(1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H₂O等；该培养基中微生物所需的氮源来自________，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是_______________________________________________；培养基灭菌后，需要冷却到________ ℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是___________________________________________________________________________。

(2)为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中，某一实验组平板上的平均菌落数为39个，而空白对照组的平板上出现了9个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

(3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是：_________________________________。

（I）大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌，请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题：

（1）检测饮用水中大肠杆菌的含量时，通常将样品进行一系列的梯度稀释，将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，然后记录菌落数量，这种方法称为_____________。判断下面所示的4个菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是__________________。

（2）用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组？__________（填“需要”或“不需要”），其原因是需要判断培养基___________，对于固体培养基应采用的检测方法是将________________的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________（填“消毒”或“灭菌”）处理；操作者的双手需要进行清洗和________________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的____________的结构。

（4）检测大肠杆菌实验结束后，使用过的培养基及其培养物必须经过________________处理才能丢弃，以防止培养物的扩散。

35.（II）   根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（1）限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。

AATTC……G

G……CTTAA

为使载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是________。

（3）反转录作用的模板是____________，产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

（4）基因工程中除质粒外，________和______也可作为载体。

（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_________________________。

李斯特菌广泛存在于各类食品中，李斯特菌在李斯特菌显色培养基上培育时菌落会呈现蓝绿色。在目前发现的16种李斯特菌中单增李斯特菌是唯一对人有致病性的一种，与其他李斯特菌相比，单增李斯特菌还能合成并分泌磷脂水解酶，使培养基中的磷脂被分解而在单增李斯特菌菌落周围出现白色晕环。

（1）与单增李斯特菌相比，其他李斯特菌不能合成并分泌磷脂水解酶的根本原因是_____________________。

（2）现要检测某食品中是否含有其他李斯特菌和单增李斯特菌，进行了相关实验：

①将该食品样品加入经___________灭菌的李斯特菌选择培养液中培养，培养的目的是_________________。

②将经过培养的菌液接种到鉴定李斯特菌的培养基上，常用的接种方法有___________________。鉴定李斯特菌的培养与李斯特菌选择培养液相比，还需额外添加显色剂、__________和__________。

③将接种后的培养基置于适宜条件下进行培养。一段时间后若培养基上出现___________的菌落，则说明该食品中含有单增李斯特菌。

果醋有促进新陈代谢、调节酸碱平衡、消除疲劳及减肥等功效，该饮料深受广大女士的喜爱，市场上常出现供不应求的情景。某果酒厂的果酒滞销，计划将生产的部分果酒“转变”为果醋。研究人员设置了如图所示的装置：

（1）乙瓶为发酵瓶，你认为甲、丙两个装置瓶中，盛有果酒的是装置瓶________，盛有果醋的是装置瓶________。

（2）在果醋发酵过程中，需要不断向发酵瓶乙中通入无菌空气，原因是___________________，温度应控制在__________________范围内。

（3）在装置瓶乙中，醋酸菌先将乙醇变为__________，最后变为醋酸。

（4）可以在酸性条件下，用________________来检验生产出的果醋中是否含有酒精。该物质与酒精反应使溶液呈________________色。

（5）制作果酒时，提供碳源的物质主要是_____________

下表是培养某微生物的培养基的配方，请回答下列问题：

(4)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和________________。

东湖绿道二期已向市民开放，我市某中学学生模拟公司课外兴趣小组为了调查东湖的水质状况，在东湖白马驿站区域取样后测定了水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。请回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时问，这样做的目的是________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为________________。如果该小组实验组平板上菌落平均数为39个／平板，而空白对照组的一个平板上出现了2个菌落，这种结果说明在此次调查中培养基出现了________________现象。如果将37（即39－2）个／平板作为本组菌落数的平均值，你觉得该做法________________（填“可行”或“不可行”）。

（2）若想确定平板上的菌落是否有大肠杆菌，一般在培养基中加入伊红美蓝，该培养基从功能上划分属于________________培养基。

（3）该小组经讨论决定采用平板划线法分离水样中的细菌，在第二次及以后的划线操作时，应从________________开始划线，这样做的目的是________________。

（4）如下图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。采用该计数方法结果往往较实际值偏________，（填“高”或“低”）原因是________________。

（5）该小组将得烈的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________________的利用率。

回答下列与微生物有关的问题：

（1）在进行微生培养时，为了观察微生物的菌落特征，一般选用______（固体或液体）培养基；为了判断培养基是否成功灭菌，需要将________的培养基放在________培养。

（2）为了从土壤中筛选出能降解尿素的菌株，需要用到__________的选择培养基。

（3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在培养基上加入__________染液，将筛选获得的菌液稀释后接种到________（从用途上分析）培养基，然后挑选出产生__________的菌落作为菌种进行扩大培养。

（4）实验结束后，使用过的培养基应该________处理后才能倒掉。

欲从腐乳中分离出产蛋白酶活力高的毛霉菌株，设计了如下实验流程。回答下列问题：

（1）毛霉属于__核生物，从生态系统的组成成分看，它属于________。在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物产生的_________________将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。

（2）步骤②进行涂布前，需将孢子悬浮液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是_______________。若进行10倍稀释，一般吸取lml悬浮液注入______中，混匀。

（3）孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌，在孟加拉红培养基中加入氯酶素可以抑制细菌的生长。从功能上看，孟加拉红培养基属于_______培养基。

（4）毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙，其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm，其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落______（填“甲”、“乙”、“丙”）作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。

马、牛羊的食物主要是草茎类，其中还有大量的纤维素。它们胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用，土壤中也存在着分解纤维素的微生物。请根据所学的知识，回答下列问题：

（1）纤维素酶是一种复合酶，主要包括C₁酶、C_X酶、___________________。

（2）在培养基中加入_______________可以鉴别纤维素分解菌，其原因是其可以与纤维素结合形成____________________，纤维素分解菌产生的纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖而使其菌落周围出现________________。

国家生活饮用水卫生标准规定：接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，在37℃下经24 h培养，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：

（1）用无菌三角瓶取水样前，取样器（玻璃制品）需使用_____________法灭菌。取水前的这种无菌操作的目的是____________________________。

（2）牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后，需要冷却到50℃才能用来进行_________操作，冷凝后倒置培养。

（3）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将30 mL水样平均分成3份进行过滤，再将3份滤膜分别放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养。在培养过程中，不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有____________（至少写出两点）。为保证可信度，应进行对照实验，对照组与实验组的区别之处是_________________ 。

（4）在37℃下经24 h培养，结果如下表：

据上表结果判断，所取水样测定结果_____（填“符合”或“不符合”）饮用水的标准。

（5）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在含__________培养基上，计算培养基上______（颜色）菌落的数目。