常为 ______ 代以内,以保持细胞正常的二倍体核型.
            • 6. 关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度,下列表述正确的是(  )
              A.乳腺癌细胞易于乳腺细胞,胚胎细胞易于脂肪细胞
              B.乳腺细胞易于乳腺癌细胞,胚胎细胞易于脂肪细胞
              C.乳腺细胞易于乳腺癌细胞,脂肪细胞易于胚胎细胞
              D.乳腺癌细胞易于乳腺细胞,脂肪细胞易于胚胎细胞
            • 7. 一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件(  )
              ①无毒的环境        ②无菌的环境       ③合成培养基需加血浆 
              ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2,不需要CO2 ⑥需要CO2
              A.①②③④⑤⑥
              B.①②③④
              C.①③④⑤⑥
              D.①②③④⑥
            • 8. 某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养,下列叙述正确的是(  )
              A.制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理
              B.肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸
              C.为了防止培养过程中杂菌的污染,可向培养液中加入适量的干扰素
              D.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中,乙会出现停止增殖的现象
            • 9. 人们日益关注食品安全.一种保鲜剂--青鲜素.能抑制植物细胞生长与分裂,从而抑制发芽,被用于蔬菜和水果的保鲜,但其残留物会损害人体健康.据材料回答问题:
              (1)青鲜素的作用与 ______ (一种植物激素)的作用最为相似.
              (2)青鲜素残留物可能会使人体细胞中的 ______ 发主突变,导致正常细胞生长和分裂失控而变成癌细胞.
              (3)科研人员以小鼠为实验材料,用“动物细胞培养技术”对青鲜素毒性进行了检测.
              ①请完善检测青鲜素毒性的实验:主要实验步骤:
              第一步:取大小相同的六只培养瓶编号为l~6,分别加入等量的相同培养液和小鼠细胞.
              第二步:向1号培养瓶中加入适量的生理盐水,向2~6号培养瓶中分别加入 ______
              第三步:培养一段时间后,取样制成临时装片,用显微镜观察、计数,计算出 ______ ,记录结果如表:
              培养瓶编号 1 2 3 4 5 6
              青鲜素浓度(mg/L) 0 10 30 90 270 810
              变异细胞比例 0 0
              实验结论: ______
              ②培养前,所取小鼠组织需用 ______ 处理,制成细胞悬液;培养时,需向培养液中通
              入5%的C02,其目的是 ______ ;为提供全面的营养,培养液中常常还需要加入 ______
            • 10. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

              (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为 ______ ,培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为 ______
              (2)图中2-细胞胚胎可用 ______ 方法从灰鼠输卵管内获得,也可从灰鼠体内取出卵子,通过 ______ 后进行早期胚胎培养获得.
              (3)图中重组囊胚通过 ______ 技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用 ______ 方法保存.
              (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的 ______ 分离培养获得,iPS与ES细胞同样具有 ______ 特性,有望在对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的细胞治疗.
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