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            • 1.
              如图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的研究,请回答下列问题.

              (1)a过程表示基因工程,则其核心步骤是 ______ ,该过程所使用的工具酶有 ______ .
              (2)将基因表达载体导入ES细胞的方法是 ______ ,为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA,可采用 ______ 技术.
              (3)b过程可以获得更多的ES细胞,其采用的技术属于细胞工程中的 ______ 技术.
              (4)完成c、d过程的胚胎工程技术分别是 ______ 、 ______ .若要培养试管动物,除以上两种技术外,还需要运用 ______ 技术.试管动物的生殖方式属于 ______ .
              (5)用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞,再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物 ______ ,该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”,从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞.
            • 2. 胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法.利用小鼠再生胰腺提取物(RPE)可定向诱导人
              羊膜间充质干细胞(hAMSCs)分化成胰岛B细胞.回答问题:
              (1)取人羊膜组织刮除血块的上皮细胞,冲洗后剪碎,然后用______处理,最终制成hAMSCs悬液,将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养,当细胞帖壁生长到一定阶段时,出现______现象,此时细胞停止分裂增殖,这时需要将细胞进行相关处理,然后进行传代培养.
              (2)取传至第3带的hAMSCs放入细胞培养板,同时加入RPE进行诱导分化培养.该代hAMSCs能保持细胞正常的______.诱导分化培养15天后,提取细胞______,用胰岛素基因探针进行分子杂交,可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞.
              (3)hAMSCs细胞在RPE作用下,可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的细胞,其根本原因是______.培养hAMSCs细胞的培养液中营养成分包括______(至少写两种)
              (4)人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和免疫排斥,目前临床通过使用______抑制T细胞的增殖来提高器官移植的成活率.
            • 3.
              胚胎工程许多技术,实际是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作.请根据动物受精和早期胚胎发育过程回答下列问题:
              (1)在动物体内卵子的发生过程中,减数第一次分裂完成的时间是在雌性个体排卵前后,当次级卵母细胞发育到 ______ 期时才具备与精子受精的能力,受精的场所是输卵管,判断卵子是否受精的重要标志是 ______ .
              (2)受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和 ______ .
              (3)胚胎发育过程首先是卵裂,所得每个子细胞的体积比受精卵小,胚胎发育到 ______ 期会导致透明带破裂,胚胎从中伸展出来,这一过程叫做孵化.
              (4)胚胎干细胞是由 ______ 中分离出来的一类细胞,在人类疾病治疗和科学研究中有着广泛的应用.
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