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            • 1. 在治疗人类某些疾病时,人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的组织器官后,可用于组织器官的移植,操作流程如图所示.请回答下列问题:
              (1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的 ______ 或胎儿的 ______ 中分离得到的一类细胞.
              (2)进行图中过程①时,需将体内取出的卵母细胞在体外培养至 ______ 期,该期卵母细胞核的位置靠近第一极体,可用微型吸管将之与细胞核一并吸出.由于能保持正常的二倍体核型,供体细胞一般都选用 ______ 的细胞.
              (3)过程②要向培养液中通入一定量的氧气和二氧化碳,二氧化碳的作用是 ______ ,为防止杂菌污染,动物细胞培养液中要加入一定的 ______
              (4)图中过程③④表示从囊胚中取出细胞.将其培养在 ______ 细胞上能维持不分化的状态,形成大量胚胎干细胞.图中过程⑤在培养液中加入 ______ ,就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化,用于患者的组织器官移植.
            • 2. 角膜缘干细胞能更新角膜上皮细胞,角膜上皮细胞对维持角膜的透明性至关重要.回答下列问题:
              (1)将角膜缘组织剪碎,加入 ______ 处理,可获得大量游离分散的细胞.细胞悬液在培养瓶中培养,当贴壁生长的细胞发生 ______ 现象时停止增殖.
              (2)通常角膜缘干细胞的培养控制在10代以内,原因是 ______
              (3)离体培养角膜缘干细胞时,一般需要在合成培养基中加入 ______ 等天然成分,培养时所需的气体主要有 ______
              (4)研究发现,细胞因子能够调控角膜缘干细胞分化.放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的功能进而抑制细胞因子的调控,由此推断该抑制过程发生在 ______ (选填“复制”、“转录”或“翻译”)水平.
              (5)研究还发现,皮肤干细胞可以诱导分化为角膜缘干细胞,这体现了皮肤干细胞具有 ______ .临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官,从而解决了 ______ 问题.
            • 3. 干扰素是治疗癌症的重要药物,它必须从血中提取,每升人血只能提取0.5ug,所以价格昂贵.现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素.试回答相关问题.

