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            • 1. 如图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)进行的相关研究.请回答下列问题:

              (1)ES细胞可取自囊胚的 ______ ,过程b将ES细胞置于饲养层上进行培养,加入动物血清和抗生素等物质,可维持细胞 ______ ;加入抗生素的目的是 ______
              (2)使用PCR技术扩增致癌基因的前提是 ______ .过程a为检测致癌基因是否插入ES细胞的染色体DNA上,可采用 ______ 技术.
              (3)过程d移入的胚胎能够存活,是因为代孕子宫并不会对其发生 ______ ,同时能够与受体子宫建立正常的 ______ 联系.
              (4)暂不移入代孕小鼠的早期胚胎可使用 ______ 保存.
            • 2. 在治疗人类某些疾病时,人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的组织器官后,可用于组织器官的移植,操作流程如图所示.请回答下列问题:
              (1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的 ______ 或胎儿的 ______ 中分离得到的一类细胞.
              (2)进行图中过程①时,需将体内取出的卵母细胞在体外培养至 ______ 期,该期卵母细胞核的位置靠近第一极体,可用微型吸管将之与细胞核一并吸出.由于能保持正常的二倍体核型,供体细胞一般都选用 ______ 的细胞.
              (3)过程②要向培养液中通入一定量的氧气和二氧化碳,二氧化碳的作用是 ______ ,为防止杂菌污染,动物细胞培养液中要加入一定的 ______
              (4)图中过程③④表示从囊胚中取出细胞.将其培养在 ______ 细胞上能维持不分化的状态,形成大量胚胎干细胞.图中过程⑤在培养液中加入 ______ ,就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化,用于患者的组织器官移植.
            • 3. 科研工作人员利用胚胎干细胞(ES细胞)通过胚胎工程克隆鼠,以供医学治疗需要,其技术流程如图:

              (1)图中的X细胞可以称为 ______ 细胞.
              (2)图中的X细胞依次经 ______ 后由代孕母鼠产生克隆鼠.
              A.核移植、胚胎培养、胚胎移植       B.胚激活、胚胎培养、胚胎移植
              C.胚胎培养、胚激活、胚胎移植       D.核移植、胚激活、胚胎体外培养
              (3)在克隆胚胎的培养基中以 ______ 作为能源物质.
              (4)为了提高已有胚胎的利用率,可釆取 ______ 技术.进行胚胎移植时,代孕母鼠对移入子宫的克隆胚胎基本上不发生 ______ ,这为克隆胚胎在代孕母鼠体内的存活提供了可能.
              (5)若分离出内细胞团进行胚胎干细胞培养,当干细胞达到一定的密度时,需进行 ______ 培养以得到更多数量的细胞.还可以对胚胎干细胞进行 ______ ,通过一系列的培育过程,以获得适合人体移植的动物器官,减弱或消除排斥反应.
            • 4. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

