（1）从牛的组织获得单个细胞，通常需要用______________酶处理。

（2）将人血清蛋白基因导入牛的受精卵常用的方法是___________________。

（3）未受精的卵应培养到______期，将细胞核和去核卵细胞组装的技术称为___________，在该过程中要用____________使两细胞融合，构建重组胚胎。

（4）在胚胎发育过程中，____________将发育成转基因牛的各种组织，如果要求转基因牛大批量生产人血清蛋白，则要求获取组织的牛性别是_______。

绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示，请据图回答下列问题。

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程①表示________，获得的DNA必须在两侧添加________和终止子，还要添加________酶能识别切割的碱基序列。

(2)由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________。

(3)在过程⑤培养基中需要添加卡那霉素、植物必需的各种营养成分和植物激素，以保证受体细胞能培养成再生植株。其中过程⑤添加卡那霉素的作用是________。

(4)在个体水平的鉴定过程中，可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。

(1) 基因工程中运用的基因载体必需的元件有启动子、终止子、____、____等。 

(2) 过程②利用了“假病毒颗粒”具有____和能将DNA整合到受体细胞染色体DNA上特点。与正常病毒相比较,这种“假病毒颗粒”的主要特点是________

(3) 科学家利用ES细胞培育出转基因动物依据的主要原理是_________________,在利用合成培养基培养ES细胞时,还要加入______等天然成分。 

(4) 经鉴定,某嵌合小鼠产生的配子中有1/2带有外源基因,请写出利用该嵌合小鼠培育纯合转基因小鼠的思路:_________。 

(1)科学家在进行图中[①]操作时,要用______________________

分别切割运载体和目的基因,还要用__________将运载体和目的基因连接起来,形成___________________________。 

(2)经过[②]操作将目的基因导入________,然后经过组织培养形成抗虫棉植株,此过程体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是________、___________________________

下图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程，请回答下列问题。

③实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL下表所示的3种溶液中，经搅拌后过滤，获得相应的3种滤液，含DNA最少的是滤液         

（2）若图示为“检测生物组织中的还原糖”的实验操作：在检测滤液C中是否含有还原糖时，向C中加入的是              色的斐林试剂，欲得到实验结果，还需要进行的步骤是              。

（3）若图示为“叶绿体色素的提取和分离”的实验操作：

①研磨前加入的B应包括SiO₂、CaCO₃、______，为了防止有机溶剂的挥发，操作过程中除了加快研磨速度外，还需_________________ 。 

②将研磨液进行过滤时，需要在漏斗基部放上       ＿＿＿。

A、转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞)：

（1）图中①过程用到的酶是                 ,所形成的B叫做              。

（2）②过程常用        处理农杆菌,使之成为          细胞,此时利于完成转化过程。

（3）图中③过程需要用到的主要激素有                             ，而且配比不同。

（4）在分子水平上,可采用       的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。

B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。

（1）实验中，去除细胞壁需用到的酶主要有                和                  等。

（2）专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是                    。

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关，获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①是基因工程的核心，通过过程①构建的基因表达载体除了含有KIFⅡ基因外，还必须有启动子、     以及     等。

（2）过程②必需加入     酶，才能获得单个的成纤维细胞。

（3）在过程③中，为了获得更多的卵（母）细胞，需用   处理成年母绒山羊。

（4）在过程④进行之前，需对卵（母）细胞进行                处理。过程④称为              。

（5）过程⑤称为            ，进行该过程的最佳时期是              ，通过      技术可以实现同卵多胎。 过程⑤能够成功进行的生理基础是__________。

    下图表示的是“DNA的粗提取和鉴定”实验的实验步骤。请回答下列问题：

（1）取鸡血时，需要在容器中加入一定量的柠檬酸钠，目的是              。

（2）步骤①和步骤⑤中加蒸馏水的目的分别是               和             。

（3）步骤⑥应该弃去的是        ，步骤⑧加入冷酒精的作用是               。

（4）如果步骤⑩中的A试管加入含DNA的NaCl溶液和二苯胺，则B试管中加入的是

                                      。A试管的现象是                     。

40【生物——选修3：现代生物科技专题】（15）

    EPSPS是叶绿体中的一种酶，它能催化芳香族氨基酸的合成；草甘膦是一种除草剂，它能竞争性抑制EPSPS的作用，而使植物死亡，科学家将EPSPS基因转入大豆，使其在大豆细胞表达更多的EPSPS。下图为转基因大豆在研发过程中步骤和转化过程如图所示，回答相关问题：

（1）EPSPS基因导入大豆细胞的方法是                        。

（2）EPSPS基因应转移至土壤农杆菌的            ，将重组质粒导入土壤农杆菌时，一般要用         处理土壤农杆菌。然后在一定条件下将外植体接种在含              培养基上培养，EPSPS基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。

（3）将上述过程获得的外植体接种在含            的培养基中培养形成抗性外植体，经过               形成愈伤组织。

（4）可用                方法测定EPSPS基因是否整合到大豆基因组中；如何检测转基因植株是否具有抗药性状                             。

(1) 分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法，下图是从各种物质之间的差异角度开展研究。

①  取鸡血细胞液（为什么？）10 mL，加蒸馏水20 mL，同时用玻璃棒快速搅拌。过滤，取，转移到塑料材质的大烧杯中。

②沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入，用玻棒沿一个方向轻轻搅拌，同时不断收集析出的物质。将上述操作结果鸡血中几种物质的析出情况绘制成曲线，据图分析:

③如果只要收集纤维蛋白，可采取的措施是。

④ DNA在饱和度约为的硫酸铵溶液中溶解度最小。

(2) 如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的办法是。若用洋葱提取DNA，需加入一定的进行充分的搅拌和研磨。

(1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中________含量较高。

(2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水20 mL的目的是________________，通过图B所示的步骤取得滤液，再在滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是使滤液中的DNA溶于浓盐溶液中；图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是__________________________________。

(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA（D图中的b试管），溶解后可用________试剂进行鉴定，结果丝状物被染成蓝色，但必需的条件是                 ，从而加快颜色反应速率，同时说明DNA耐________。溶液颜色的变化程度主要与________________________有关。