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            • 1. EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物。其过程如下:

              请回答下列问题:

              (1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到________,再通过PCR技术获得大量EPO基因。

              (2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射________激素以排出更多的卵子,培养到________期,与获能的精子相遇时,精子首先发生________反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。

              (3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中______能驱动基因的转录。

              (4)采用________技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及________等物质。

              (5)当胚胎发育至________时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将________均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。

              (6)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成无废弃物农业,这主要遵循了生态工程________的原理。我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种植灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了____________原理。

            • 2.

              (1)ES细胞能分化出成体动物的所有组织和器官,这体现了ES细胞的_____________。为获得适合人体移植的猪器官,减弱或消除排斥反应,可对ES细胞进行___________。

              (2)—个ES细胞变成ES细胞群的过程中,细胞_________(填“可能”、“不可能”)出现接触抑制现象。下列关于动物细胞培养和核移植的叙述,正确的是__________。

              A.从原代培养物或细胞系中选择和纯化无法获得细胞株

              B.动物细胞培养基中添加胰岛素的目的是调节血糖浓度

              C.胚胎干细胞培养时,加滋养层是为了抑制胚胎干细胞分化

              D.核移植形成的重组细胞在初次分裂时核基因不转录

              (3)为获得含兔褐毛基因的转基因小鼠,可将褐毛基因通过_________法导入ES细胞核中,再将该核移植到去核的卵细胞中,经过_____________、胚胎培养、胚胎移植,最终由代孕母鼠产下克隆小鼠。

              (4)为获得大量的上述克隆小鼠,可用转基因的小鼠胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行__________培养,理论上可获得无限个转基因小鼠。

            • 3. [选修模块3:现代生物科技专题]
              请回答胚胎工程和基因工程方面的问题:
              (1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”.试管牛的培育需经过体外受精、 ______ 、 ______ 以及在母体中发育和产出等过程.
              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其 ______ .另外,培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和 ______ .
              (3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞,采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞,常使用的激素是 ______ .
              (4)利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状.基因工程的四个基本操作步骤是 ______ 、基因表达载体的构建、 ______ 和 ______ .若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因启动子、 ______ 、 ______ 、 ______ 和复制原点等.将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是 ______ (显微注射法、农杆菌转化法),为获得能大量产生人干扰素的转基因牛,该基因表达载体应导入的受体细胞是 ______ (受精卵、乳腺细胞).
            • 4.

              克隆羊的成功轰动世界,它不仅奠定了疾病克隆性治疗的基础又解决了器官移植中供体不足的问题,同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题.下图为人类对克隆羊技术的拓展图和应用。请据图回答问题。

              (1)图中所涉及的现代生物技术有__________________________________                 等。

              (2)下列有关胚胎移植的叙述正确的有(多选)(    )

               A.冲卵指的是从子宫中冲出胚胎,而非冲出卵子

               B.只有供、受体生理环境高度一致,移入受体的胚胎才能被接受,并继续发育

               C.供体和受体要进行免疫检查,防止发生免疫排斥反应

               D.不同动物其胚胎移植的时间不同,人的胚胎移植最好在四细胞阶段进行

              (3)图中两个婴儿长大后,外貌、性格和其他特征与原型男人相同,这说明__________具有全能性。

              (4)使用培养基进行胚胎干细胞培养时,通常要加入___________________等天然成分,除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中,还需要保证细胞生活所需的____________等 ;早期胚胎发育在___________阶段以前的细胞是全能细胞。

              (5)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,必须用_____________处理内细胞团,使之分散成单个细胞。干细胞形成组织、器官时必须要进行细胞的分裂和分化。

              (6)在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官?为什么?________________________。

            • 5.

              控制哺乳动物的性别对于畜牧业生产有着十分重要的意义.目前,分离精子技术是有效的性别控制方法.例如:牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右,利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来,再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛(如图所示).根据以上信息回答下列相关问题:


              (1)图中过程①是通常采用的                技术,在这个过程中刚刚获取的精子必须经过       处理才能与卵细胞结合形成受精卵,为获得更多的卵细胞需要给良种母牛注射适宜剂量的          

              (2)过程②中,受精卵培养发育至       时期,再经           到代孕母牛,从而获得后代.若希望同时获得多个性状相同的个体,可以使用             技术.

              (3)动物“生物反应器”是转基因动物技术中最诱人的部分之一,在利用该技术培育转入牛长激素基因奶牛过程中,常选用的受体细胞是                   ,导入目的基因常用的方法是               

            • 6. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 ______ (结构).
              (2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的 ______ 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
              (3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
            • 7.
              Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 ______ (结构).
              (2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的 ______ 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
              (3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
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