              (1)从黑鼠体内获得组织细胞后进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要利用 ______ 酶处理,对其进行的初次培养称为 ______ ,培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为 ______
              (2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为 ______
              (3)精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入 ______ 中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力.
              (4)图中重组囊胚通过 ______ 技术移入白鼠子宫内继续发育.暂不移入的胚胎可使用 ______ 方法保存.
              (5)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的 ______ 分离培养获得,还可以从 ______ 中获得.iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向 ______ 后用于疾病的细胞治疗.
            • 5. 电影中,“蜘蛛侠”能产生高强度的蜘蛛丝,现实中的基因工程也创造出了“蜘蛛羊”,该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域.请回答:
              (1)实验中,通常用ES细胞作为目的基因的受体细胞,这是因为ES细胞在功能上具有 ______ 特征.这种细胞一般可以从哺乳动物的 ______ ______ 中分离出来.
              (2)在培养重组细胞时,为了维持不分化的状态,在培养液中要加入 ______ .为防止杂菌污染,可以在细胞培养液中添加一定量的 ______
              (3)胚胎移植时,通常将早期移植到同种且 ______ 与供体相同的动物体内,受体对外来胚胎基本上不发生 ______ .正常发育后产出“蜘蛛羊”,这种生殖方式为 ______ .若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”,可将 ______ 阶段的胚胎进行分割.
              (4)科学家为保证乳汁中有蛛丝蛋白,应该用 ______ 技术,先检测蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上.
            • 6. 白血病是由于造血干细胞增殖分化异常而引起的恶性增殖性疾病.目前治疗白血病的主要方法是骨髓移植,但骨髓配型的成功率较低,大大限制了白血病的治疗.随着基因工程的日渐兴起,迎来了基因治疗白血病的曙光.请回答下列相关问题:
              (1)骨髓移植必须进行骨髓配型实验,原因是 ______ .目前,临床上通常通过使用 ______ 来提高造血干细胞移植的成活率.
              (2)造血干细胞移植之前先要进行培养.动物细胞培养一般分为 ______ ______ 两个阶段.对于培养的环境条件,除需要适宜的温度、无菌无毒等以外,还要向培养液中通人氧气和二氧化碳,通人氧气的目的是 ______ ,通人二氧化碳的目的是 ______ ;对子所用的培养液,应定期更换,其目的是 ______
              (3)在进行细胞移植前,有时需对移植的细胞进行基因改造.要了解基因改造是否成功,可在分子水平上检测是否翻译成了相应的蛋白质,常用的方法是 ______
              (4)上述使用的正常细胞,通常为 ______ 代以内,以保持细胞正常的二倍体核型.
              (5)哺乳动物的胚胎干细胞是从 ______ 中分离出来的一类细胞,可以在体外被诱导 ______ 形成新的组织细胞,这使科学家进一步培育人造骨髓成为可能.
            • 7. 回答有关胚胎工程的问题:
              (1)为了获得足够数量的卵细胞,先利用 ______ 刺激供体雌性鼠超数排卵,然后从 ______ 冲取,获取的精子也要进行 ______ 处理,在 ______ 中完成体外受精.
              (2)早期胚胎在 ______ 液中培养,当胚胎培养到 ______ 阶段时,可进行胚胎移植.通过 ______ 技术可获得遗传物质相同的两个胚胎,但要将囊胚阶段的 ______ 均等分割.若要鉴定胚胎的性别,可获取 ______ 细胞进行做鉴定.
              (3)在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行 ______ 处理.
              (4)胚胎干细胞形态上具有 ______ 的特性,它在添加 ______ 的培养液中可以维持不分化的状态.
            • 8. 图1为动物的克隆研究过程,其中Ⅰ~Ⅶ代表有关过程,a~h代表有关结构或个体.

              (1)Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ过程证明了 ______
              (2)过程Ⅴ取出的细胞f是 ______ ,它在功能上的特点是 ______
              (3)动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加 ______
              (4)Ⅳ过程用的技术是 ______ .若d为囊胚时期,可以取 ______ 对克隆早期胚胎进行性别鉴定.
              (5)若不考虑环境因素影响,克隆羊的性状全部像提供细胞核的绵羊吗? ______ .原因是 ______
            • 9. 请回答下列现代生物科技问题:
              (1)基因工程的工具之一限制酶主要是从 ______ 中分离纯化出来的.将目的基因导入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为 ______ ,从分子水平检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是 ______
              (2)将目的基因导人动物细胞培育转基因动物常用的受体细胞是 ______ ,经早期胚胎培养和 ______ ,使其发育成具有新性状个体.
              (3)胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞,在功能上具有 ______ ,在 ______ 细胞上或在添加抑制因子的培养液中培养可以增殖而不发生分化.
              (4)转基因产品的安全性问题一直是争论的焦点,原因之一是由于科学发展水平的限制,目前科学家对基因的 ______ 、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解的相当有限.
            • 10. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中所选的卵母细胞应处于 ______ 期.
              (2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其 ______ 分离出ES细胞,ES细胞在形态上表现为 ______ 的特点.
              (3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的 ______ .可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成 ______ ,利用 ______ 技术扩增Rag2基因片段.用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
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