              (1)若要使获得的转基因牛乳汁中含有人干扰素,构建的表达载体必须包括:乳腺蛋白基因启动子、 ______ 、终止子、标记基因和复制原点等.将表达载体导入受精卵最有效的方法是 ______
              (2)通常情况下,对供体和受体母牛选择后,要用激素进行 ______ .并用激素对供体母牛做 ______ 处理.
              (3)为了实现干扰素的批量生产,早期胚胎进行移植之前要进行质量检测,并要求早期胚胎细胞中的性染色体组成为 ______ .选择发育良好的囊胚或 ______ 胚进行移植.为了提高胚胎利用效率,可在这两个阶段进行胚胎分割,胚胎分割可以看作动物 ______ (填“有性”或“无性”)繁殖的方法之一.
              (4)近年来,关于胚胎干细胞的研究越来越多.胚胎干细胞具有发育的全能性,如图所示的细胞A和细胞B分别是 ______ 细胞、 ______ 细胞,可以从这些细胞中获得胚胎干细胞.
            • 4. 回答下列有关现代生物科技专题的问题:
              (1)基因工程中能连接两种末端的“分子缝合针”是 ______ .基因工程的核心步骤是 ______
              (2)进行植物体细胞杂交时,化学法一般是用 ______ 作为诱导剂来诱导细胞融合.用动物细胞制备的单克隆抗体最主要的优点是 ______
              (3)胚胎工程中的最后一道“工序”是 ______
              (4)囊胚时期可发育成胎儿各种组织,个体较大的细胞是 ______ 细胞,而 ______ 细胞可以用于性别鉴定,该处细胞将来会发育成 ______
            • 5. 干扰素是抗病毒的特效药,干扰素基因缺失的个体,免疫力严重下降.科学家利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗.根据所学的知识,回答以下问题:
              (1)ES细胞是由早期胚胎或 ______ 中分离出来的一类细胞,在功能上具有 ______ 性.
              (2)该过程需要构建含有干扰素基因的基因表达载体,该结构除启动子外,还必须有 ______ ______ 和干扰素基因等.
              (3)经改造的胚胎干细胞移植之前先要进行动物细胞培养,该培养过程需要适宜的条件,其中CO2的作用是 ______ ;为防止细菌的污染,可向培养液中添加一定量的 ______ ;培养液应定期更换,其目的是 ______
              (4)为检测干扰素基因是否表达,可以采用 ______ 的方法.
            • 6. 目前,器官移植面临的世界性难题是器官短缺.现代生物工程技术的兴起迎来了解决这一难题的曙光.
              (1)利用转基因动物作器官移植的供体.科学家将目光集中在小型猪身上,实现这一目标的最大难题是 ______ .科学家试图用基因工程方法对动物器官进行改造:向器官 ______ (填“供体”或“受体”)基因组中导入某种调节因子,以抑制 ______ (抗原或抗体)决定基因的表达,或设法除去该基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪.
              (2)利用克隆技术获得器官.据图回答下列问题
              1、图示过程应用到的生物技术主要有 ______
              2、若将上述技术用于白血病病人的骨髓移植,图中患者是O型血,提供卵细胞的女性是AB型血,则骨髓移植成功后患者的血型是 ______ 型.
              3、按上述方法克隆器官在器官移植方面的主要优点是 ______
              4、在克隆人的问题上,中国政府的态度是 ______
              ①禁止生殖性克隆人②坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验) ③不反对治疗性克隆 ④不反对生殖性克隆和治疗性克隆
              A.①②B.①②③C.②③④D.①②③④
              (3)利用ES细胞培养技术获得移植器官.ES细胞在培养液中加入 ______ 可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化.如果要移植自身ES细胞培育出的器官,患者还是否需要长期使用免疫抑制药物? ______ (是或否)
            • 7. 约翰•伯特兰•戈登和山中伸弥因在“体细胞重编程技术”领域做出革命性贡献而获得诺贝尔生理学或医学奖.请回答下列问题:
              (1)1962年约翰•伯特兰•戈登通过实验把蝌蚪肠上皮细胞的细胞核移植进入去核的卵细胞中,成功培育出“克隆青蛙”.因动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐 ______ ,但此实验说明已高度分化的动物体细胞的 ______ 仍具有发育全能性.更多的实验证明,到目前还不能用类似 ______ 技术(克隆植物的方法)获得克隆动物.
              (2)所谓“体细胞重编程技术”是将体细胞重新诱导回早期干细胞状态,即获得诱导性多能干(iPS)细胞.山中伸弥把4个关键基因转让小鼠的成纤维细胞,并整合到染色体的 ______ 上,使其转变成iPS细胞;为确定基因是否进入成纤维细胞可用 ______ 技术检测.
              (3)在研究中可通过 ______ 技术获取大量iPS细胞,该过程一般需先加入 ______ 处理一段时间,分散成单个细胞,然后分瓶继续培养;另外,iPS细胞还需置于二氧化碳培养箱中培养的目的是 ______
            • 8. 图为人类对克隆羊技术的拓展及应用的设想.请据图回答问题:

              (1)图中所涉及的现代生物技术有 ______ 等(至少写三个).
              (2)若利用图中过程最终获得婴儿说明 ______ 具有全能性,两个婴儿性状与 ______ 基本相同.
              (3)使用培养基进行重组细胞培养时,通常要加入 ______ 等天然成分,为防止培养过程中杂菌污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的 ______ .培养过程中通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含 ______ 的混合气体的培养箱中进行培养.
              (4)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,必须用 ______ 处理内细胞团,使之分散成单个细胞.
              (5)胚胎干细胞在形态上具有的特点是 ______
            • 9. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 ______
              (2)步骤②中,重组胚胎培养到 ______ 期时,可从其内细胞团分离出ES细胞.
              (3)步骤③中,需要构建含有基因Rag2的表达载体.可以根据Rag2基因的 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.该基因表达载体上除含Rag2基因外,还应含有 ______ (至少写出两个).用 ______ 方法将基因表达载体导入ES细胞.
              (4)为检测Rag2基因的表达情况,利用 ______ 原理,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
            • 10. 如图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图.请回答:

              (1)胚胎干细胞可以从动物胚胎发育至 ______ 期的内细胞团中分离得到.
              (2)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的.骨髓移植的实质是将图中 ______ 细胞移植到患者体内.与异体移植相比,胚胎干细胞培育出的细胞移植最大的优点是 ______
              (3)在制备单克隆抗体过程中,用B淋巴细胞与 ______ 融合,因为B淋巴细胞可以 ______ ,而与其融合的细胞在体外可以 ______ ,经多次筛选融合后的细胞,最终得到能分泌 ______ 的杂交瘤细胞.
              (4)在动物细胞培养时,通常在 ______ 条件下保存细胞.
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