10．
病毒介导基因转移是现在基因治疗研究的最新方向，美、法等国成功采用腺病毒载体进行心、脑、肺、肝内胆管和肌肉组织的体内基因转移．其具体思路如图所示：
回答下列问题：
（1）如果要在短时间内获得较多的目的基因，通常采用______技术，在操作步骤中包括两次升温和一次降温，其中降温的目的是______．
（2）构建基因表达载体时需要用到的工具酶有______．
（3）作为接受转移基因的体细胞应具有的特点是______（写出一点即可）．在进行细胞培养时，当细胞贴满瓶壁时需用______酶处理，使之分散成单个细胞，培养液中还需通人无菌气体，其中通入CO
2的目的主要是______．
（4）如果检测发现目的基因被成功导入了受体细胞，但却没有检测到目的基因相对应的蛋白质，应考虑位于目的基因首端的______和末端的______是否设计好，并从这方面进一步改善．