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            • 1. “生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼,由单克隆抗体与药物配合而成。单克隆抗体能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如下图所示,分析回答下列问题:
              (1)制备特异性的单克隆抗体,首先要对小鼠注射特定______。
              (2)从单克隆抗体制备过程可以看出,它运用了______(至少两种)等细胞工程技术。
              (3)诱导融合的方法与植物体细胞杂交相比特有的是用______诱导融合,若只考虑细胞的两两融合,理论上融合的细胞有______种类型,符合要求细胞的特点是______。
              (4)体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要区别是前者要用______(固体或液体)培养基,从培养基的成分来看,前者培养基中由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,还需要加入______。
              (5)特异性抗体也可以通过常规方法来制备:向动物反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比,单克隆抗体具有______等优点(答出三点即可)。
            • 2. 资料显示,中国每年约有13万新增宫颈癌病例,占全球新发病例的三分之一,其中约有8万女性去世。宫颈癌也是中国15岁至44岁女性中的第二大高发癌症。人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答下列问题:

              (1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______。
              (2)对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液______ mL,使每个孔内细胞一般不多于一个,达到单克隆培养的目的。
              (3)由上述过程生产出的单克隆抗体一般不能直接用于人体,理由是______。
              (4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路。______。
              (5)利用蛋白质工程技术对抗HPV抗体进行改造以延长其体外保存的时间,其基本途径是从______出发,设计______,进一步推测应有的氨基酸序列,进而确定对应的脱氧核苷酸序列,据此获得相应基因。
            • 3.

              1975年,英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的实验方案:把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合,得到的融合细胞就能大量增殖,产生足够数量的特定抗体。请回答下列问题:

              (1)从动物体内取出的组织块,需用________处理一段时间,这样组织就会分散成单个细胞。当细胞________(填“原代”或“传代”)培养至10~50代左右时,部分细胞的细胞核型可能发生变化,从而获得骨髓瘤细胞。在动物细胞培养基中加入血清、血浆等天然成分的原因是________。

              (2)制备单克隆抗体时,先用特定的选择性培养基进行筛选,获得________细胞,然后对上述细胞进行抗体检测,选取________的细胞克隆化培养;最终获得单克隆抗体。

              (3)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,其过程是取经特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核,移植到去核的________细胞中,构成重组细胞。此方法________(填“能”或“不能”)获得既能分泌抗体,又能无限增殖的细胞,原因是________。

            • 4.

              如下图所示,请据图回答下面的问题。

              (1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞,两种细胞膜也能“融合”在一起,说明细胞膜_______________。此过程,常用______________作为诱导剂,该细胞的特点是_____________________。

              (2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖,鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。请设计一种方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出杂交瘤细胞。

              方法:_______________________________________________________________。

              (3)杂交瘤细胞繁殖进行的是_________________分裂,其遗传性状_______________________。

              (4)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同?

              _____________________________________、__________________________________________。

              (5)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合,而绝不攻击任何正常细胞,故称为“生物导弹”,这是利用了_____________________________________。

            • 5.

              近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势。狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消灭狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。

              请根据上述材料,回答下列问题:

              (1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病,制成减毒活疫苗需要用________培养。

              (2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是______________________________________________。

              (3)下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              ①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是________细胞,该细胞能够产生________。从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是________。

              ②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的________、聚乙二醇或电激等诱导。

              ③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有________________________________________等优点。

              (4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有_________________________。

              (5)单克隆抗体的制备还有哪些用途?_______________________________________。

            • 6. 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
              (1)基因疫苗指的是DNA疫苗,要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA______要大量获得表达特异抗原的基因,可采用PCR技术进行扩增.
              (2)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有______.为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的______,才能驱动转录过程.这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为______.
              (3)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的囊胚或______进行操作.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将______.转基因牛是否培育成功,可以通过______技术从分子水平进行检测.
              (4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的______与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是______,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
            • 7.

              “生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼,由单克隆抗体与药物配合而成。单克隆抗体能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如下图所示,分析回答下列问题:



              (1)图中A过程是从小鼠的脾脏中取得____细胞,提取该细胞之前,给小鼠注射的特定物质相当于______;B过程得到的杂交瘤细胞的特点是__________________。

              (2)体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要区别是前者要用____,从培养基的成分来看,前者培养基中除了添加必要的营养物质外还需要加入含天然成分的____________。

              (3)特异性抗体也可以通过常规方法来制备:向动物反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比,单克隆抗体具有____________________________等优点(答出三点即可)。制备单克隆抗体的过程中至少需要____次对细胞的筛选。

            • 8.

              单纯疱疹病毒1型(HSV-1)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。请回答下列问题:

              (1)在制备抗HSV-1的单克隆抗体过程中,研究人员先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗________的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了________反应(填免疫类型),再从小鼠的脾脏中获取________,将该细胞与小鼠的________细胞融合,经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞具有的特点是________。

              (2)若要制备大量抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的________中使其增殖,再从________中提取、纯化获得。

              (3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-1蛋白,其原因是该抗体具有________和________等特性。

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