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          50条信息

            • 1.
              制备单克隆抗体的过程中,需筛选出杂交瘤细胞.一般情况下,细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径,而骨髓瘤细胞没有此辅助途径,DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断,利用这一特性可以筛选出杂交瘤细胞.
              (1)制备单克隆抗体时,选用B淋巴细胞的原因是 ______ ,选用骨髓瘤细胞的原因是 ______ .研究发现,被激活的B淋巴细胞内含有发达的粗面内质网,这与 ______ 的功能相适应.
              (2)加入适量氨基碟呤的培养基称为 ______  培养基,氨基喋呤的作用主要是为了淘汰 ______ 细胞.
              (3)诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合常用的化学试剂是 ______ .对杂交瘤细胞进行体外培养需要适CO2,CO2的作用是 ______ .
            • 2.
              如图1为生产HIV单克隆抗体的过程,图2为运用基因工程技术生产HIV疫苗的操作简要路径。据图分析回答。

              (1)图1中,过程①称为 ______ 技术,过程②融合实验完成后得到的杂交瘤细胞所产生的抗体的优点是 ______ 。
              (2)图2中,过程①需要用到 ______ 酶。一个DNA片段进行扩增最简便的方法是使用PCR技术,如果这个过程中消耗了引物62个,则进行了 ______ 轮的DNA复制。
              (3)若将重组质粒导入小鼠受精卵细胞中,通常应采取 ______ 技术。
              (4)用限制酶处理DNA片段,可使特定核苷酸序列特定部位的键断开。若用X、Y两种限制酶作用于图2中的DNA片段,并进行电泳分析,其结果如图3.A至D选项中,关于两种酶切位置的判断,正确的是 ______ 。
            • 3.
              人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,人工制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。回答下列问题。
              (1)制备单克隆抗体过程中要用到 ______ 和 ______ 技术。制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于 ______ ,使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。
              (2)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理,向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤 ______ (填“能”或“不能”)能筛选杂交瘤细胞,原因是 ______ 。
              (3)筛选获得的杂交瘤细胞具有 ______ 的特点。利用杂交瘤细胞生产的单克隆抗体可以与 ______ 特异性结合,从而诊断早孕。
            • 4.
              请回答下列与生物工程有关的问题:
              (1)基因工程中获得目的基因后,利用PCR技术将该基因扩增,前提是要有 ______ 序列,以便根据这一序列合成 ______ ,我国科学家独创了一种将目的基因导入受体细胞方法研究成功了转基因抗虫棉,该方法是 ______ 。
              (2)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体具有很多优点,单克隆抗体的制备过程主要应用了 ______ 技术。
              (3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是 ______ 。
              (4)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成无废弃物农业,这主要遵循了生态工程的 ______  原理,系统各组分间要有适当的比例关系,并且实现“1+1>2”的效果,体现了生态工程的 ______  原理。
            • 5.
              已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.

