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人的血清白蛋白在临床上需求量很大,通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其过程大致如下图:
![](https://www.ebk.net.cn/tikuimages/7/2018/600/shoutiniao93/ac81c1a7005ef01dfbabb0e38ba43e9a.png)
(1)基因工程的核心步骤是______________。用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得抗冻蛋白基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有__________________酶的酶切位点。
(2)获得人体血清白蛋白基因后可以利用________技术进行扩增,该技术要用到一种特殊的_______酶。含血清白蛋白基因的表达载体一般利用____ 技术导入“奶牛胚胎”细胞中。当受精卵分裂到囊胚期时,需要取囊胚的________细胞做DNA分析,进行性别鉴定,以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。
(3)从实验开始到获得细胞②利用的技术是___ _,图中卵母细胞是处于______期。
(4)运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞(ES细胞)进行培养,在培养过程中,必须用________处理内细胞团,使之分散成单个细胞。
(5)在培养过程中,培养箱内CO2的作用是______________。为防止杂菌污染,可在培养基中添加____________。
(6)若检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体上,一般采用_______技术,若检测是否产生血清白蛋白,一般采用______________方法检测杂交带。