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            • 1.

              科学工作者将抗虫毒蛋白基因通过载体转入棉花细胞,获得了很好的抵抗棉铃虫的作用。在研制抗虫棉的过程中,利用标记基因,可以快速检查基因表达载体是否导入棉花细胞,然而,即使基因表达载体已经导入棉花细胞,也不能确定转基因过程已经取得成功。因此,在该项工程的最后阶段,需要做如下一系列检测:

              (1)用放射性同位素标记的________________________________作探针,可以分别检测棉花细胞中是否有_____________________________________。

              (2)向棉花细胞的匀浆中加入特定的________,可以检测棉花细胞中是否能够产生抗虫毒蛋白。

              (3)除了上述分子水平的检测外,还需要做个体水平检测。其方法是____________________________________________________________。

              (4)我国西北的一些地区年降雨量很小,只适宜种植少数的草本植物,但却被硬性规定种植转基因的抗虫棉,结果造成减产。这个案例主要违背了生态工程的________________原理。

              (5)一般来说,生态工程的主要任务是对_________________________________进行修复,对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善,并提高生态系统的生产力。

            • 2.

              北极比目鱼中有抗冻基因,下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图,请回答:


              (1)利用过程①的方法构建的基因文库是________,除了从基因文库中获取目的基因以外,常用的获取目的基因的方法还有________和________。

              (2)过程②中常需要使用限制酶和DNA连接酶,既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是_________________________。

              (3)为使过程①获取的目的基因在番茄细胞中能够表达,在构建表达载体时,需要将目的基因插入_____________,并且需在目的基因的首端和尾端分别加入___________、__________。

              (4)此题中将目的基因导入受体细胞的方法是_____________。

              (5)要检测番茄的DNA上是否插入抗冻基因,应以_______________为探针,与番茄基因组DNA杂交;要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中正确表达,应通过_____________法检测转基因番茄植株中该基因的表达产物是否呈阳性。

            • 3.

              下表是某同学做实验时列举的实验材料和实验试剂等相关内容。据表回答问题:

               组别

              材料

              实验试剂

              观察内容

              A

              稀释的蛋清

              试剂甲

              颜色反应

              B

              10 mL 3%过氧化氢

              溶液

              新鲜的发芽的小麦

              种子研磨液 

              有大量气泡生成,将点燃的卫生香插入试管,火焰变得明亮 

              C

              紫色洋葱鳞片叶外表皮

              0.3 g /mL蔗糖溶液

              质壁分离

              D

              蔗糖溶液

              斐林试剂

              实验变量乙

              (1) A~D组实验中需要使用显微镜的是_____               

              (2) A组实验所用的试剂甲是____     ____。观察到的颜色是                           

              (3) B组实验可证明发芽的小麦种子中含有___     ___;若D组实验的观察内容为“是否出现砖红色沉淀?”,预期结果为__ _  __(填“出现”或“不出现”)。

              (4)如果把C组实验中已发生质壁分离的紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞及时浸润在清水中,则会发生___              _现象。

            • 4.

              苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得,为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用,学者做了大量研究,相关实验过程及结果如下:

              ① 取小鼠肝癌Hepal-6细胞;

              ② 制成单细胞悬液,等量接种于多孔板,加入等量细胞培养液,每组设5个平行孔;

              ③ 于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h;

              ④ 加入等量不同浓度的SW溶液,于37℃、5%CO2培养箱中培养;

              ⑤ 分别在24 h、48 h、72 h时摇匀后吸取培养液,观察并记录结果,得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线,如图所示;


              ⑥ 将培养48h的培养液离心,细胞染色,在荧光显微镜下观察拍照,记录癌细胞和凋亡细胞的数目,并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况,汇总统计结果见下表。

              培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达水平

              SW/μg·mL-1

              癌细胞数目

              凋亡细胞数目

              Bax蛋白

              Bcl-2蛋白

              0

              ++++

              +

              +

              ++++

              0.5

              +++

              ++

              ++

              +++

              1

              ++

              +++

              +++

              ++

              2

              +

              ++++

              ++++

              +


              注:“+”的数量表示相对值的大小。

              请回答下列问题:

              (1) 实验中进行小鼠肝癌Hepal-6细胞培养的原理是____。培养箱中要有适量的无菌空气,原因是______________。肝癌细胞数量增多扩展时,细胞能相互重叠向三维空间发展,形成堆积物,可能的原因是________。 

              (2) 实验步骤③中“于37℃、5%CO2培养箱中培养24h”的目的是____________。 

              (3) 分析图中曲线可知,SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是____________________________________________。 

              (4) 表中结果表明SW可以诱发细胞____,从而抑制肿瘤细胞生长。从两种蛋白质的表达水平来看,Bax蛋白和Bcl-2蛋白对癌细胞凋亡的作用分别是________。 

            • 5. 蛋白质的分离与提纯技术是研究蛋白质的重要技术,DNA的提取和分离及PCR技术是研究DNA的重要技术.根据所学的知识回答下列问题.
              (1)样品处理,红细胞的洗涤要用_ __________反复冲洗、离心.血红蛋白粗分离阶段,若要尽快达到理想的透析效果,可以采用的方法是__________________________ 
              (2)分离蛋白质时,用凝胶色谱法将样品纯化的目的是_ ____________________________。

              (3)DNA粗提取时,常用鸡血作为实验材料,原因是______________________________。实验中有两次使用蒸馏水,第一次使用的目的是________________________________ 。

            • 6.

              请根据下表所列实验内容回答有关问题。

              组别

              实验材料

              实验试剂

              观察记录

              A

              经稀释的鸡蛋清

              双缩脲试剂

              颜色反应

              B

              人的口腔上皮细胞

              甲基绿、吡罗红混合染色剂

              细胞染色情况

              C

              紫色洋葱鳞片叶外表皮

              0.3g/mL蔗糖溶液

              质壁分离现象

              D

              新制蔗糖溶液

              新制的斐林试剂

              颜色反应

              E

              3%的H2O2

              新鲜肝脏研磨液、Fecl3溶液

              气泡多少

              (1)A—E五组实验中需要使用HCl的是___________;需要使用NaOH的是___________

              (2)A—E五组实验中需要使用光学显微镜的是___________,使用高倍显微镜观察的步骤和要点是:①先用低倍镜找到要观察的物像,移到视野中央②转动转换器换上高倍镜头,调节___________,直到看清物像为止。

              (3)A组实验所观察的颜色反应是___________。在B组实验中观察细胞质被染成了红色,说明_____________大部分存在于细胞质中;D组实验水浴加热后,发现观察不到砖红色沉淀?为什么?___________

              (4)C组实验中发生了质壁分离,原因是:①蔗糖溶液大于细胞液浓度;②___________(内因)。

              (5)E组实验证明了酶具有_________,除了这个特性之外,酶还具有哪些特性___________

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