              请回答:
              (1)①代表的是______过程.为获得A基因表达载体,需用______酶对A基因和运载体进行切割.将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是______.
              (2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是______,加入引物的作用是______.
              (3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制______等条件.
              (4)过程③采用的技术是______,获得的X叫______ 细胞.
            • 6.
              抗体的结构如图所示它有两条H链和两条L链组成。同一物种C区氨基酸序列恒定,不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异。
              (1)在生物体内,抗体是由 ______ 细胞分泌的,该细胞可以来自于 ______ 增殖分化。
              (2)传统方法获取抗体时,需要将相应的抗原反复注射到动物体内,从动物的 ______ 中分离抗体。显然,这种方法产生的抗体产量和纯度等都很低,特异性差,单克隆抗体的出现,克服了传统抗体的不足,单克隆抗体是指 ______ 。
              (3)天然的抗体左右两个V区结构完全相同,只能结合相同的抗原。通过一定技术手段可以得到双功能抗体(又叫双特异性抗体),它的两个V区能结合不同的抗原。制备双功能抗体的基本方法如下:将能分泌抗体1的杂交瘤细胞(A细胞)与能分泌抗体2的淋巴细胞(B细胞)进行融合,形成可分泌两种亲代抗体和杂种抗体的杂种一杂交瘤细胞(A-B)。细胞融合时需要用 ______ 、 ______ 或电刺激等方法诱导,融合后总共应该有 ______ 细胞(最多考虑两两融合),用A、B字母表示出这些细胞组合 ______ 。
              (4)双功能抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”:用其中一个V区识别癌细胞表面 ______ ,用另一个V区将T细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在的位置,这里,T细胞对癌细胞的攻击属于 ______ 免疫。
              (5)细胞融合方法得到的双功能抗体,只是将两个不同抗体的V区集中到了一个抗体上,人们无法改变V区的结构。通过 ______ 技术,可以对双功能抗体的V区进行设计改造,使其更适合人类的需要。这种改造,最终还必须通过对 ______ 分子的改造来完成。
            • 7.
              请回答下列与基因工程、胚胎工程、生态工程有关的生物学问题:
              (1)基因工程技术中获得目的基因后,利用PCR技术将该基因扩增,前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成______.培育抗病转基因植物时,使用最多的抗病基因是______基因和病毒复制酶基因.
              (2)在胚胎工程中,早期胚胎发育到______阶段即可移植到代孕母体子宫中,移植后的胚胎能在受体了宫内存活的生理基础是______.
              (3)与传统方生成的抗体相比,单克隆抗体具有很多优点.在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或______相结合,制成“生物导弹”,借助单克隆抗体的______作用,将药物带到癌细胞位置,将其在原位杀死.单克隆抗体的制备过程应用了______技术.
              (4)我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种植灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”.其失败的原因主要是违背了______原理.
            • 8. 利用细胞工程技术制备抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体,其主要流程如下:

              回答下列问题:
              (1)制备抗HCG单克隆抗体过程中,用到的动物细胞工程技术有 ______ ______
              (2)细胞DNA合成有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断.在HAT培养中加入了氨基嘌呤,杂交瘤细胞能连续增殖,未融合细胞以及同种融合细胞因不能增殖而死亡.由此可判断骨髓瘤细胞DNA合成存在 ______ (填“D”、“S”或“D和S”)途径.
              (3)步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测,该过程一般在多孔细胞培养板上进行.先将细胞悬浮液稀释到7-10个细胞/ml,再在每个培养孔中滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是 ______
              (4)用抗HCG单克隆抗体作出诊断试剂,能在妊娠初期即可作出诊断,主要是因为该抗体具有 ______ 的优点.
            • 9. 请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题.
              (1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂 ______ 作介导,使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的 ______ 培养,获得纯系细胞,同时还要进行 ______ 检验,以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞.
              (2)获得杂交瘤细胞后,在体外培养时需要特别加入的天然成分是 ______
              (3)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述,正确的是 ______
              A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长
              C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物
              (4)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体,科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞,该技术的核心步骤是 ______ ,噬菌体是这些关键基因的 ______
            • 10.
              艾滋病病毒(HIV)外壳的包膜上有多种蛋白质,其中包膜糖蛋白(env)基因编码gpl60蛋白,进一步加工成gpl20蛋白,具有较强的抗原性.制备抗HIV gpl20的单克隆抗体,为艾滋病的治疗带来希望.请回答下列问题:
              (1)若利用动物细胞工程制备抗HIV gpl20的单克隆抗体,涉及到的技术手段主要有 ______ .
              (2)细胞融合常用的生物诱导剂是 ______ .融合后需要用特定的选择性培养基筛选,只有融合的 ______ 才能生长,这种细胞的特点是 ______ .
              (3)若要大量制备该单克隆抗体,可将筛选出来的细胞进行体外培养,在培养液中通入一定浓度的CO2,主要作用是 ______ .
              (4)科研人员设想用基因工程制备能表达抗HIV pl20抗体的重组细胞,获得目的基因可利用PCR技术扩增,需要在反应体系中添加的有机物有 ______ 、Taq酶和4种脱氧核苷酸.利用 ______ 法将目的基因导入骨髓瘤细胞.基因工程的核心是 ______ .
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